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2013年北京地区小兽中3种病原携带状况调查
目的：了解恙虫病、莱姆病、巴贝西虫病3类疾病病原体在北京市各区小兽中的感染及分布情况。方法2013年4－10月，采用夹夜法捕获小兽并解剖获取其组织样本，采用普通PCR与实时荧光定量PCR方法，检测小兽组织中恙虫病东方体、伯氏疏螺旋体以及巴贝西虫的特异性目的基因。结果2013年北京地区500份小兽样本中恙虫病东方体阳性率为2.40%，来自6个区，以海淀区高（21.43%），其他区恙虫病东方体感染率为2.04%～5.00%；巴贝西虫阳性率为6.40%，来自11个区，以海淀区高（21.43%），其他区巴贝西虫感染率为1.96%～16.67%；检出恙虫病东方体与巴贝西虫共同感染样本4份，复合感染率为0.80%；所有样本中均未检测到伯氏疏螺旋体。结论北京地区小兽中恙虫病东方体的感染不仅局限于发现病例的地区，应进一步加强全市人间病例以及宿主和媒介的监测工作，巴贝西虫小兽间感染在分布范围和感染率方面均高于恙虫病东方体，应加强对基层医生的培训并及时开展高危人群的监测与健康教育。
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人巴贝西虫病研究进展
巴贝西虫病（Babesiosis）是一种由蜱叮咬传播的巴贝虫属原虫寄生于哺乳动物红细胞内的人畜共患病。1957年报道的第一例人巴贝西虫病例，是南斯拉夫一个脾切除术后的农民。1969年美国美国马萨诸塞州南塔克特岛报道第一例免疫功能低下患者罹患巴贝西虫感染。此后在北美、欧洲出现地区性发病的报道，亚洲也有零星报道。近年来，其地理分布正在扩大，埃及、南非、澳大利亚、巴西、日本、韩国等相继报道了人巴贝西虫病例，同时巴贝虫种属也突破了地域的局限。此前在中国大陆和台湾报道了近30例人巴贝西虫病［1］，中缅边境报道了巴贝西虫、疟原虫的混合性感染［2］。2011~2014年黑龙江省牡丹江市发现了48例人巴贝西虫感染［3］。在中国大陆以致亚洲报道的病例逐渐增多，人巴贝虫病亚种威胁人类健康，在人口密度比较大的中国必须引起足够的重视［4］。随着对该病的重视，检验手段的提高，患病率有逐年增高的趋势。但我国感染人的病例报道甚少，临床医生对人巴贝西原虫病领域还缺乏必要的了解，而且临床表现与疟疾极易混淆易而误诊。现对人巴贝西虫的流行病学、诊断及治疗等方面进展做一综述。
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输入性恶性疟1例
疟疾是由人类疟原虫感染引起的寄生虫病,疟原虫与人巴贝西虫血涂片镜检下不易区分.本文通过对重庆医科大学附属第一医院收治的1例输入性恶性疟患者的临床表现、诊断、治疗经过、预后等情况进行分析,发现其诊治过程中的不足之处.临床医生须更好地鉴别恶性疟及人巴贝西虫病,提高临床诊断能力,从而及早做出正确诊断及治疗,避免误诊.
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巴贝西虫感染黑线仓鼠生物学特性的变化
目的：建立巴贝西虫感染的黑线仓鼠模型，明确感染后黑线仓鼠生物学特性的变化规律，为巴贝西虫病的检测与防治提供基础数据资料。方法腹腔注射含巴贝西虫的血液感染黑线仓鼠，感染的第0、2、4、6、8、10、12、14、16、23、30、37天每次取5只动物采集抗凝血和全血，制备血涂片，通过吉姆萨染色检测虫体繁殖情况；分离血液总 DNA，用 REAL－TIME PCR 检测巴贝西虫的在宿主体内的繁殖规律；用全自动生理生化检测仪测定血液生理生化指标；处死动物后分别采集心、肝、脾、肺、肾等器官，称重测定脏器系数；用 ELISA 法检测感染动物血清中IL－2浓度。结果感染后第4天黑线仓鼠体内的巴贝西虫数量多，之后整体呈下降趋势，在第12天有一个短暂升高。感染动物的脏器系数变化大的属于肝脏和脾脏，心、肺和肾脏系数在整个感染期内稍有波，均在正常值范围内。感染动物的血细胞均有波动，在第10、23天两次达峰值，其中白细胞变化为剧烈；检测到变化的血液生化指标在第12天达峰值。感染动物血清中的 IL－2在第10天达峰值，之后连续下降。结论感染巴贝西虫的黑线仓鼠具有典型的蜱传寄生虫病特点，病原侵入一周内达繁殖顶峰，且病原可在宿主体内长期潜伏。宿主免疫响应在第2周达到峰值，与免疫相关的脏器及血细胞有明显的应激反应。据此，可有针对性的开展巴贝西虫病的诊断与防治。
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巴贝西虫实时荧光PCR检测方法初步建立及牡丹江市无偿献血者中巴贝西虫流行情况调查
目的 建立一种筛查多种可感染人巴贝西虫(包括Babesia.microti,B.divergens,B.venatorum,Babesia.sp EU1,Babesia_sp._XXB/ Hangzhou等)的实时荧光PCR检测方法;用实时荧光PCR和间接免疫荧光检测(IFA)2种方法分别对牡丹江市无偿献血者血样进行核酸和血清学检测,评估其对当地输血安全的风险.方法 从GenBank下载我国可感染人巴贝西虫的18S rRNA基因序列,并根据序列共同部分设计引物,用引物验标准质粒并优化实验条件,建立实时荧光PCR检测方法.将1 971份无偿献血者的血液标本离心,使其分离成红细胞和血浆2个部分:1971份红细胞标本混样(10份/pool),用已建立的实时荧光PCR进行核酸检测,阳性混样池再拆分检测;其中1 000份血浆标本用IFA法进行B.microti IgG检测.结果 经琼脂糖凝胶电泳和一代测序验证,标准质粒构建成功且实验条件已经优化,成功建立了实时荧光PCR检测方法,重复性良好,低检测下限为9.69×102 copies/mL;1 971份红细胞样本巴贝西虫核酸检测结果均为阴性;1000份血浆样本B.microti IgG血清学检测结果显示共13例阳性(阳性率1.3％),其中8例(0.8％)滴度为1∶64,5例(0.5％)滴度为1∶128.结论 本研究成功建立了一种筛查多种感染人巴贝西虫的实时荧光PCR核酸检测方法;标本检测结果显示牡丹江地区有既往B.microti感染,提示巴贝西虫已经对该地区血液安全造成一定威胁,但风险大小有待进一步评估.
