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心脏再生的研究进展
冠心病及心肌梗死的发生率正呈逐年上升趋势,成人心肌细胞有限的再生能力限制了心肌梗死后心脏功能的恢复.斑马鱼及新生乳鼠心脏再生能力的发现给该领域带来了新的方向及希望.心脏再生动物模型种类日渐丰富,不同的生物模型对于不同的研究目的有着重要的作用.本文总结了近年来心脏再生动物模型的发展,并对心脏再生机制探索中所取得的重要研究进展进行论述.
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黄芪丹参1∶1配伍对缺氧缺血性脑损伤乳鼠脑组织神经细胞凋亡的影响
目的 通过研究黄芪丹参1∶1配伍对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)乳鼠脑组织Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表达的影响,探讨其对脑组织的保护作用及机制.方法 选择生后7 dSD乳鼠77只,随机分为假手术组(28只)、模型组(28只)及中药组(21只),应用免疫组化法观察不同时间点各组乳鼠脑组织Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白的表达情况.结果 模型组在造模后各时间点Caspase-3及Bax的含量均显著高于假手术组,差异有统计学意义(P＜0.05),模型组在造模2h后Bcl-2含量显著高于假手术组,差异有统计学意义(P＜0.05),在造模1d、3d后Bcl-2含量有升高趋势,但差异无统计学意义,造模7d后,Bcl-2含量有下降趋势;中药组在造模后各时间点Caspase-3、Bax含量均较模型组显著降低,Bcl-2含量显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 黄芪丹参1∶1配伍能有效上调HIBD乳鼠脑组织Bcl-2蛋白表达,下调Caspase-3及Bax蛋白表达,从而抑制神经细胞凋亡,减轻缺氧缺血所致的脑组织损伤.
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大蒜素对新生乳鼠肠道细菌移位的影响
目的 考察大蒜素对新生乳鼠肠道细菌移位的作用.方法 乳鼠140只随机分为10组:0,1,7,14,28 d空白对照组和0,1,7,14,28 d大蒜素组,每组14只.空白对照组腹腔注射0.9％氯化钠注射液0.03 mL/g,1次/d;大蒜素组腹腔注射大蒜素注射液0.005 mg/g,1次/d.0d组在出生后即处死,其余各组均在各时间点末次给药后20 min处死乳鼠并收集指标.结果 与对照组比较,大蒜素连续28 d后,新生乳鼠体重显著增加(P＜0.05),G+球菌和Gˉ杆菌的浓度显著降低(P＜0.05),乳酸杆茸的浓度无显著影响(P＞0.05),肠系膜淋巴结、肝和脾的细菌浓度显著降低(P＜0.05),细菌检出的阳性器官数也略低.结论 大蒜素有助于建立新生乳鼠肠道细菌平衡.
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体外培养的乳鼠皮层神经元氧糖剥夺后轴突损伤的实验观察
目的：建立乳鼠皮层神经元体外培养模型，观察氧糖剥夺处理对神经元轴突损伤的影响。方法取出生24 h 内的 SD 大鼠大脑皮层神经元，采用逐渐降低培养液中血清浓度和添加阿糖胞苷的方法培养、纯化神经元，观察其形态并鉴定。建立氧糖剥夺模型，随机分为正常对照组和氧糖剥夺处理组（2、4、6、8 h 各1组）。采用噻唑蓝比色法测定神经元活性，βⅢ-tubulin 免疫荧光染色观察轴突形态学变化。结果神经元培养3～5 d 后，胞体变得饱满并分出轴突和树突，突起之间逐渐交织成密集网络，神经元微管相关蛋白-2（MAP-2）标记阳性率＞95％。与正常对照组相比，随着氧糖剥夺时间的延长，轴突网络逐渐损伤、崩解，同时神经元活性呈梯度下降（P ＜0.01）。结论该研究成功建立了神经元体外原代培养及氧糖剥夺模型，并观察到在氧糖剥夺处理过程中神经元的轴突损伤及同时出现的神经元活性下降。
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柯萨奇病毒A16型灭活疫苗保护效果研究
目的:研究柯萨奇病毒A 16型候选疫苗株(CA 16-KM)经灭活后免疫小鼠,对病毒攻击的保护效果.方法:用Vero细胞进行CA 16-KM株培养,病毒收获后经浓缩、蔗糖密度梯度离心进行纯化及β-丙内酯灭活,用酶联免疫吸附法(ELISA法)对灭活后的CA 16-KM病毒液进行抗原含量的测定并在Vero细胞上盲传3代对灭活后CA 16-KM毒株的残余毒力进行检测.灭活后的病毒加入氢氧化铝佐剂(质量浓度为1 mg· mL-1),经离心及PBS重悬,制成实验性灭活疫苗.分别于第0天和第14天经肌肉注射免疫8周龄ICR母鼠,对照组用等体积PBS代替.分娩后24h内的新生乳鼠用100 LD50的CA 16强毒株(CA16-CC)经颅内注射进行攻毒,攻毒后连续21 d观察其临床症状,研究该灭活疫苗对新生乳鼠的保护效果.结果:经β-丙内酯灭活后的CA 16-KM在Vero细胞上盲传3代均无细胞病变效应(CPE)出现,灭活后的CA 16-KM抗原含量为320 EU·mL-1.经注射实验性疫苗的乳鼠攻毒后全部存活,表明CA 16-KM株制备的灭活疫苗诱导的免疫反应可对新生乳鼠产生100％的保护作用.结论:β-丙内酯对CA 16-KM毒株的灭活效果较好;CA 16-KM疫苗候选株灭活后具有良好的免疫原性,可以保护新生乳鼠抵抗CA 16病毒的攻击,也许是研制CA 16灭活疫苗的理想毒株.
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新生乳鼠大脑皮层神经元原代培养的实验观察
目的:建立一种科学易行的新生乳鼠大脑皮层神经元体外原代培养方法.方法:取出生24h内SD大鼠皮层神经元,采用逐渐降低培养液中血清浓度和添加阿糖胞苷(Ara-c)的方法培养、纯化神经元,观察其形态并鉴定.结果:神经元种植24小时后已完全贴壁;培养3-5天后,胞体变得饱满并分出轴突和树突,突起之间逐渐交织成密集网络;神经元微管相关蛋白-2(microtubule associated protein-2,MAP-2)标记阳性率＞95％.结论:本实验成功建立了一种科学简便的神经元体外原代培养方法.
