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抑制水通道蛋白4可降低脊髓后角胶质细胞细胞外调节蛋白激酶信号的活化改善坐骨神经损伤导致的神经病理性疼痛
目的 探讨腰椎间盘突出引起的坐骨神经痛中,抑制水通道蛋白4(AQP4)对脊髓胶质细胞以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路活化的影响.方法 取8周龄雄性SD大鼠90只,分为假手术组18只,坐骨神经慢性压迫损伤(CCI) +DMSO组36只,CCI+ TGN-020组(AQP4抑制剂)36只.CCI模型应用动物行为学,Western blotting方法,免疫荧光(双重染色)等方法检测.结果 Western blotting显示,细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38MAPK信号通路及星形胶质细胞在神经损伤之后活化;免疫荧光在AQP4的表达被TGN-020抑制之后,胶质细胞及ERK、JNK、p38MAPK信号通路的活化被削弱,p-ERK和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)共定位的细胞数量在损伤后明显增多,而TGN-020可减少之.结论 抑制AQP4可抑制坐骨神经损伤引发的脊髓后角星形胶质细胞活化及MAPK信号通路活化,且可以通过抑制脊髓后角ERK通路的活化来抑制星形胶质细胞的活化,从而改善坐骨神经损伤所致神经病理性疼痛.
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黄芩素对HaCaT细胞光老化模型ERK信号通路的影响
目的 研究黄芩素对皮肤光老化模型中细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响.方法 使用照射强度为0.5 mJ/cm2的UVB型紫外线辐照计,照射不同时间制备光老化细胞模型.细胞分为对照组,模型组,黄芩素1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L组.使用流式细胞仪检测各组细胞中活性氧(ROS)量的变化,qRT-PCR检测各组细胞中白细胞介素-1α(IL-1oα)、IL-8 mRNA表达量,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测各组细胞中IL-1α、IL-8、p-ERK、ERK蛋白的表达量.结果 与对照组比较,模型组细胞出现皱缩、椭圆形,细胞边缘有破损现象,趋于死亡状态.与模型组相比,1×10-mol/L黄芩素组细胞破损现象减轻,1×10-6 mol/L黄芩素组细胞无明显的皱缩及破损现象,1×10-5 mol/L黄芩素组细胞状态良好,接近于正常状态;与对照组比较,模型组细胞中ROS的量显著升高(P＜0.01).与模型组比较,1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L黄芩素组细胞中ROS的量显著降低(P＜0.01);与对照组比较,模型组IL-1α、IL-8 mRNA表达量显著升高(P＜0.01).与模型组比较,1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L黄芩素组细胞中IL-1α、IL-8 mRNA的表达量显著降低(P＜0.01);与对照组比较,模型组细胞IL-1α、IL-8、p-ERK蛋白表达量显著升高(P＜0.01),ERK蛋白表达量不变.与模型组比较,1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L黄芩素组细胞中IL-1α、IL-8、p-ERK蛋白表达量显著降低(P＜0.05、0.01),ERK蛋白表达量不变.结论 黄芩素对HaCaT细胞光老化模型的保护作用主要通过降低ROS的量,阻断ERK信号通路,进而降低炎症因子的产生实现的.
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绿原酸对光老化ESF-1细胞ERK信号通路的调控研究
目的 探讨绿原酸对光老化人皮肤成纤维细胞ESF-1光损伤的保护作用,及其对细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响.方法 用20 J/cm2的长波紫外线(UVA)照射ESF-1细胞制备光老化模型,以不同浓度绿原酸处理光老化细胞,检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)量,RT-PCR法检测细胞中ERK1、ERK2、基质金属蛋白酶1(MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)mRNA的表达量,Western blotting法检测p-ERK1/2蛋白的表达,酶联免疫法检测细胞上清液中MMP-1、TIMP-1的量.结果 UVA照射ESF-1细胞后,SOD活性、GSH-Px活性、TIMP-1 mRNA的表达量、TIMP-1的量明显降低,MDA水平、ERK1、ERK2、MMP-1 mRNA的表达量、p-ERK1/2、MMP-1水平明显升高(P＜0.01); 10.0、1.0 μmol/L绿原酸能够显著改善光老化ESF-1细胞的损伤(P＜0.05、0.01).结论 绿原酸调控光老化ESF-1细胞ERK信号通路,从而减轻UVA对ESF-1细胞的损伤.
关键词： 绿原酸 ESF-1细胞 长波紫外线 光老化 细胞外调节蛋白激酶信号通路 -
水通道蛋白4在大鼠坐骨神经损伤导致的神经病理性疼痛中的作用及机制
目的:对坐骨神经损伤大鼠的脊髓后角神经元中水通道蛋白4(AQP4)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的激活之间的关联性做系统的探讨.方法:制作大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型,经腹腔给予AQP4抑制剂TGN-020,应用DMSO组作对照,应用Von Frey纤毛进行机械痛检测,以免疫荧光(双重染色)检测脊髓ERK、NeuN的表达.结果:脊髓后角p-ERK和NeuN共定位的细胞在神经损伤后可见增加,而给予TGN-020后,同时表达p-ERK和NeuN的细胞明显减少.TGN-020抑制AQP4的表达可以减轻神经损伤产生的痛觉敏感性异常.结论:抑制AQP4可以通过抑制脊髓后角神经元中ERK通路的活化来改善坐骨神经损伤导致的神经病理性疼痛.
关键词： 坐骨神经损伤 脊髓 水通道蛋白4 细胞外调节蛋白激酶信号通路 大鼠 -
细胞外调节蛋白激酶信号通路在体外诱导神经干细胞向施万细胞分化中的作用
目的:探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路在体外诱导大鼠海马神经干细胞向施万细胞分化中的作用.方法:体外培养大鼠海马神经干细胞,向培养液中添加混和诱导剂诱导神经干细胞向施万细胞分化.将培养细胞分为2组,对照组采用含诱导剂的培养液进行培养,免疫印迹法检测ERK磷酸化水平,实验组中在此基础上添加ERK通路抑制剂U0126,免疫荧光双标染色计数胶质细胞特异性标记物S100及P75阳性细胞比例.结果:加入诱导剂后,磷酸化ERK1/2水平上升;3周后,可见P75、S100阳性的施万细胞.加入通路抑制剂后,实验组的ERK磷酸化水平逐渐降低.与对照组相比,实验组的施万细胞所占百分比明显减少.结论:ERK通路在神经干细胞向施万细胞的诱导分化中起重要作用.
关键词： 神经干细胞 施万细胞 细胞外调节蛋白激酶信号通路 分化
