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恐伤孕鼠对其21日龄子代情绪的影响
目的:探讨恐伤孕鼠对其21日龄子代情绪的影响.方法:采用旁观电击法制备恐伤母鼠动物模型.应用旷场实验、糖水偏好实验、悬尾实验分别测试对照组和模型组21日龄仔鼠情绪的变化.结果:旷场实验中,模型组垂直得分、水平得分低于对照组(P＜0.05);糖水偏好实验中,模型组糖水消耗量、糖水偏好值低于对照组(P＜0.05);悬尾试验中,模型组在空中静止时间较对照组长(P＜0.05).结论:恐伤孕鼠会造成其子代幼儿期情绪的改变.
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恐伤孕鼠对其仔鼠大脑皮质Reelin、 VLDLR及P-DAB1表达的影响
目的:研究恐伤孕鼠对其仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及P-DAB1表达的影响.方法:将受孕后雌鼠用随机分为正常组、模型组、补肾组,每组各10只.运用恐吓为主的复合应激法刺激造模,正常组不予刺激,造模时间为自分组第1天直至产下仔鼠.补肾组灌胃中药左归丸浓缩剂,2mL/100g体质量/d,正常组及模型组则根据雌鼠体质量予以等量0.9％氯化钠溶液灌胃.仔鼠出生当天每窝随机取1-2只仔鼠断头取全脑,后将全脑固定,切取包含皮质的脑片.结果:模型组仔鼠大脑皮质区光镜下可见细胞较松散,组织结构较模糊,存在散在片状水肿,水肿区域神经细胞数目减少;补肾组与正常组比较,仔鼠大脑皮质在形态学上无明显改变.与正常组比较,补肾组和模型组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及P-DAB1的蛋白表达均下调(P＜0.01);与模型组比较,补肾组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及P-DAB1的蛋白表达明显上调(P＜0.01).结论:恐伤孕鼠可以引起仔鼠大脑皮质发育异常,而左归丸通过调节Reelin信号通路可阻断或降低仔鼠大脑皮质发育障碍损伤的发生.
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恐伤孕鼠所产80日龄仔鼠认知发育与海马区多巴胺、二羟苯乙酸的相关性
目的 考察恐伤孕鼠所产80日龄仔鼠认知发育与海马区多巴胺(dopamine,DA)、二羟苯乙酸(3,4-dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)含量的影响,并探讨二者的相关性.方法 应用旁观电击法建立恐伤肾孕鼠模型,通过对80日龄仔鼠进行Morris水迷宫实验,观察其认知发育;通过脑立体定位仪在右侧海马区采集脑透析液,应用高效液相色谱-电子俘获检测(HPLC-ECD)法测定仔鼠脑透析液中DA、DOPAC含量.结果 与对照组比较, 80日龄模型组仔鼠平均逃避潜伏期时间增加、游泳速度减慢、20%边缘区域停留时间增长、跨台次数减少,差异有显著性(P< 0.05);80日龄模型组仔鼠海马组织细胞外液中DA、DOPAC的水平在各个灌流时间点均降低,差异有显著性(P < 0.05);80日龄仔鼠海马区单胺类神经递质DA与其平均逃避潜伏期、跨台次数存在正相关,与20%边缘区域停留时间存在负相关关系,相关性显著(P< 0.05);DOPAC与其平均逃避潜伏期、跨台次数存在正相关,相关性显著(P< 0.05).结论 恐伤孕鼠可影响其80日龄仔鼠空间学习记忆能力,减少海马区DA、DOPAC含量,其认知发育水平与海马区DA、DOPAC的含量降低密切相关.
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恐伤孕鼠对其仔鼠长骨早期发育影响的研究
目的:根据肾主骨生长发育理论,研究先天肾虚影响长骨早期发育的情况,论证补肾填精法的作用.方法:采用模拟地震振动、光电刺激复合应激恐吓孕鼠造成子代先天肾虚.将孕鼠分为正常、模型、补肾3组,补肾组灌服左归丸浓缩剂.动态检测出生后仔鼠20 d内平均身长、5周内股骨平均长度、Micro CT检测股骨皮质骨及松质骨微结构参数、第5周股骨钙、磷、羟脯氨酸含量.结果:模型组仔鼠平均身长、股骨平均长度显著降低(P ＜0.05或P＜0.01);各时间点模型组皮质骨厚度、外径周长、皮质骨面积、皮质骨密度减少;股骨矿物质、基质胶原含量减少.上述指标与另两组比较差异显著(P＜0.05).结论:先天肾虚可以影响长骨早期生长发育,出现骨量减少,成骨活性降低,皮质骨发育不良.中药补肾填精治疗,可有效改善先天肾虚仔鼠长骨早期发育不良.
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恐伤孕鼠所产80日龄仔鼠情志与母鼠促肾上腺皮质激素、糖皮质激素的相关性研究
目的:考察恐伤孕鼠所产80日龄仔鼠情志与母鼠促肾上腺皮质激素(Adrenocorticotropic Hormone,ACTH)、糖皮质激素(Glucocorticoids,GC)的相关性.方法:应用旁观电击法建立恐伤肾孕鼠模型,通过对80日龄仔鼠进行旷场试验、糖水偏好实验和悬尾实验,观察其情志改变;采用酶联免疫法(ELISA),检测孕鼠和80日龄仔鼠血浆中ACTH、GC的含量.结果:与对照组比较,模型组80日龄仔鼠垂直得分、水平得分、糖水消耗量和糖水偏好值均降低,空中停止挣扎时间增长,差异有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,模型组恐伤孕鼠血浆ACTH、GC水平均升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);旷场试验中,80日龄仔鼠垂直得分与母鼠GC存在负相关,水平得分与母鼠ACTH、GC均存在负相关,差异有统计学意义(P＜0.05);糖水偏好实验中,80日龄仔鼠糖水偏好值与母鼠ACTH、GC均存在负相关,差异有统计学意义(P＜0.05);悬尾试验中,80日龄仔鼠停止挣扎的时间与母鼠ACTH、GC存在正相关,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:恐伤孕鼠所产80日龄仔鼠的情志改变与母鼠ACTH、GC的变化密切相关.
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恐伤孕鼠对其仔鼠颅骨培养成骨细胞Cx43、BGP表达的影响
目的:从先天肾虚影响颅骨培养成骨细胞Cx43、BGP表达情况入手,研究其影响骨早期发育的机制,并论证补肾填精法的作用.方法:采用模拟地震振动、光电刺激复合应激恐吓孕鼠造成子代先天肾虚.将孕鼠分为正常、模型、补肾3组,补肾组灌服左归丸浓缩剂.取各组新生仔鼠颅盖骨制取培养成骨细胞,观察细胞生长形态、ALP活性测定、RT-PCR检测第7、14、21天Cx43和BGPmRNA表达情况、免疫荧光染色检测第21天Cx43蛋白表达.结果:模型组仔鼠成骨细胞培养第5、7天ALP活性降低;第14、21天Cx43、BGPmRNA表达减少;第21天免疫荧光检测Cx43蛋白表达减少.上述指标与另两组比较差异显著(P＜0.05).结论:先天肾虚导致仔鼠颅骨成骨细胞分化成熟过程中Cx43、BGP表达减少,这是其影响骨早期发育的重要机制之一.左归丸补肾填精治疗可提高Cx43、BGP表达,保证成骨细胞正常功能,促进骨发育.
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恐伤孕鼠对仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达影响
目的 观察恐伤孕鼠对仔鼠大脑皮质组织形态学影响及对大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2的mRNA表达影响.方法 将受孕后的雌鼠用随机取数法分为正常纽、模型组、补肾组,每组各10只.运用恐吓为主的复合应激法刺激模型组和补肾组孕鼠,正常组不予刺激.同时补肾组每日以中药左归丸浓缩剂2ml/100g体重灌胃,正常组及模型组则根据雌鼠体重予以等量生理盐水灌胃,造模时间为自分组第1天直至产下仔鼠.雌鼠分娩后,仔鼠出生当天每窝随机取1～2只仔鼠断头取全脑,固定,染色,切片,在光镜和电镜观察其组织结构和超微病理改变.另每窝随机取1～2只仔鼠断头取全脑匀浆做定量PCR,观察各组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达变化.结果 模型组仔鼠大脑皮质区光镜下可见细胞较松散,组织结构较模糊,存在散在片状水肿,水肿区域神经细胞数目减少;电镜下可见到多数神经细胞出现细胞器结构异常,如线粒体肿胀,高尔基复合体肥大,部分伴有细胞核固缩.补肾组与正常组比较,仔鼠大脑皮质在形态学上无明显改变.补肾组和模型组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达均低于正常组(P＜0.01),模型组仔鼠大脑皮质Reelin、VLDLR及ApoER2mRNA表达低于补肾组(P＜0.01).结论 恐伤孕鼠可以引起仔鼠大脑皮质发育异常,而左归丸通过补肾填精法调节Reelin信号通路从而阻断或降低仔鼠大脑皮质发育障碍损伤的发生.
