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参芪扶正注射液对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响
目的:研究参芪扶正注射液对基底细胞样(basal-like型)乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响,探讨参芪扶正注射液对三阴性乳腺癌的治疗作用机制.方法:体外培养人乳腺癌MDA-MB-231细胞,将其分为参芪扶正注射液组和空白组.采用噻唑蓝(MTT)比色法分别于24,48,72 h检测参芪扶正注射液对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响.采用流式细胞术(FCM)测定细胞周期分布和凋亡情况.实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和免疫印迹(Western blot)检测参芪扶正注射液对MDA-MB-231细胞p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)表达的影响.结果:参芪扶正注射液可抑制MDA-MB-231细胞增殖,高浓度者抑制作用强,即呈现浓度依赖性,体外培养48 h时抑制作用显著.参芪扶正注射液将MDA-MB-231细胞阻滞于细胞周期的S期,进而诱导MDA-MB-231细胞凋亡.Real-time PCR和Western blot发现参芪扶正注射液可上调M DA-M B-231细胞PUMA蛋白和基因表达.结论:参芪扶正注射液可显著抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,导致细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调PUMA基因有关.
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PUMA基因在胃癌组织及细胞中的表达
目的:研究p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)基因的四种剪接体(PUMA-α,-β,-γ及-δ)在胃癌组织及细胞中的表达特点.方法:应用生物信息学分析PUMA基因四种剪接体的结构特点;同时利用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌组织、癌旁组织及不同胃癌细胞系BGC-823和SGC-7901细胞中四种剪接体的mRNA表达水平.结果:PUMA-α和-β在癌旁组织中表达阳性,但在癌组织中表达难以检测,差异显著(t=9.492,15.875,均P<0.05);PUMA-γ和-δ在癌旁及癌组织中均可见表达,且在癌旁组织中的表达量显著高于癌组织(t=4.823,4.056,P<0.05).PUMA-α,-γ及-δ在胃癌不同分化程度的细胞系BGC-823(低分化)及SGC-7901(中分化)中均有表达,但两细胞系间无统计学差异.而PUMA-β在BGC-823中的表达明显高于SGC-7901细胞(t=8.710,P<0.05).结论:PUMA四种剪接体在胃癌组织中的表达下调,与癌的发生呈负相关;PUMA-β的表达还可能与细胞的分化程度有关.
关键词： p53正向细胞凋亡调控因子 胃癌 细胞凋亡 表达 -
PUMA基因在肝癌组织的表达及意义
目的 研究p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)基因mRNA及其功能蛋白在肝癌组织中的表达及其临床意义.方法 用半定量RT-PCR和Western blot方法检测42例肝癌患者的癌组织及其癌旁组织和42肝良性病变组织的PUMA mRNA及其编码蛋白表达.结果 癌组织、癌旁组织和肝良性病变PUMA mRNA的表达量分别为0.81±0.07、0.97±0.04和1.76±0.06,PUMA蛋白的表达量分别为0.48±0.19、0.61±0.12和1.11±0.34;肝癌组织及癌旁组织的PUMAmRNA及其蛋白表达量明显低于肝良性病变组织高于(P＜0.05).结论 PUMA基因在肝癌组织中的表达下调,与癌的发生呈负相关.
关键词： p53正向细胞凋亡调控因子 肝癌 -
牛磺酸对人肺癌细胞株A549细胞凋亡的影响
目的 探讨牛磺酸(Tau)对人肺癌细胞株 A549细胞凋亡的作用及其初步机制.方法 将 A549细胞分为6组:Control组(正常对照组,未给予任何药物处理)和 Tau 1组(给予 Tau 10 mmol·L-1)、Tau 2组(给予 Tau 20 mmol·L-1)、Tau 3组(给予 Tau 40 mmol·L-1)、Tau 4组(给予 Tau 80 mmol·L-1)、Tau 5组(给予 Tau 160 mmol·L-1);阳性对照组DDP 4 mg·L-1,作用时间分别为24、48、72 h.应用 MTT比色法检测人肺癌细胞株A549的细胞增殖,流式细胞术检测人肺癌细胞株 A549的细胞凋亡率,分光光度法检测 Caspase-9、Caspase-3的活性,免疫印迹法检测 p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)的水平及 Bax蛋白、Bcl-2蛋白的表达水平.结果 Tau能够以时间剂量依赖方式来抑制 A549细胞增殖,并显著增加 A549细胞凋亡率.Tau可以明显增加 A549细胞内Caspase-9、Caspase-3的活性,以及诱导A549细胞内PUMA、Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调.Tau对人胚肾细胞293T的细胞活性无明显影响.结论 Tau对人肺癌细胞株A549有增殖抑制和凋亡诱导的作用,其机制可能是Tau通过上调PUMA、Bax表达及下调Bcl-2表达,进而增加Caspase-9、Caspase-3的活性来诱导A549细胞发生凋亡.
关键词： 牛磺酸 人肺癌细胞株A549 细胞凋亡 p53正向细胞凋亡调控因子 -
PUMA与Caspase-3在乳腺癌组织中的表达及临床意义
目的:探讨乳腺癌组织中p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)和Caspase-3的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学方法检测65例浸润性乳腺癌、25例乳腺纤维腺瘤及20例乳腺癌旁组织中PUMA和Caspase-3的表达情况.结果:PUMA在浸润性乳腺癌组织中的表达明显低于乳腺纤维腺瘤组织(15.4％ vs 36.0％,P＜0.05),乳腺纤维腺瘤组织中的表达明显低于乳腺癌旁组织(36.0％ vs 70.0％,P＜0.05).PUMA的表达与肿瘤淋巴结转移、TNM分期、术后复发、雌激素受体(ER)及人类表皮生长因子受体-2(HER-2)密切相关(P＜0.05).Caspase-3在乳腺癌组织中的表达明显低于乳腺纤维腺瘤组织(21.5％ vs 44.0％,P＜0.05),乳腺纤维腺瘤组织中的表达明显低于乳腺癌旁组织(44.0％ vs 80.0％,P＜0.05).Caspase-3的表达与淋巴结转移、术后复发、ER、HER-2及肿瘤分化程度密切相关(P＜0.05).PUMA与Caspase-3在浸润性乳腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.491,P＜0.05).结论:PUMA和Caspase-3在浸润性乳腺癌的发生、发展中起着重要作用,可能成为乳腺癌的分子标志物或治疗的新靶点.
关键词： 乳腺肿瘤 p53正向细胞凋亡调控因子 Caspase-3
