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油红O染色在大鼠脊髓损伤中的应用
目的:探讨油红O染色在评价大鼠脊髓损伤中的应用价值.方法:选取体重220～260 g的SD雄鼠24只,编号后简单随机抽样分为正常对照组与脊髓横断组,正常对照组6只,脊髓横断组18只.脊髓横断组于T10节段横断脊髓.于术后1、2、4周在脊髓横断组分别随机各抽取6只处死,以横断部位为中心取脊髓组织标本.正常组取相同部位脊髓组织标本,行冰冻切片,进行油红O染色观察.结果:正常对照组大鼠脊髓白质均匀着色,与灰质有较明显的区分.脊髓横断组在术后1、2、4周时白质着色不均匀,断端液化坏死灶呈进行性扩大,油红O染色逐渐明显.结论:油红O染色能够较明显的区分白质及灰质,在一定程度上反映了白质的完整程度.断端坏死灶内油红O染色随脊髓损伤时间的延长逐渐明显反映了脂质在脊髓损伤过程中起着重要作用.
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秀丽隐杆线虫体内脂滴的油红O染色观察
目的 通过油红O染色对秀丽隐线虫(Caenorhabditis elegans)肠道脂类物质沉积的形态学变化进行观察.方法 在NGM培养基中加入油红O染液,对正常生理状态中的秀丽隐杆线虫体内的脂滴进行染色.结果 72 h后发现线虫的肠道普遍被染成红色.结论 油红O染液可以对活体线虫的脂滴进行染色,为后续研究线虫脂肪沉积的调控机制奠定基础.
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油红O及苏丹黑B对重度脂肪肝组织脂质染色效果的比较
目前,脂肪性肝病发病率呈逐年上升趋势,是诱发肝纤维化、硬化的常见原因,已引起医学界的广泛重视,其发病机制及防治策略的研究已成为热点[1].近年来,本课题组开展了中医药防治非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的研究工作.研究发现：NASH的病理分级相对较高,通常以大泡性或以大泡为主的混合性肝细胞脂肪变、肝细胞气球样变、小叶内混合性炎症细胞浸润等为主要病理特征.在脂质染色时发现,经典的肝组织冷冻切片、油红O染色效果欠佳.因此,我们针对重度脂肪肝的病理特征,对比观察了油红O及苏丹黑B脂质染色的效果,发现苏丹黑B的染色效果好于油红O,现介绍如下.
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昆明小鼠胰腺星状细胞分离培养与鉴定
目的 通过体外分离培养昆明小鼠胰腺星状细胞(PSC),建立更为经济合适的分离PSC方法.方法 采用酶消化联合碘海醇密度梯度离心分离小鼠PSC,经油红O染色和荧光倒置显微镜观察鉴定原代培养的PSC,传代并观察其活化状态.结果 昆明小鼠分离PSC数量可达1.84×105,存活率为93.0％.经自发荧光及油红O染色鉴定原代分离PSC脂滴,发现PSC纯度较高.形态观察经传代培养的PSC在前3代细胞状态良好,第4代PSC细胞形态呈现活化且α-平滑肌肌动蛋白染色呈阳性.结论 酶消化联合碘海醇密度梯度离心可以成功分离昆明小鼠PSC,前3代PSC的活力与纯度均能满足体外实验的要求,昆明小鼠可作为更为经济适用的PSC分离动物.
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大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞向脂肪细胞分化的研究
目的 观察大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞(MDSCs)在成脂诱导培养基作用下向脂肪细胞分化的潜能.方法 采用Preplate差速贴壁法结合密度梯度离心法分离、纯化大鼠阴茎海绵体MDSCs,获得差速贴壁细胞(PP1、PP6细胞);免疫荧光细胞化学法检测PP1、PP6细胞表达干细胞抗原-1(Sca-1)的情况,并传代培养.取PP6第3代细胞在成脂诱导分化培养基中培养21 d,同时对照组采用干细胞培养基培养;分别于诱导0、7、14、21 d通过油红O染色,观察是否有脂滴形成.结果 PP6细胞表达MDSCs标志物Sca-1,而PP1细胞几乎不表达Sca-1.诱导前3d可见细胞的形状由长梭形变为圆形或者三角形,排列紧密,呈叠瓦样,细胞核清晰,细胞分裂增殖速度明显减慢,油红O染色两组均未见细胞染红;7d左右在相差显微镜下可观察到胞质内有少量的高折光性小脂滴出现,大小均匀,主要集中在细胞核周围,油红O染成红色;14 d左右细胞内脂滴逐渐增多并融合成大脂滴,细胞核被挤到一边或者消失;诱导21d细胞分化达高峰,细胞体积达到大,胞质内脂滴数量多,继续诱导,细胞内未见空泡增多.而对照组细胞形态未发生变化,且油红O染色阴性.结论 大鼠阴茎海绵体MDSCs具有向脂肪细胞分化的潜能,从而进一步完善了阴茎海绵体MDSCs多向分化潜能的鉴定.
