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葛根总黄酮对刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤保护作用及其机制的初步研究
病毒性肝炎(viral hepatitis)是常见病、多发病,通过一系列的免疫应答可引起肝细胞损伤,其中以细胞免疫为主,特别是TNF-α大量释放,可导致肝脏急性出血性坏死[1].葛根是豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi.的干燥根,含多种黄酮类成分,具有解酒毒、降血脂等多种药理活性[2].本研究采用刀豆蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤模型,探讨葛根总黄酮(TPF)的保护作用,以期为葛根总黄酮在病毒性肝炎等免疫性肝损伤中的应用提供依据.
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葛根总黄酮对去势大鼠骨质疏松的保护作用
目的：研究葛根总黄酮对去势大鼠骨质疏松的保护作用。方法10周龄SPF级SD 雌性大鼠随机分为正常组、假手术组、去势模型组、替勃龙组(1.25 mg/kg)和葛根总黄酮(50、100、200 mg/kg)给药组。各给药组按上述剂量灌胃给药,每天1次,持续12周。12周后,双能X射线骨密度仪测定各组大鼠右股骨骨密度(BMD)和骨矿物含量(BMC),三点弯曲实验测左股骨生物力学的性能,左胫骨HE染色做组织形态学分析。 ELISA法测尿液的羟脯氨酸( HOP)、血清骨特异性碱性磷酸酶( BALP)、卵泡生成素( FSH)、黄体生成素(LH)和雌激素(E2)水平,RT-PCR法检测下丘脑促性腺激素释放激素( GnRH) mRNA的水平。结果葛根总黄酮(100、200 mg/kg)可显著增加去势大鼠右股骨BMD、左股骨生物力学性能,上调下丘脑GnRH mRNA表达,并可降低尿液HOP、血清BALP、FSH和LH的水平,减少骨吸收。结论葛根总黄酮对去势大鼠的骨质疏松有保护和预防性治疗的作用。
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葛根总黄酮和葛根素的纯化工艺研究
目的研究葛根总黄酮和葛根素的纯化工艺.方法以葛根总黄酮和葛根素为指标,对萃取法、盐析法、活性炭吸附法以及大孔树脂吸附法四种纯化方法进行综合评价,并对大孔树脂吸附法进行了工艺优化.结果四种纯化方法中,大孔树脂吸附法效果佳.非极性大孔树脂更加有利于葛根总黄酮及葛根素的纯化,且以HPD300佳.结论 HPD300树脂吸附纯化时,以上样液浓度1g·mL-1(相当于原生药),20%乙醇洗脱效果佳,其中葛根总黄酮可达90%以上,葛根素纯度可达50%以上,能满足大工业生产的要求.
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葛根总黄酮与丹参酮治疗首发急性脑梗死后情感障碍患者的疗效比较
目的：探讨葛根总黄酮与丹参酮用于首发急性脑梗死后情感障碍患者的疗效。方法将临床确诊的88例首发急性脑梗死后情感障碍患者采用随机、单盲法分成两个组，对照组44例给予丹参酮ⅡA，而观察组44例给予葛根素葡萄糖注射液，比较两组临床疗效及患者治疗后NHISS评分、Barthel指数及HAMA评分和HAMD评分差异。结果观察组有效率为88．64％，较对照组61．36％显著增加，组间差异具有显著性（P＜0．05）。观察组治疗后NIHSS 评分、Barthel 指数及 HAMA 评分和 HAMD 评分分别为（6．10±0．83）、（78．19±7．54）、（8．66±1．13）、（7．34±0．97），均较对照组明显改善，且组间差异具有显著性（P＜0．05）。结论葛根总黄酮用于首发急性脑梗死后情感障碍的治疗效果显著，可促进患者神经功能和生活能力的恢复，应用价值较高。
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葛根总黄酮对大鼠慢性肝损伤的保护作用
目的:探讨葛根总黄酮对四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝损伤的保护作用,同时进一步探讨葛根总黄酮抗肝损伤可能的作用机制.方法:用CCl4制备慢性肝损伤动物模型.测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA)含量,并观察肝组织形态学变化.结果:葛根总黄酮能显著降低CCl4所致大鼠血清AST、ALT和 HA含量的升高(P﹤0.01);减轻对肝细胞的病理性损害.结论:葛根总黄酮对CCl4所致的大鼠慢性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化和抗纤维化有关.
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葛根总黄酮对小鼠急性肝损伤保护作用的实验研究
目的:探讨葛根总黄酮对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用,同时进一步探讨葛根总黄酮抗肝损伤可能的作用机制.方法:用四氯化碳(CCl4)制备急性肝损伤动物模型.测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量,并观察肝组织形态学变化.结果:葛根总黄酮能显著降低CCl4所致小鼠血清AST、ALT含量的升高(P＜0.01),并能升高SOD的活性,降低MDA含量(P＜0.05);减轻对肝细胞的病理性损害.结论:葛根总黄酮对CCl4所致的小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与清除氧自由基和抗脂质过氧化有关.
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葛兰心宁软胶囊治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病不稳定型心绞痛临床观察
目的：观察葛兰心宁软胶囊治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病不稳定型心绞痛患者的临床疗效。方法：将87例冠状动脉粥样硬化性心脏病不稳定型心绞痛患者，在常规治疗的基础上加用葛兰心宁软胶囊，每次2粒（1.16 g），每日3次，4周后观察临床疗效。结果：87例患者中治愈47例，好转21例，未愈19例，有效率78.2%。结论：葛兰心宁软胶囊可明显缓解冠状动脉粥样硬化性心脏病不稳定心绞痛患者的临床症状，且不良反应小。
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水提-壳聚糖澄清-大孔树脂纯化法制备葛根总黄酮工艺研究
目的 优化葛根总黄酮提取工艺.方法 采用水提壳聚糖澄清法与传统水提醇沉法平行对比,正交实验考察解吸刺(乙醇)浓度、解吸温度、洗脱速度3个因素,以总黄酮提取量、葛根素提取量、得膏率为考察指标综合评价.结果 壳聚糖澄清工艺能有效保留葛根中葛根素及总黄酮等有效成分,节省乙醇用量,缩短生产周期.选取佳纯化条件:乙醇浓度为70%,洗脱温度35℃.洗脱速度为2BV/h.采用该工艺葛根总黄酮纯度达60%以上.结论 该法简单可取,适合于工业化大生产.
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葛根总黄酮纳米混悬液的制备及其降血糖作用研究
目的 制备葛根总黄酮(PF)纳米混悬液(NS-PF),并考察其降血糖作用.方法 采用高压均质法制备NS-PF,以激光粒径仪测定其粒径、多分散指数及Zeta电位,以高脂饲料喂养结合链脲佐菌素诱导的糖尿病模型昆明小鼠0.25g/kg灌胃给药评价其血糖调节作用.结果 制备的NS-PF的粒径、多分散指数及Zeta电位分别为(158.18±3.16) nm、(0.383±0.013)、-(29.76 +3.81) mV.PF、NS-PF及二甲双胍给药组对正常小鼠无明显急性降糖作用,对糖尿病小鼠体重也无影响,NS-PF组对糖尿病小鼠的随机血糖和空腹血糖均具有明显降低效果,并对其糖耐量有一定改善作用,整体降糖效果显著优于PF(P ＜0.01).结论 葛根总黄酮纳米混悬液能显著提高葛根总黄酮降低血糖作用.
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葛根总黄酮治疗去势大鼠鼻粘膜萎缩的研究
目的:探讨葛根总黄酮治疗去势大鼠鼻粘膜萎缩的效果.方法:将60只成年雌性大鼠随机等分为4组:第1组:为正常对照组;第2组:行去势处理;第3组:于去势后以维尼安治疗.第4组:于去势后以葛根总黄酮治疗.对各组动物鼻中隔粘膜进行光镜、电镜观察;抽血测定血清雌二醇水平.结果:去势后30 d鼻粘膜呈萎缩性改变;经维尼安、葛根总黄酮胃灌注治疗30 d后.鼻粘膜可恢复正常的形态结构.去势30 d后动物血清雌二醇水平与正常组比较明显下降,差异有显著性意义(P＜0.05);经维尼安治疗,血清雌二醇水平更趋于下降(P＜0.05);经葛根总黄酮治疗后,血清雌二醇水平可恢复正常(P＞0.05).结论:葛根总黄酮可恢复去势大鼠的雌激素水平.对由于雌激素水平下降所致的鼻粘膜萎缩有较好的治疗作用.
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AB-8大孔吸附树脂纯化葛根总黄酮
目的 研究AB-8大孔吸附树脂分离纯化葛根总黄酮的工艺条件.方法 以葛根素、葛根总黄酮为指标,对上样相对质量浓度、流速、上样量、水洗脱用量、乙醇洗脱浓度、乙醇用量及树脂再生前使用次数进行考察.结果 上样相对质量浓度:0.20 g·mL-1,流速:3 BV.h-1,上样量:2.5 BV,水洗脱用量:2.0 BV,乙醇洗脱浓度:70%,乙醇用量:2.5 BV,树脂再生前可使用3次.总黄酮和葛根素的纯度分别可达65%和27%.结论 AB-8大孔吸附树脂分离纯化葛根总黄酮的工艺条件可用于葛根中总黄酮的精制.
关键词： 葛根总黄酮 葛根素 AB-8大孔吸附树脂 纯化 -
正交试验法优选葛根与山楂叶中总黄酮的提取工艺
目的: 研究葛根与山楂叶中总黄酮的提取工艺,确立佳提取条件.方法: 采用正交试验法考察乙醇浓度、乙醇量、提取时间和次数对总黄酮提取的影响.结果: 佳工艺条件为采用6倍量80%乙醇回流提取2次,每次2 h.结论: 葛根与山楂叶佳提取工艺的确立为大生产提供了科学依据.
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正交试验优选-大孔树脂分离葛根总黄酮工艺
目的:建立野葛根总黄酮提取及分离工艺.方法:采用正交试验考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数4个因素及大孔吸附树脂分离技术对野葛根总黄酮得率的影响.结果:野葛根的适宜提取工艺为用8倍量60%乙醇,提取3次,每次1.5 h,洗脱液为70%乙醇.结论:该工艺葛根总黄酮得率约为8%,以葛根素计含量为60%以上,适宜工业化生产.
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葛根总黄酮及葛根素解酒的药理研究进展
目的:归纳葛根总黄酮及葛根素用于解酒的实验进展.方法:通过查阅国内外相关文献,介绍葛根在古代的解酒作用及其主要化学成分,概述葛根总黄酮和葛根素用于解酒的研究.结果:葛根总黄酮是葛根提取物中的主要有效成分,葛根素则是总黄酮中的一种活性单体成分,均具有防醉酒、治醉酒和对抗酒精性肝损伤等作用.结论:虽然对葛根总黄酮和葛根素解酒的研究取得了一定进展,但对其作用的分子生物学机制方面应做进一步的研究,使其机制更加明确.
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大孔吸附树脂对葛根总黄酮的吸附研究
目的:研究不同大孔树脂对葛根黄酮的吸附及解吸性能,为分离纯化葛根总黄酮提供选择树脂的依据.方法:以葛根总黄酮和葛根素为指标,考察不同大孔树脂对葛根总黄酮的比吸附量和解吸率. 结果:对葛根总黄酮的比吸附量超过100mg/g的树脂有S-8、 AB-8、 HPD100和HP-20,而解吸率超过95%的有AB-8、D101和HP-20. 结论:不同树脂对葛根总黄酮的吸附及解吸有很大差异,综合比吸附量及解吸率结果,AB-8和HP-20为分离纯化葛根总黄酮的佳吸附剂.
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葛根总黄酮对醉酒小鼠自主活动及血清中乙醇浓度的影响
目的:研究葛根总黄酮对急性酒精中毒小鼠自主行为活动的影响.方法:小鼠分别以浓度为500 mg/kg、250 mg/kg、125 mg/kg的葛根总黄酮灌胃,灌胃体积均为0.2 mL/10 g.灌胃给药后30 min,按0.14 mL/10 g体质量给予56％红星二锅头,造成醉酒模型.测定小鼠攀附时间、睡眠潜伏时间、睡眠时间,酒后不同时间段的自主活动次数,并测定小鼠血清中乙醇浓度.结果:葛根总黄酮能明显延长小鼠攀附时间、延长小鼠睡眠潜伏时间,缩短醉酒小鼠的睡眠时间,减少醉酒后小鼠的活动次数,降低醉酒小鼠血清中乙醇浓度.结论:葛根总黄酮能有效预防醉酒,降低醉酒后小鼠的兴奋性,使躁烦症状减轻.
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葛根总黄酮对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响
目的探讨葛根总黄酮对载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉窦动脉粥样硬化斑块形成的影响.方法将载脂蛋白E基因缺陷小鼠随机分为模型组、葛根总黄酮低剂量组、葛根总黄酮高剂量组及阿托伐他汀阳性药物组.常规生物化学法测定血清总胆固醇、甘油三酯及高密度脂蛋白胆固醇水平;采用主动脉根部连续石蜡切片、苏木素伊红染色观察组织形态学改变,测定载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉窦动脉粥样硬化斑块大小、动脉粥样硬化斑块与管腔面积比.结果 4组小鼠共检出斑块65个,4组虽都有典型的粥样斑块或/及纤维斑块等中晚期动脉粥样硬化病变形成,但组织学观察发现模型组部分斑块体积较大,汇合成片,管壁弥漫性增厚,管腔较狭窄,而葛根总黄酮治疗组及阿托伐他汀阳性药物组动脉粥样硬化斑块病变较局限,管腔狭窄程度较轻,并且葛根总黄酮高、低剂量组及阿托伐他汀阳性药物组斑块面积与管腔面积之比值显著低于模型组(分别为0.11%±0.04%、0.27%±0.04%和0.76%±0.33%,P<0.01),葛根总黄酮高剂量组斑块面积与管腔面积比值显著低于葛根总黄酮低剂量组(P<0.01).结论葛根总黄酮一定程度抑制载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块进展,该作用可能与降低小鼠血脂作用无明显关系.
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葛根总黄酮对去卵巢大鼠骨密度及骨钙影响的实验研究
目的:观察葛根总黄酮防治骨质疏松的作用及机理.方法:选取雌性SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只.除假手术组外其他5组建立去卵巢大鼠的骨质疏松模型,低剂量组予葛根总黄酮水溶液,50mg·kg-1;中剂量组予葛根总黄酮水溶液,100mg·kg-1;高剂量组予葛根总黄酮水溶液,200mg·kg-1;雌激素组予力维爱1.25mg·kg-1;假手术组及模型对照组予蒸馏水灌胃.3月后测定各组大鼠骨重量、骨密度及骨钙含量.结果:葛根总黄酮低、中、高剂量组及假手术组、雌激素组大鼠的右股骨重、左股骨骨密度及右股骨骨钙含量与模型对照组比较,差异均有显著性或非常显著性意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:葛根总黄酮可有效地防治雌性大鼠的骨质疏松,其机理可能与其具有雌激素效应有关.
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葛根总黄酮体外诱导人早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的实验研究
目的 探讨葛根主要成分葛根总黄酮对急性早幼粒细胞向血病(APL)细胞株NB4增殖及凋亡的影响.方法 采用MTT比色法检测葛根总黄酮对NB4细胞增殖抑制率:光学显微镜及荧光显微镜观察细胞形态改变:AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡率;DNA PI染色法分析细胞周期及亚二倍体峰.结果 12.5～200μg/ml葛根总黄酮均能抑制NB4细胞的增殖.光镜及荧光显微镜下可见核固缩、凋亡小体等典型的细胞凋亡改变;AnnexinV~+/PI~-细胞呈时间-剂量依赖性增加;DNA PI染色法发现细胞亚二倍体比例增加,G_1期比例下降、S期比例增高.结论 葛根总黄酮能有效抑制NB4细胞增殖、阻滞细胞周期进程、诱导细胞凋亡.
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葛根总黄酮分散片的处方工艺研究及溶出度测定
目的 研究葛根总黄酮分散片的处方工艺,并进行溶出度测定.方法 采用单因素考察及正交试验,以分散均匀性为指标筛选出葛根总黄酮分散片的佳处方与工艺.结果 根据优化处方工艺制备的葛根总黄酮分散片的崩解时间为50 s,分散均匀性好;分散片体外释药参数T50和Td明显比市售愈风宁心片的溶出参数小(P＜0.01).结论 所制备的葛根总黄酮分散片具有崩解快,分散均匀,有效成分溶出速率快的特性.
