首页 > 文献资料
-
冬凌草细胞悬浮培养技术研究
目的:建立冬凌草细胞悬浮培养体系.方法:采用冬凌草愈伤组织为原材料,以MS培养基为基础培养基,分别对激素种类及浓度、愈伤组织接种量、继代培养起始密度以及佳继代时间进行考察,绘制悬浮细胞生长曲线.结果:冬凌草细胞悬浮培养佳培养基配方为MS、0.5mg·L-NAA、0.5 mg·L-12,4-D、0.5 mg· L-16-BA,愈伤组织接种量为60g· L-1,继代培养起始密度为液体培养基量的四分之一,佳继代时间为8天.结论:冬凌草细胞悬浮体系的建立,原材料愈伤组织至关重要,只有获得较为疏松长势良好的颗粒状愈伤组织才能用以建立细胞悬浮培养体系,因此在对愈伤组织的继代培养过程中,如何降低愈伤组织褐化率,促进愈伤组织生长有待于进一步探索.
-
中国粗榧愈伤组织的诱导
目的:应用现代生物技术研究中国粗榧的组织培养技术.方法:观察不同消毒时间(5 min,10 min,15min),不同激素(6-苄基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、6-呋喃氨基嘌呤(KT)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D))组合及不同激素浓度的MS培养基对中国粗榧不同的外植体材料(茎尖、当年生幼茎、当年生幼叶)愈伤组织诱导的影响.结果与结论:选用茎尖、幼茎为外植体,消毒时间为10 min,培养基以MS+6-BA+NAA+2,4-D(6-BA、NAA质量浓度均为20 mg/L,2,4-D为1.0 mg/L)可较好地诱导中国粗榧愈伤组织的形成.
-
怀地黄再生体系的初步研究
目的:建立怀地黄再生体系.方法:以叶片、叶柄为外植体,研究不同浓度生长调节剂对愈伤组织诱导及植株再生的影响.结果:叶片在Murashige and Skoog(MS) +6-苄氨基嘌呤(6-BA)1.0 mg·L 1+1-萘乙酸(NAA)1.0 mg·L-1+2,4-二-氯苯氧乙酸(2,4-D)0.2 mg· L-1的培养基中愈伤组织诱导率高;叶柄在MS+ 6-BA2.0mg·L-1和NAA 0.25 mg ·L-1的培养基中愈伤组织诱导率高,叶柄愈伤的芽分化能力在MS+ 6-BA3.0mg· L-1培养基中较好;生根以未添加生长调节剂的MS培养基佳.结论:本方法初步建立了怀地黄再生体系,简单、稳定、易于操作,可为怀地黄品种选育、抗逆、高产等研究奠定基础.
-
番红花(Crocus sativus L.)组织培养的初步研究
目的:初步探讨番红花组织培养的一些影响因素.方法:采用组织培养技术,以番红花幼嫩的叶片为外植体对其愈伤组织及不定胚的诱导进行了研究:结果:MS+BA 0.1 mg/L+2,4-D 2 mg/L为诱导愈伤组织形成的佳培养基,而诱导不定胚的佳培养基为MS+BA 1.5 mg/L+2,4-D 2 mg/L.结论:基本明确了番红花愈伤组织及不定胚诱导的佳激素组合.
-
怀牛膝组织培养及齐墩果酸定量分析的研究
目的:以怀牛膝的子叶为外植体,以愈伤指数与齐墩果酸含量优选佳MS培养基.方法:在附加不同浓度和比例的2,4-D和6-BA的MS培养基上,探讨植物生长调节物质对怀牛膝愈伤组织诱导、增殖的效应,通过薄层扫描测定齐墩果酸含量.结果:在MS+6-BA 0.5 mg/L+2.4-D 1.5 mg/L培养基上诱导率高,形成愈伤组织时间短,齐墩果酸含量高.
-
影响濒危药用植物滇重楼愈伤组织发生的因素
目的 研究影响重楼愈伤组织发生的关键因素.方法 以重楼的根状茎、侧根、茎、叶、种胚等为材料,在添加不同配比的激素组合的MS培养基中培养.结果 在上述5种材料中,只有种胚在胚乳看护培养的条件下才能诱导出愈伤组织;IAA诱导重楼愈伤组织的作用大,而6- BA对重楼愈伤组织分化的调节作用较好；MS+2 mg·L-1 IAA +0.02 mg·L-16 -BA是诱导愈伤组织的佳培养基,诱导率达到53.3％.结论 合适的外植体和激素组合是诱导重楼愈伤组织的关键因素.
-
沙生药用植物锁阳愈伤组织诱导研究
目的 为扩大和提高锁阳资源的利用效率.方法 以锁阳肉质茎的不同组织部位作为外植体,以MS为基本培养基,筛选诱导愈伤组织产生的佳外植体.结果 以MS为基本培养基附加2,4-D 2.0 mg/L、6-BA 1.0mg/L和NAA1.0 mg/L,在暗培养、20℃条件下锁阳肉质茎的维管组织部分是诱导愈伤组织的佳外植体,髓部较差,鳞片叶未诱导出愈伤组织.结论 初步筛选出了适宜锁阳愈伤组织诱导的外植体和培养条件.
-
铁皮石斛愈伤组织及试管苗挥发油的气相色谱-质谱比较分析
目的 对铁皮石斛愈伤组织及试管苗挥发油化学成分进行分析.方法 采用固相微萃取技术提取铁皮石斛愈伤组织及试管苗挥发油,通过气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分析鉴定,用归一化法测定相对百分含量.结果 从愈伤组织和试管苗中分别鉴定了24个和19个化学成分,占总峰面积的61.64%和66.12%,愈伤组织和试管苗共有成分为17个.结论 愈伤组织挥发油的主要成分是石竹烯(26.92%)、γ-榄香烯(8.25%)、1-乙烯基-1-甲基-2,4-二(1-甲基乙烯基)-[1s,(1.α,2.β,4.β)]-环己烷(6.55%)、α-石竹烯(3.26%)、(Z)-7,11-二甲基-3-甲基-1,6,10-十二碳三烯(3.09%)、反-2-辛烯醛(3.06%)等;试管苗挥发油的主要成分是反-2-辛烯醛(20.28%)、β-紫罗兰酮(11.82%)、反-2-己烯醛(8.27%)、(E)-壬烯醛(6.91%)、石竹烯(4.92%)等.
-
氮源和碳源对冬凌草愈伤组织生长及迷迭香酸的积累的影响
目的 研究碳源、氮源对冬凌草愈伤组织生长及其内迷迭香酸积累的影响.方法 改变培养基中蔗糖浓度和碳源种类,考察不同碳源及其浓度对愈伤组织生长和迷迭香酸积累的影响.在总氮源不变的情况下改变NO3-/NH4+的比例,考察不同NO3-/NH4+比例对愈伤组织生长和迷迭香酸积累的影响.结果 蔗糖是冬凌草愈伤组织培养中的佳的碳源,其浓度为3%时,有利于冬凌草愈伤组织的生长和迷迭香酸的积累;NO3-/NH4+比例为1∶1时,愈伤增值倍数高;NO3-/NH4+比例2∶1时,迷迭香酸的积累量大.结论 实验确定了冬凌草愈伤组织培养的佳碳源种类、浓度及氮源比例,表明不同碳源、氮源对冬凌草愈伤组织生长和次生代谢物合成有显著影响.
-
不同培养基成分对金铁锁愈伤组织生长及皂苷含量积累的影响
目的 研究不同培养基成分对金铁锁愈伤组织生长和皂苷积累规律的影响.方法 改变培养基中碳源、氮源、磷酸盐、钙盐的浓度,比色法测定愈伤组织中皂苷的含量.结果 金铁锁愈伤组织生长和皂苷积累的适培养基成分为蔗糖40 g·L-1,KNO3∶NH4NO3为(1.9:1.65)g·L-1,1 mmol·L-1KH2PO4,4.5 mmol·L-1CaCl2.结论 蔗糖作为碳源有利于金铁锁愈伤组织生物量的积累和金铁锁皂苷的生物合成.混合氮源有利于金铁锁愈伤组织生长和皂苷含量的积累.
-
五鹤续断快繁体系的建立和优化
目的 研究五鹤续断快繁体系关键技术的建立和优化.方法以五鹤续断(Wu-He Dipsacus asper)初春萌发的幼嫩茎、茎尖和叶作为外植体,对五鹤续断愈伤组织的诱导及根和芽分化的培养基进行优化筛选.结果诱导愈伤组织的适培养基为MS+6-BA1.5 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1),在光照下培养长势好;诱导丛生芽的优培养基为MS+6-BA2.0 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1);诱导生根的佳培养基为1/2MS+NAA1.0 mg·L~(-1)+ PP3 330.4 mg·L~(-1).结论 建立了一套五鹤续断快速繁殖技术体系.
-
草酸促进人参愈伤组织细胞生长和人参多糖与皂苷积累的研究
目的 研究草酸在光照和不同温度条件下对人参愈伤组织细胞生长及次生代谢物质积累的影响.方法 利用人参悬浮细胞培养体系,通过改变培养条件和在培养基中添加草酸,通过一定时间的培养后检测细胞增长和次生代谢成分的积累.结果 光照和培养温度对草酸的诱导效果有很大影响,其中在12 h/d的光照下, 0.01～1 mmol·L-1的草酸对细胞生长和皂苷积累都有促进作用,而10 mmol·L-1的草酸对多糖积累有促进作用;在4个温度(22,24,26和28℃)水平下,随着培养温度的升高,添加草酸对细胞生长的抑制作用增强,但有利于多糖和皂苷的积累.结论 在使用草酸作为诱导子时,选择合适的培养温度和光照条件有利于培养细胞的生长和次生代谢物质积累.
-
体外培养刺五加生产刺五加苷B、E的研究
目的 探讨2,4-D和培养基对刺五加愈伤组织和体细胞胚胎生产刺五加苷B、E的影响,建立有利于刺五加苷B、E积累的刺五加体外培养体系.方法 将来自同一外植体的刺五加愈伤组织和体细胞胚胎分别诱导增殖或产生次级体胚,HPLC法测定培养物中刺五加苷B、E含量和培养物质量,考察培养物类型、培养基种类和激素对刺五加苷B、E生产的影响.结果 体细胞胚胎的质量虽略低于愈伤组织的质量,但体细胞胚胎生产刺五加苷B、E的能力优于愈伤组织.2,4-D对刺五加苷B、E含量影响较小,仅改变了培养物的质量.MS培养基处理中培养物的刺五加苷B、E产量优于1/2MS培养基.结论 刺五加体外培养物可以生产刺五加苷B、E,其产量取决于培养物类型、培养基种类和2,4-D浓度.
-
培养基成分对彭泽贝母愈伤组织增殖及生物碱含量的影响
目的 研究MS培养基中大量元素、微量元素对彭泽贝母愈伤组织生长及生物碱含量的影响,筛选有利于彭泽贝母愈伤组织生长和生物碱积累的培养基配方.方法 采用正交和单因素实验设计,以生长40 d的彭泽贝母愈伤组织的生长率和生物碱含量为指标,评价各因素对其影响的大小.结果 各因素对彭泽贝母愈伤组织生长影响大小依次为P>Ca>K>N,对生物碱积累影响大小依次为K>N>Ca>P;培养基中NO3-N含量较高时,有利于生物碱的积累;微量元素缺乏时均有利于彭泽贝母愈伤组织的生长,缺Cu、缺I时不利于生物碱的积累.结论 有利于彭泽贝母愈伤组织生长和生物碱积累的佳组合分别为:N3P1K3Ca2、 N1P2K3Ca1;培养基中大量元素、微量元素对彭泽贝母愈伤组织生长及生物碱含量存在一定影响.
-
高效液相色谱法测定杜仲愈伤组织和悬浮细胞中绿原酸
目的 建立高效液相色谱法测定杜仲愈伤组织和悬浮细胞中绿原酸含量.方法 利用Hypersil C18-ODS柱(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水-磷酸溶液(12:87.9:0.1)为流动相,检测波长为327 mm,流速1.0 ml/min,柱温为25℃.结果 绿原酸在2.216～55.4μg/ml范围内线性关系良好,r=0.998 1,愈伤组织和悬浮细胞中绿原酸的平均加样回收率分别为100.69%和97.62%,RSD分别为2.42%和2.71%.结论 该方法快速简便,准确可靠.杜仲愈伤组织和悬浮细胞中绿原酸含量分别为1.528 mg/g和3.949 mg/g.
-
四川椭圆叶花锚愈伤组织的诱导
目的 探讨不同培养条件及不同的外殖体对椭圆叶花锚愈伤组织诱导的影响.方法 以椭圆叶花锚种子培养的无菌苗的茎和新鲜植株的茎段为外殖体,MS为基本培养基,分别以6-BA和NAA两种植物激素为变量进行实验研究.结果 MS培养基+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA对诱导椭圆叶花锚愈伤组织的形成效果佳;高浓度的6-BA配合较高浓度的NAA诱导的愈伤组织致密,出愈率高.结论 不同培养条件对椭圆叶花锚愈伤组织的诱导有不同的影响,其中以无菌苗的茎段为外殖体易形成愈伤组织.
-
正交法优化植物生长调节剂在黄芪愈伤组织生长中的应用
目的 研究膜荚黄芪叶愈伤组织诱导、生长及黄芪多糖合成的佳生长调节剂组合.方法 以膜荚黄芪叶为外植体,运用正交设计研究 6-BA、2,4-D 和 NAA 等3种植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导、培养及黄芪多糖合成的影响.结果 分别以诱导率、相对生长速率和黄芪多糖含量为指标,结果表明 NAA 和 6-BA 对愈伤组织诱导率影响显著,6-BA、2,4-D 和 NAA 都对愈伤组织的生长影响显著,2,4-D 和 NAA 对黄芪多糖合成影响显著.结论 诱导愈伤组织的佳培养基为:MS+2,4-D(0.5 mg·L-1)+6-BA(1.0 mg·L-1)+NAA(2.0 mg·L-1);愈伤组织生长的佳培养基为:MS+2,4-D(0.5 mg·L-1)+6-BA(2.0 mg·L-1)+NAA(2.0 mg·L-1);促进黄芪多糖合成的佳培养基为:MS+2,4-D(1.0 mg·L-1)+6-BA(1.0 mg·L-1)+NAA(1.0 mg·L-1).
-
影响黄芪愈伤组织生长和黄芪黄酮合成的因素
目的 研究培养基成分和光照对黄芪愈伤组织生长和黄酮类化合物形成的影响.方法 使用不同培养基并改变其中碳源、氮源、磷酸盐、钙盐的浓度,在黑暗和光照条件下进行黄芪愈伤组织培养,分光光度法检测愈伤组织中黄酮类化合物的含量.结果 黄芪黄酮积累的佳条件是(24±1)℃暗培养,培养基为MS基本培养基(附加0.5mg·L-12,4-D和1.0mg·L-16-BA),其中含有80g·L-1蔗糖,NH+:NO3-为1:2(氮源总浓度为60mmol·L-1),1.5mmol·L-1KH2PO4,1.496 mmol·L-1CaCl2.结论 蔗糖作为碳源有利于黄芪愈伤组织生长和黄芪黄酮的生物合成.混合氮源有利于黄芪黄酮类化合物的合成.
-
何首乌茎愈伤组织的诱导和大黄素、大黄酸含量的检测
目的 研究何首乌茎愈伤组织的诱导和大黄素、大黄酸的检测.方法 以何首乌茎为外植体,在26℃和暗培养条件下,在含有1 mg·L-12,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和0.4 mg·L-萘乙酸(NAA)的MS诱导培养基中进行诱导,15d后把诱导出的愈伤组织转接到相同培养基中培养15 d,共转接3次,通过HPLC测定大黄素和大黄酸的含量.结果 茎愈伤组织的大黄素和大黄酸含量分别为0.036 mg·g1和().019 mg·g-1.结论 何首乌愈伤组织诱导培养基为含有1mg·[-12,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和0.4 mg·L-1萘乙酸(NAA)的MS培养基,茎愈伤组织中存在大黄素和大黄酸.
-
八角莲愈伤组织诱导及分化研究
目的 探讨了八角莲的愈伤组织诱导及分化技术.方法 采用八角莲成熟种子为材料,经过种子消毒诱导出芽,成功培育出无菌幼苗,再用幼叶、叶柄进行试管繁殖.结果 种子外植体以70%酒精消毒45 s+3%次氯酸钠消毒5 min组合进行灭菌效果佳,污染率为0.00%,出芽率为1.9%;种子在MS+6-BA 2.0 mg/L + GA3 0.5 mg/L激素配比上容易萌芽,出芽率为15.6%;在取材部位筛选中,以幼叶为外植体对诱导出芽效果佳,佳诱导愈伤组织激素组合为MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.3 mg/L,愈伤组织诱导率为85.7%;结论筛选适合的外植体和激素组合,对八角莲愈伤组织诱导和丛生芽分化具有良好的促进作用.
