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虎杖苷通过降血脂抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用
目的 研究虎杖苷在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化治疗中的作用及其可能的机制.方法 采用高脂饲料连续喂养12周ApoE-/-小鼠,建立动脉粥样硬化动物模型,将已经形成动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠分为模型组,虎杖苷组,阳性药(辛伐他汀)组,每组8只,阳性药(辛伐他汀)以0.05 g· kg-1·d-1灌胃,虎杖苷0.2g· kg-1·d-1灌胃,正常对照及模型组分别给予同体积的蒸馏水,连续灌胃28 d后,取血和冠状动脉,采用HE染色对冠状动脉的形态学改变进行观察;检测血清中高密度脂蛋白,氧化型的低密度脂蛋白,总胆固醇的含量.结果 病理切片HE染色显示,虎杖苷组小鼠的血管组织形态较模型组有较明显的改善,和阳性药组结果类似,显示出虎杖苷对动脉粥样硬化具有较好的的治疗效果;模型组血液中氧化型低密度脂蛋白的含量约为正常对照的5.3倍,虎杖苷组血液中的氧化型低密度脂蛋白的含量约为正常对照的3倍,是模型组含量的56.6％,与模型组比较,虎杖苷可以显著的降低血清中氧化型低密度脂蛋白的水平(q =7.884,P＜0.05).结论 虎杖苷可降低血脂,减少脂质的沉积,改善动脉粥样硬化血管组织的形态,具备治疗动脉粥样硬化的潜力.
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高效液相色谱法测定护肝宁片中虎杖苷的含量
目的 建立HPLC法测定护肝宁片中虎杖苷的含量.方法 色谱柱C18(4.6 ×260 mm):乙腈-水(23∶77)为流动相;检测波长为306nm;流速:1.0mL·min-1;柱温:室温.理论板数按虎杖苷峰计算,应大于3000.结果在浓度为168.8ng～1266.6ng的范围内与峰面积呈良好的线性关系.回归方程A=5219.1538C-6194.1636,r=0.9993(n=5),平均回收率为97.8%(n=9).结论 本法简便快速,定量准确,重现性好,可用于本制剂的质量控制.
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高效液相色谱法测定复方虎杖紫草油中虎杖苷和白藜芦醇的含量
目的 建立同时测定复方虎杖紫草油中虎杖苷和白藜芦醇含量的方法.方法 采用Zorbax Eclipse XDB-C18( 150×4.6,5μm)；流动相:乙腈-0.1％冰醋酸溶液,检测波长:307nm.结果 虎杖苷和白藜芦醇分别在0.026～ 0.520mg· mL-1(r=0.9998)和0.017～0330mg·mL-1(r=0.9998)浓度范围内有良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.1％,98.3％；RSD％均小于2.0％.结论 此方法操作简便、专属性强、灵敏度高、重现性好,可用于该制剂的质量控制.
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舒筋风湿酒质量标准的含量检测指标研究
目的 建立HPLC测定舒筋风湿酒中虎杖苷和大黄素两种有效成份含量的方法.方法 虎杖苷和大黄素含量检测采用Agilent HPLC,Agilent C18柱(250mm ×4.6mm,5μm),分别以乙腈-水(23∶77)和甲醇-0.1％磷酸溶液(82∶18)为流动相,流速1mL·min-1,检测波长分别为306nm和254nm.结果 虎杖苷和大黄素的线性范围分别为6.29～201.40μg·mL-1(R2 =0.99994)和10.41～330.00μg·mL-1 (R2=0.99997),平均回收率分别为99％和98％.结论 虎杖苷和大黄素的含量检测方法简单,结果准确、可靠,可以作为该酒剂质量控制指标.
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肝康灵颗粒的质量标准研究
目的:提高肝康灵颗粒的质量标准.方法:采用薄层色谱法(TCL)对制剂中绵茵陈、虎杖进行薄层鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)测定肝康灵颗粒中虎杖苷的含量.色谱柱:月旭C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流速:1.0 mL/min;流动相:乙腈∶水(18∶ 82);检测波长:306 nm;柱温:25℃,进样量:10.0 μL.结果:绵茵陈及虎杖的TLC图主斑点清晰,分离度好,阴性样品无干扰.虎杖苷在0.022～0.352 μg(r =0.9999)呈良好的线性关系;加样回收率为99.71％(RSD =2.15％).结论:本法能全面有效地控制肝康灵颗粒质量,为临床合理用药提供参考.
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UHPLC法同时测定肝康灵颗粒中5个苷类成分
目的:建立超高压液相色谱(UHPLC)法同时测定肝康灵颗粒(赤芍、栀子、虎杖、田基黄等)中栀子苷、白芍苷、芍药苷、虎杖苷、异槲皮苷的含量.方法:色谱柱:Shim-pack XR-ODSII C18(2.0 mm×75 mm,1.7 μm);流动相:乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(B)梯度洗脱;检测波长:230 nm;流速:0.3 mL/min,进样体积:1.0μL,柱温25℃.结果:栀子苷、白芍苷、芍药苷、虎杖苷、异槲皮苷分别在0.7 ～ 35 μg/mL(r=0.9999)、0.5～ 25 μg/mL(r=0.9999)、7～ 350 μg/mL(r=0.9998)、5.5～275 μg/mL(r =0.9999)、3～150 μg/mL(r =0.9999)范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.14％、99.02％、98.81％、98.35％、100.04％,RSD分别为0.54％、1.99％、0.66％、0.84％、0.98％.结论:该方法简便、快速、准确可靠,可为肝康灵颗粒的质量控制提供依据.
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虎杖苷单体对急性病毒性心肌炎的影响
目的 探讨虎杖苷(PD)对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染小鼠心肌微血管密度(MVD)的影响及对心肌的保护作用.方法 120只Balb/c雄性小鼠随机分为4组:正常对照组、CVB3感染组、CVB3感染加PD治疗组和PD对照组,分别在实验的第3、7、10、14、21、30天处死动物,留取血清和心肌标本,PFU法测定心肌组织内感染性病毒颗粒,免疫组化检测心肌CD34表达,显微镜下计数心肌组织MVD.结果 与正常对照组比较,感染组小鼠MVD计数增加(P<0.05);与感染组比较,PD治疗组小鼠心肌组织内病毒滴度明显低于感染组(P<0.05);MVD计数显著增高,死亡率显著降低(P<0.05).结论 PD可以明显减轻病毒性心肌炎时心肌病理损害,其保护作用可能与抗CVB3病毒和使心肌MVD增高有关.
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HPLC法测定华海乙肝泡腾颗粒剂中虎杖苷的含量
华海乙肝泡腾颗粒剂由黄芪、柴胡、虎杖、五味子等组成.为控制华海乙肝泡腾颗粒剂的质量,笔者等采用高效液相色谱法测定华海乙肝泡腾颗粒剂中虎杖苷的含量.
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虎杖苷对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响
目的 探讨虎杖苷对人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增殖的影响,为治疗和预防翼状胬肉复发找寻新依据.方法 取人翼状胬肉成纤维细胞体外培养;将不同浓度的虎杖苷作用于成纤维细胞分别达24 h,48 h和72 h后,MTT法检测虎杖苷对HPF增殖的影响,增生细胞核抗原(PCNA)经免疫组织化学染色后检测细胞生长活性,流式细胞技术检查细胞周期及细胞凋亡.结果 MTT法显示10-2 mol/L虎杖苷能抑制HPF的增殖(P<0.05),呈时间依赖性,抑制率分别为71.79％、74.60％、75.26％;抑制细胞表达PCNA(P<0.05).低浓度即10-3,10-4 mol/L虎杖苷对HPF抗增殖作用不明显.结论 10-2 mol/L虎杖苷能够显著抑制HPF的增殖,提示虎杖苷可用于翼状胬肉外科治疗中.
关键词： 虎杖苷 人翼状胬肉成纤维细胞 细胞增殖 -
虎杖苷对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠溃疡性结肠炎的作用及其对Hedgehog通路影响
目的 探讨虎杖苷对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用及其对结肠组织中Hedgehog信号通路的影响.方法 实验设置空白组、模型组、药物干预组(虎杖苷15 mg/kg、30 mg/kg、45 mg/kg)5组,每组6只;小鼠自由饮用质量浓度为30 g/L的DSS共7 d组建UC模型,空白组正常饮水的同时予质量浓度为9 g/L的生理盐水,腹腔注射7 d;模型组造模同时予质量浓度为9 g/L的生理盐水,腹腔注射7 d;药物干预组造模同时分别予虎杖苷15 mg/kg、30 mg/kg、45 mg/kg,腹腔注射7 d.观察小鼠结肠炎相关的疾病活动指数(disease activity index,DAI)和结肠组织病理评分,RT-PCR检测小鼠结肠组织中的炎症因子IL-6、IL-17、TNF-α、IL-1β、IL-23,同时检测小鼠结肠组织中Hedgehog信号通路的转录因子Gli1 mRNA和蛋白质的表达水平.结果 与模型组相比,空白组和药物干预组中DAI降低(P<0. 05);虎杖苷药物干预后结肠病理损伤明显改善;与模型组相比,药物干预组(中、高剂量)中的炎症因子IL-6、IL-17、TNF-α、IL-1β、IL-23 mRNA水平明显降低(P<0. 05),同时药物干预组中Gli1的蛋白水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0. 05).结论 虎杖苷对DSS诱导的小鼠急性结肠炎模型具有明显的抗炎作用,其抗炎机制可能与上调Hedgehog信号通路有关.
关键词： 虎杖苷 溃疡性结肠炎 葡聚糖硫酸钠 Hedgehog信号通路 -
虎杖苷对K562细胞增殖及凋亡的影响
目的:观察虎杖苷对白血病细胞株K562细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法:以不同浓度(0、5、10、20、40、80、160、320μmol/L)虎杖苷处理K562细胞12、24、48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率.另取对数生长期的K562细胞,分为3组,观察组加入80 μmol/L的虎杖苷,阴性对照组加入DMSO,空白对照组不处理,培养24 h后,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测p-Akt、p-mTOR、p70S6K、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平.结果:虎杖苷能有效抑制K562细胞增殖,呈时间和剂量依赖性(P＜0.001).80 μmol/L虎杖苷作用24 h后,K562细胞凋亡率增加(P＜0.001);细胞周期出现G0/G1期至S期的阻滞(P＜0.001);p-Akt、p-mTOR、p70S6K、Bcl-2蛋白表达永平下降(P＜0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达水平升高(P＜0.05).结论:虎杖苷可有效抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,可能是通过抑制Akt/mTOR/p70S6K信号通路及调控相关凋亡蛋白的表达来实现的.
关键词： 虎杖苷 K562细胞 AKT/mTOR/P70S6K 凋亡 -
蒿鳖养阴软坚方中虎杖苷的含量测定
目的 建立高效液相色谱(HPLC)法测定蒿鳖养阴软坚方中虎杖苷含量的方法.方法采用高效液相色谱法对制剂中的虎杖苷进行了定量分析,色谱柱Hypersil ODS2(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(21:79),检测波长:306 nm,流速1.0 ml·min~(-1).结果 虎杖苷得到完全分离,在1.688～16.88 μg·ml~(-1)范围内线性关系良好,r＝0.999 9,平均加样回收率为101.0%,RSD为2.5%(n＝6).结论 此方法可将虎杖苷从复方中充分的提取分离,专属性强,精密度和稳定性良好,结果准确,可用于蒿鳖养阴软坚方的质量控制.
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紫外分光光度法测定泰痹颗粒Ⅱ号中虎杖苷的含量
目的 建立泰痹颗粒Ⅱ号中虎杖苷含量的测定方法.方法 采用紫外分光光度法,测定波长为306nm.结果 检测浓度在2.4 ～ 19.2μg/ml范围内与吸光度线性关系良好(r=0.9997).结论 该方法简便、快速、准确,可作为该颗粒制备过程中的实时检测.
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虎杖苷扩血管作用及机制初探
目的 观察虎杖苷(Polydatin,PD)对血管的舒张作用,初步探讨其机制.方法 以累计浓度法观察PD对苯肾上腺素预收缩血管的舒张效应,并观察不同信号通路阻断剂对PD效应的影响.结果 PD呈浓度依赖地舒张内皮完整的血管,去除内皮后该效应几乎被取消;PPARβ阻断剂GSK0660、NF-κB阻断剂PDTC及NOS抑制剂L-NAME均明显抑制PD舒张血管效应(P＜0.05);但COX-2抑制剂关洛昔康对PD的作用无明显影响(P＞0.05).结论 PD具有直接舒张血管作用,该作用依赖于内皮功能的完整性,其机制可能与PPARβ、NF-κB信号通路及NO释放有关,而与前列环素的作用无关.
关键词： 虎杖苷 过氧化物酶增殖物激活受体β 核因子-κB 一氧化氮 -
虎杖苷对非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗和血清肿瘤坏死因子影响的实验研究
目的 探讨虎杖苷对非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗(IR)以及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 健康雄性SD大鼠44只,随机分为正常组(A)和模型组(M),模型组给予高脂饲料喂养8周,造模成功后将模型组随机分为5组:空白模型组(B)、虎杖苷高剂量组(C_1)、虎杖苷中剂量组(C_2)、虎杖苷低剂量组(C_3)、非诺贝特组(D),每组7只,高脂饲料持续8周后,A组、B组予以生理盐水灌胃,5 ml/次,C_1、C_2、C_3分别以160,80,40 mg·kg~(-1)·d~(-1)虎杖苷混悬液灌胃,D组以100 mg·kg~(-1)·d~(-1)非诺贝特混悬液灌胃.持续4周后处死动物,分离血清,检测、计算各组大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FNS)、胰岛素抵抗指数(IRI)、胰岛素敏感指数(ISI)、TNF-α水平.结果 虎杖苷高剂量组与模型组IRI、ISI、TNF-α水平存在显著差异(P<0.05,P<0.01),且在改善IR方面虎杖苷高剂量组优于西药对照组(P<0.01).结论 虎杖苷能改善NAFLD大鼠体内IR状态,降低TNF-α水平,是其治疗NAFLD的可能作用机制.
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不同土壤因子与虎杖主要成分的相关性分析
目的 测定不同区域虎杖生长的土壤因子中养分含量及对应虎杖药材中主要成分含量,并对之进行相关比较分析,为虎杖不同产地药材的质量评价及栽培中科学施肥提供依据.方法 采用文献方法测定土壤养分及药材中主要成分的含量,并对所测数据进行多重性比较与相关分析.结果 不同地域土壤养分含量、虎杖主要成分含量间有显著与极显著差异.结论 有机质、速效性N,P,K含量高的土壤,药材中主要成分的含量高.因此,在虎杖的生育进程中及时补充速效性N,P,K营养元素,保持土壤肥力的均衡供给是确保虎杖品质的基础条件.
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微生物转化虎杖苷粗提物生成白藜芦醇的研究
目的 利用一株根霉菌对虎杖苷粗提物进行液态发酵,使虎杖苷转化成白藜芦醇.方法 采用单因素实验确定氮源种类及添加量,通过正交实验法优化发酵条件.结果 在10%虎杖苷粗提物中添加1.5%的尿素作为氮源,采用薄层色谱法(TLC)确定在优化发酵条件下转化时间为26.8h,通过高效液相色谱法HPLC证明虎杖苷转化为白藜芦醇,转化率95.8%.结论 虎杖苷粗提物可以通过微生物发酵得到白藜芦醇.
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虎杖苷对实验性急性胃黏膜损伤的保护作用
目的 研究虎杖苷(polydatin,PD)对实验性急性胃黏膜损伤的保护作用及其与抗氧化的关系.方法 制备小鼠无水乙醇型、吲哚美辛(消炎痛)型、大鼠束缚-冷冻(restraint-cold stress,RCS)应激型胃黏膜损伤模型,测定胃黏膜损伤指数;测定大鼠血清 SOD活性和 MDA含量.结果 PD可剂量依赖性地抑制实验性急性胃黏膜损伤.PD可使大鼠束缚-冷冻应激型胃黏膜损伤过程中血清中升高的 MDA含量降低,可使降低的 SOD水平回升.结论 PD对实验性急性胃黏膜损伤具有保护作用,其作用机制与 PD抗氧化有关.
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虎杖苷对大鼠急性脑缺血再灌注损伤的保护作用
目的:观察虎杖苷注射液对大鼠急性全脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法:采用双侧颈总动脉结扎法制备大鼠急性全脑缺血再灌注损伤模型,观察虎杖苷注射液对大鼠脑含水量,超氧化物歧化酶、单胺氧化酶的活性和丙二醛、乳酸含量的影响.结果:与模型组相比,虎杖苷注射液(7.5 mg/kg,15 mg/kg和30 mg/kg)可显著改善脑水肿、减少过氧化脂质的形成,减少乳酸的聚积,并对单胺氧化酶有抑制作用,其作用强度与剂量有一定关系.结论:虎杖苷注射液对大鼠急性全脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用.
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虎杖苷/甲基-β-环糊精包合物的制备及抗氧化性质研究
目的 制备虎杖苷/甲基-β-环糊精(虎杖苷/Me-β-CD)的包合物,以达到提高药物的水溶性、稳定性及抗氧化性的目的.方法 采用冷冻干燥法制备包合物,利用相溶解法测定包合作用对虎杖苷溶解性的影响,并通过X射线粉末衍射谱图(XRD)、热重分析(TG)、差示扫描量热法(DSC)、扫描电子显微镜(SEM)等方法证实包合物的形成.此外,通过还原能力和DPPH自由基的清除实验测定了虎杖苷及其包合物的抗氧化能力.结果 虎杖苷和Me-β-CD形成了化学计量比为1:1的包合物,缔合常数为1106 M-1;包合作用提高了虎杖苷的水溶性和热稳定性.抗氧化性实验结果表明包合后的虎杖苷抗氧化性能力得到了显著提升.结论 虎杖苷包合物可以达到提高药物水溶性、稳定性及抗氧化性的目的,这为虎杖苷在药品、食品等领域的应用奠定了基础.
