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人类偏肺病毒感染研究进展
呼吸道感染多由病毒引起,儿童尤其如此,感染病原谱包括呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)、副流感病毒(parainfluenza virus,PIV)、流感病毒(influenza virus,FLU)和腺病毒(Adenovirus, ADV).尽管病毒检测技术已经有了明显进步,但对于多数患者,呼吸道感染的病毒病原不易确定.2001年,荷兰的研究人员发现了导致人类呼吸道感染的副粘病毒科偏肺病毒属的一个新成员—人类偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)[1],引起了临床的关注.本文对hMPV的病毒学、发病机制、流行病学、临床表现、诊断和治疗的新进展进行综述.
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国内外研究人偏肺病毒进展
人类偏肺病毒(hMPV)是由荷兰学者Van denHoogen等人[1]于2001年发现的一种新的人类呼吸道病原体.他们报道,28份原始hMPV分离物有半数来自1岁以内的幼儿,96%来自6岁以内儿童.血清学调查显示,所有被调查的荷兰6～12个月婴幼儿下呼吸道感染患者有25%的抗hMPV抗体阳性,到5岁时100%的病人有过去感染史.以后相继在美国、加拿大、欧洲、澳大利亚、巴西和中国等报道在人的急性呼吸道感染标本中发现这种病毒[2-7].hMPV似乎与禽肺病毒(APV)很接近,据推测人类病毒起源于鸟.Peret等人[2]对收集的1958年的人类标本进行分析发现hMPV在人群中至少存在了半个世纪,说明早在1958年以前就发生了人兽共患事件.为什么病毒很多年没有被确定?首先,许多病毒学研究实验室用常用细胞系分离病毒,hMPV似乎不能有效复制.第二,hMPV在体外复制动力很弱,所以有可能不易检测到.第三,hMPV似乎是胰岛素依赖性的,许多先前的病毒实验室分离呼吸道病毒不用胰岛素.
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泉州地区儿童社区获得性肺炎病毒病原学调查
目的：探讨泉州地区儿童社区获得性肺炎(CAP)的常见病毒病原学及人类偏肺病毒肺炎的感染现状。方法：2012年1月-2013年1月收治CAP患儿871例，收集深部鼻咽分泌物(NPS)标本，应用逆转录PCR的方法测定NPS中的人类偏肺病毒(HMPV)，同时用直接免疫荧光法(DFA)检测NPS中的呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒(IVA、IVB)、副流感病毒(PinfⅠ、Ⅱ、Ⅲ)、腺病毒(ADV)，对各种病毒在儿童社区获得性肺炎中的流行特点及临床特征进行分析。结果：871例 CAP 患儿 NPS 标本中，检测病毒阳性313例，总检出率35.9%，其中 RSV 189例(60.4%)、PinfⅢ53例(16.9%)、IVA 21例(6.7%)、HMPV 15例(4.8%)、IVB 13例(4.2%)、PinfⅠ11例(3.5%)、PinfⅡ6例(1.9%)、ADV 5例(1.9%)。＜1岁与＞l岁患儿RSV的检出率比较差异有统计学意义(χ2=473，P＜0.001)。RSV的检出阳性率从3月起逐渐下降，7-8月达到低，9月起检出率逐渐升高，至12月达到高。HMPV致CAP全年可见，2-4月检出率高，临床表现无特异性症状。本组患儿混合感染两种病毒12例，以RSV与PinfⅢ常见；189例RSV感染病例中合并喘息153例(81.2%)，15例HMPV感染病例中合并喘息5例(30%)。结论：病毒病原在泉州地区CAP占有重要地位，感染多见于＜1岁婴幼儿，以RSV、副流感为主，HMPV也是引起CAP的重要病原之一。
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上海地区儿童下呼吸道人类偏肺病毒感染的初步研究
目的了解人类偏肺病毒(hMPV)在上海地区儿童下呼吸道感染中的致病情况.方法采集2004年8月-2005年1月秋冬季节我院479例因社区获得性急性下呼吸道感染(CALRTIs)住院儿童的呼吸道分泌物标本,对直接免疫荧光法常规检测病毒阴性的259份标本用逆转录-多聚酶链反应法(RT-PCR)检测hMPV M基因.对PCR阳性产物随机挑选23份直接作核苷酸序列测定,用DNAS-tar软件对基因序列分析.结果259份标本中hMPV检测阳性例数为59例(22.8%),占总例数的12.3%.冬季检测阳性率明显高于秋季(31.3% vs 7.5%,P＜0.01).5岁及以下儿童53例(89.8%),5岁以上儿童6例(10.2%).23份hMPV阳性标本目标基因部分核苷酸序列与GenBank中公布的hMPV M基因同源性达82.8%～100%,部分氨基酸序列同源性为93.0%～100%,对核苷酸序列作基因进化树分析显示存在2种不同的基因型,以Bj1816组为代表的基因型14株,以Bj1887组为代表的基因型9株.结论hMPV是上海地区儿童CALRTIs的重要致病原,上海地区儿童感染的hMPV同时存在2种不同的基因型.
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粤东地区喘息性疾病患儿中人偏肺病毒的检出与病原学初步研究
目的 了解人类偏肺病毒(hMPV)在粤东地区的感染情况与小儿感染的临床特征.方法 采用逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)对粤东地区喘息性疾病儿童和健康体检儿童共323例的鼻咽抽吸物及咽拭子进行hMPV基因筛查,然后随机挑选6份RT-PCR扩增阳性产物进行纯化测序,将测序结果与Genbank中的多株hMPV N 蛋白基因序列进行比较和进化树分析.分析hMPV感染患儿的临床资料.结果 240份小儿喘息性疾病呼吸道标本中,检测到hMPV病毒阳性12例(阳性率5%),3、4月份为发病高峰.阳性均为年龄较小患儿.6份hMPV阳性标本目标基因部分核苷酸序列与 GenBank中公布的多株hMPV N基因同源性达80.8%～98.4%.核苷酸序列基因进化树分析显示存在2种不同的基因型.12例hMPV阳性患儿均表现咳嗽、低热、及喘息等临床症状;临床诊断为毛细支气管炎8例、喘息型肺炎4例.83份健康体检儿童的呼吸道标本中均未检测到hMPV特异性基因片段.结论 hMPV是粤东地区婴幼儿喘息性疾病的重要病毒性病原体之一.粤东地区流行的hMPV株存在2种不同的基因型.
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人类偏肺病毒感染患儿的免疫功能研究
目的 评价人类偏肺病毒感染后患儿细胞免疫功能指标的改变.方法 选择因呼吸道感染而就诊的患儿,同时采集咽喉部分泌物和肝素抗凝血,采用逆转录聚合酶链反应和流式细胞仪分别检测人类偏肺病毒RNA和细胞免疫指标,将人类偏肺病毒RNA阳性和阴性患者分成两组,分别就细胞免疫指标进行统计分析,观察其变化.结果 感染人类偏肺病毒后患儿外周血中CD_3~+、CD_4~+CD_(25)~+、CD_3~+、CD_8~+、CD_(19)~+、CD_(19)~+CD_(23)~+细胞数量有显著上升.而CD_4~+、CD_(16)~+CD_(56)~+细胞数量变化差异无统计学意义.结论 感染人类偏肺病毒后体液免疫和细胞免疫功能均上升.
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苏州地区急性呼吸道感染儿童中腺病毒感染特点
腺病毒(Adenovims,ADV)是儿童急性呼吸道感染重要病毒病原之一,其明确诊断依赖于实验室的病原学检测.我们运用直接免疫荧光法,对2001年1月-2007年12月苏州地区儿童急性呼吸道感染进行ADV病原学监测,了解近7年来苏州地区儿科急性呼吸道感染中ADV的感染状况.同时2006年起对部分确诊ADV患儿进行人类偏肺病毒(hMPV)混合感染的监测,探讨其病原学特点.
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北京地区六岁以下儿童急性呼吸道偏肺病毒感染
目的了解北京地区婴幼儿急性呼吸道感染与人类偏肺病毒(Human Metapneumovirus,HMPV)的关系.方法对2002年11月～2003年3月,收集的247份经过间接免疫荧光法和病毒分离排除了常见的呼吸道病毒感染的鼻咽洗液标本进行了HMPV基因的检测.用针对HMPV N基因序列设计的特异引物对这247份标本进行RT-PCR扩增,扩增片段经1.2%琼脂糖凝胶电泳检测.挑选10份阳性扩增产物直接进行核苷酸序列测定,并将所测序列在GeneBank中进行比较分析.结果247份标本中共检测到74份RT-PCR阳性扩增产物,阳性率为30.0%(74/247).74例中临床诊断为肺炎者36例,占48.6%;其次为毛细支气管炎21例,占28.4%;年龄2个月～5岁7个月不等,≤2岁者占83.8%.所挑选的10份N基因扩增产物与GeneBank中同源性高的均为HMPV(87%～99%).10份标本中9份标本的扩增产物之间的核苷酸和氨基酸同源性在95.8%～100%和98.6%～100%,1份标本的扩增产物与其他标本同源性较低,仅为87.3%～89.7%和95.8%～97.2%.结论(1)北京地区部分儿科患者的急性呼吸道感染与HMPV有关;(2)北京地区的HMPV中可能存在不同的基因型.
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人类偏肺病毒免疫机制及其疫苗的研究
人类偏肺病毒是新近发现的一种新型致病病毒,感染主要发生在冬春季节,感染后可导致急性上呼吸道感染及支气管炎、肺炎;它可以发生在所有年龄组,但以儿童和免疫力低下者为常见,国内外有许多相关儿童呼吸道感染的研究.目前对其结构及其临床特点研究较多,但对其致病机制、免疫机制研究较少,国外对其疫苗的研究也已有相关报道.该文将目前国内外相关免疫及其相关疫苗研究进展予以综述.
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人类偏肺病毒与呼吸道感染的研究
呼吸道感染仍是世界范围内导致人类发病和死亡的重要原因.是导致5岁以下儿童死亡的重要病因之一,因此呼吸道感染的防治对于医学界乃至整个科学界仍是一个巨大的挑战.目前仅有50%的呼吸道感染病原被明确,但仍有一些呼吸道感染,虽然认为由病毒引起,但病原一直不清楚.人类偏肺病毒(Human Metapneumovirus,hMPV)是近年来发现的一种与人类呼吸道感染之间存在病原学关系的新型副粘液病毒.
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粤东地区喘息性疾病患儿中人偏肺病毒的检出与病原学初步研究
目的 了解人类偏肺病毒(hMPV)在粤东地区的感染情况与小儿感染的临床特征.方法 采用逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)对粤东地区喘息性疾病儿童和健康体检儿童共323例的鼻咽抽吸物及咽拭子进行hMPV基因筛查,然后随机挑选6份RT-PCR扩增阳性产物进行纯化测序,将测序结果与Genbank中的多株hMPV N蛋白基因序列进行比较和进化树分析.分析hMPV感染患儿的临床资料.结果 240份小儿喘息性疾病呼吸道标本中,检测到hMPV病毒阳性12例(阳性率5%),3、4月份为发病高峰.阳性均为年龄较小患儿.6份hMPV阳性标本目标基因部分核苷酸序列与GenBank中公布的多株hMPV N基因同源性达80.8%～98.4%.核苷酸序列基因进化树分析显示存在2种不同的基因型.12例hMPV阳性患儿均表现咳嗽、低热、及喘息等临床症状;临床诊断为毛细支气管炎8例、喘息型肺炎4例.83份健康体检儿童的呼吸道标本中均未检测到hMPV特异性基因片段.结论 hMPV是粤东地区婴幼儿喘息性疾病的重要病毒性病原体之一.粤东地区流行的hMPV株存在2种不同的基因型.
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急性病毒性呼吸道感染的病原探讨
呼吸道感染是常见病、多发病.儿童易发.病毒性呼吸道感染是由多种病毒引起的急性呼吸道传染病,是5岁以下婴幼儿死亡的主要病因.呼吸道感染分为上呼吸道感染和下呼吸道感染.目前尚有3成到4成呼吸道感染的病因不明,很可能也是由病毒引发,只是人们还没有发现而已.将来还会陆续发现新的呼吸道病毒和新的呼吸道传染病.
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6岁以下儿童急性下呼吸道感染的病毒病原及临床研究
目的了解北京地区6岁以下儿童中急性下呼吸道感染(ALRI)患儿的病毒感染状况;探讨人类偏肺病毒(hMPV)感染在儿童ALRI中的作用及所致支气管肺炎的临床特征.方法 (1)采集2001年2月至2003年3月就诊于首都儿科研究所446例年龄1个月至5岁的ALRI住院患儿的鼻咽分泌物,同时应用间接免疫荧光(IFA)及病毒分离方法进行人类呼吸道合胞病毒(hRSV)、流感病毒(甲、乙型)、副流感病毒(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)及腺病毒等7种常见呼吸道病毒的病原检测.(2)采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对2002年11月至2003年3月住我院内科的ALRI患儿中经7种呼吸道常见病毒病原检测阴性的216份鼻咽洗液,进行了hMPV基因检测,并分析hMPV感染患儿的临床资料.结果 (1)446例患儿中7种常见呼吸道病毒总阳性例数为209例(46.86%),hRSV阳性者多为163例(36.55%).(2)在216份上述7种呼吸道病原检测阴性的标本中69份测到hMPV阳性扩增产物(31.9%),占同期送检标本的19.17%.结论 (1)hRSV是北京地区冬春季节婴幼儿ALRI的主要病原.(2)2002年11月至2003年3月我院ALRI住院患儿中有19.17%与hMPV感染有关.
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儿童呼吸道人类偏肺病毒呼吸道合胞病毒和流感病毒感染的临床特征比较
目的 了解人类偏肺病毒(hMPV)在苏州地区儿童呼吸道感粢中的感染情况;比较hMPV、呼吸道合胞病毒(RSV)和流感病毒(Inf)引起呼吸道感染的临床特征.方法 选取2005年11月至2006年10月苏州大学附属儿童医院呼吸科1932例急性呼吸道感染住院患儿.采用无茵负压吸引法采集新鲜痰液.直接免疫荧光法检测RSV,腺病毒,Inf A、B型,副流感病毒1、2、3型等7种常见呼吸道病毒;同时用逆转录.聚合酶链反应法(RTPCR)检测hMPV N基因,随机挑选部分阳性PCR扩增产物进行核苷酸测定并将所测序列进行比较分析.结果 1932例标本中hMPV阳性例数为128例(6.6%),其中hMPV合并其他呼吸道病毒感染5例(3.9%);hMPV检测阳性率在冬季呈现高峰;hMPV感染患儿的平均年龄为22.17月龄,较RSV和Inf感染患儿大;hMPV感染者临床特征与RSV和Inf感染相似,喘息在RSV和hMPV感染患儿中更为多见,发热则更多见于hMPV和Inf感染患儿.RSV感染后所致的首要疾病是毛细支气管炎,hMPV和Inf感染后所致的首要疾病是肺炎.单纯hMPV与hMPV合并其他呼吸道病毒感染临床表现差异无统计学意义(P＞0.05).结论 苏州地区部分儿童的呼吸道感染与hMPV有关;hMPV感染临床特征无特异性;hMPV在合并其他呼吸道病毒感染时并不加重病情.
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儿童急性感染人类偏肺病毒的诊断及临床分析
目的:总结人类偏肺病毒急性感染患儿的诊断经验和临床特点.方法:采用直接免疫荧光法对79例急性感染人类偏肺病毒的婴幼儿进行快速诊断,及时给予抗病毒治疗及对症治疗.结果:79例患儿,临床诊断为肺炎22例,支气管肺炎18例,毛细支气管炎17例,急性支气管炎11例,喘息性疾病如哮喘、喘息性支气管炎等11例,全部患儿痊愈,未出现并发症,病程5～21 d,平均住院天数8d.结论:采用直接免疫荧光技术检测人类偏肺病毒抗原,操作和实验方法简便,诊断快速准确,有利于早期病因治疗,缩短病程,具有重要的社会经济效益.
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儿童下呼吸道人类偏肺病毒感染的临床流行特征
目的 了解儿童人类偏肺病毒(hMPV)呼吸道感染的流行情况及临床特征.方法 收集2004年8月-2005年1月我院452例急性下呼吸道感染儿童的呼吸道分泌物标本,采用直接免疫荧光抗体法检测呼吸道合胞病毒、流感病毒甲型和乙型、副流感病毒1～3型和腺病毒,以上病毒检测阴性的245份标本再用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测hMPV M基因,随机挑选部分PCR扩增产物送核苷酸测序作基因分析.结果 245份标本中hMPV阳性例数为59例(24.1%),452例患儿中单一hMPV感染率13.1%.冬季月份中hMPV检出数高于其他呼吸道病毒.59例hMPV感染患儿,平均月龄27.7月,各年龄组hMPV检出率差异无显著性(P＞0.05).hMPV感染者临床特征与其他呼吸道病毒感染无明显差异(P＞0.05).23份hMPV M基因部分核苷酸片段与GenBank中hMPV M基因序列同源性为82.8%～100%,基因进化树分析提示存在2种不同的hMPV基因.不同hMPV基因型感染者的临床表现差异无显著性(P＞0.05).结论 hMPV是2004年冬季我院儿童下呼吸道感染流行的病毒病原,临床表现无特征性,2种不同基因型感染的临床特征也相似.
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1527例喘息住院患儿病毒病原学分析
目的 了解当前喘息儿童病毒感染病原学的状况.方法对2010至2011年因喘息住院治疗的1 527例儿童应用逆转录PCR方法检测人类偏肺病毒 (hMPV),实时PCR方法检测人类博卡病毒 (hBoV),同时采用直接免疫荧光法检测呼吸道分泌物中呼吸道合胞病毒 (RSV)、流感病毒 (IVA、IVB)、副流感病毒 (Pinf I~III) 和腺病毒 (ADV).结果 1 527 例患儿的标本中病毒检测阳性者705例,总检出率46.2%,其中<3岁患儿占90.1%;分别为RSV 344例 (22.5%)、Pinf III 156例(10.2%),hBoV 89例 (5.8%),hMPV 60例 (3.9%),ADV 18例 (1.4%),Pinf I 18例 (1.2%),IVB 11例 (0.7%),IVA 8例 (0.5%),Pinf II 1例 (0.1%).合并感染2种病毒者38例,常见为hMPV合并hBoV感染 (21.1%) 和RSV合并hBoV感染 (21.1%).相比hMPV、Pinf III、hBoV感染患儿,RSV感染患儿的平均年龄小,气促、呼吸困难、紫绀表现更多见,平均住院时间更长,差异均有统计学意义 (P<0.05).RSV感染于每年的 1至3月及10至12月间流行,hMPV的检出高峰在2至4月,Pinf III 的检出高峰在6至7月,hBoV 的检出高峰在6至8月.结论 RSV是诱发儿童喘息常见的病毒病原,hBoV和 hMPV位居第3、4位,RSV为冬春季节引起喘息的主要病原,Pinf III、hBoV为夏秋季节引起喘息的主要病原.hMPV 和 hBoV 感染后的临床症状无特异性,RSV感染患儿年龄较小、病情相对重.
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人类偏肺病毒毛细支气管炎患儿细胞免疫分析
目的 探讨人类偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)感染致毛细支气管炎患儿细胞免疫功能的变化.方法 用RT-PCR方法对255例毛细支气管炎住院患儿的呼吸道分泌物进行hMPV N基因检测,以明确hMPV感染.采用流式细胞仪检测患儿外周血T淋巴细胞亚群B淋巴细胞和NK细胞,以30例健康儿童作为对照组.结果 共检测到51份RT-PCR阳性扩增产物,阳性率为20.0%;hMPV感染组外周血 CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞与对照组比较差异无统计学意义,CD19+、CD19+CD23+、CD4+CD25+T细胞均明显增高(P<0.01),而NK细胞下降(P<0.05).结论 hMPV是毛细支气管炎的重要病原之一,hMPV感染后机体细胞免疫功能明显紊乱.
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重庆地区人类偏肺病毒感染与小儿毛细支气管炎
目的探讨人类偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)在重庆地区小儿毛细支气管炎中的感染情况,比较hMPV与呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起的毛细支气管炎的临床特点.方法用免疫荧光快速诊断方法,检测80例毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物中RSV、腺病毒(Ado)、流感病毒(Flu)A、B、副流感病毒(Para)1、2、3七种常见呼吸道病毒,采用RT-PGR的方法检测上述患儿鼻咽分泌物中hMPV的L基因和M基因.结果80例毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物中病毒检出率为65%,在病毒阳性检出标本中RSV感染占63.4%(33/52例),Flu-B(3/52例)和Para-3(3/52例)均占5.77%,Para-1占1.92%(1/52例),Flu-A与Flu-B混合感染占3.85%(2/52例);80例患儿的鼻咽分泌物中发现10例为hMPV L和M基因同时阳性,其中单独hMPV阳性7例,3例为RSV与hMPV合并感染,hMPV阳性占病毒阳性检出标本的13.46%(7/52例),hMPV与RSV合并感染为5.77%(3/52例).结论RSV仍然是引起毛细支气管炎的首位病原,约为41.25%;hMPV感染在重庆地区小儿毛细支气管炎中居第二位,约占8.75%(7/80例),仅从临床表现上很难鉴别hMPV感染与RSV感染.
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新发现呼吸道病毒感染的流行病学及其临床特征
呼吸道感染是儿科的常见病、多发病,是引起世界范围内5岁以下儿童死亡的首位原因.其临床表现易被认识,但病因却很难明确.2001年以来许多新的人类病毒被发现,其中人类偏肺病毒、人类冠状病毒NL63和HKU1,以及人类博卡病毒,均已被证实可引起小儿呼吸道疾病,其流行病学及临床特征也得到较为深入的研究.
