首页 > 文献资料
-
p53基因 Arg72Pro 多态性与复发性流产相关性的 Meta 分析
目的：系统地评价 p53基因 Arg72Pro 多态性与复发性流产的相关性。方法计算机检索 PubMed、Chochrane、Medline、CNKI、VIP 和 WanFang Data 数据库，搜集关于 p53基因 Arg72Pro 多态性与复发性流产相关性的研究，检索时限均为从建库至2015年12月3日。由2位研究者独立筛选文献、提取资料和评价纳入研究的偏倚风险后，采用 RevMan 5．3软件进行 Meta 分析。结果终纳入7个病例对照研究，包括病例组991例，对照组913例。Meta 分析结果显示，p53基因 Arg72Pro 多态性与增加患复发性流产的风险相关（Pro／Pro 与 Arg／Pro ＋Arg／Arg 的OR ＝2．22，95％ CI 为1．27～3．89；Pro／Pro 与 Arg／Arg 的 OR ＝2．23，95％ CI 为1．05～4．73；Pro／Pro 与 Arg／Pro 的OR ＝1.89，95％ CI 为1．36～2．64）。结论 p53基因 Arg72Pro 多态性与复发性流产发病风险增高相关。
-
恒河猴 p53基因沉默靶点在细胞水平的验证
目的：为建立恒河猴 p53基因沉默模型，首先在细胞水平筛选和测定恒河猴 p53基因有效沉默靶点。方法测定非洲绿猴肾来源成纤维细胞 COS-7中 p53基因的表达水平；对恒河猴 p53基因做生物信息学分析，优选靶序列设计 shRNA，克隆入慢病毒载体 FUGW-TDT，转染 COS-7细胞，以 real-time PCR 检测 p53 mRNA 抑制水平，以 Western blot 检测 p53蛋白水平表达变化。结果在 COS-7细胞检测到 p53基因的表达；生物信息学筛选到3个靶片段，分别位于 p53 mRNA 的238～258 bp，681～701 bp，169～189bp，均在开放阅读框内； p53三个靶位点的沉默效率在 mRNA 水平分别为（87.17±4.03）％，（72.62±4.11）％，（76.22±0.98）％；在蛋白水平的沉默效率分别为（84.44±2.18）％，（71.04±1.18）％，（74.17±0.95）％。结论在细胞水平筛选得到3个有效的 p53基因沉默靶点，可用于后续的恒河猴基因沉默研究。
-
脱氢抗坏血酸对Cr（Ⅵ）所致hMSH2和p53 mRNA基因表达的影响
目的：探讨Cr(Ⅵ)染毒对 A549细胞中 hMSH2和 p53 mRNA 表达的影响。方法体外培养A549细胞,实验组用脱氢抗坏血酸孵育90 min,对照组常规培养,然后两组均用浓度分别为0.00、1.25、2.50、5.00μmol/L的Cr(Ⅵ)染毒。用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测A549细胞中hMSH2和p53 mR-NA的表达量。结果实验组与 hMSH2和 p53 mRNA的相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)；Cr(Ⅵ)剂量依赖性地降低细胞中 hMSH2和 p53 mRNA的表达；脱氢抗坏血酸预处理可以进一步降低暴露于Cr(Ⅵ)的 A549细胞中 hMSH2 mRNA的表达。结论脱氢抗坏血酸在Cr(Ⅵ)致细胞毒性中起促进作用；Cr(Ⅵ)剂量依赖性地降低细胞中 hMSH2和 p53 mRNA的表达,因此Cr(Ⅵ)可能参与肺癌细胞癌变过程。
-
幽门螺杆菌感染患者胃癌及癌旁组织中p53、p16和bcl-2基因的表达
目的:研究幽门螺杆菌(H.pylori)感染胃癌患者胃粘膜病变中抑癌基因p53、p16和关键性凋亡调节基因bcl-2蛋白的表达,进一步探讨H.pylori在胃癌发生、发展过程中作用的分子机制.方法:胃镜检查及外科手术中取40例胃癌患者的癌组织和癌旁2 cm处组织各2块,石蜡包埋,切片HE染色作病理诊断及免疫组化检测p53、p16及bcl-2蛋白的表达.H.pylori阳性由快速尿素酶试验结合病理染色/14C-尿素呼气试验确定.结果:40例胃癌患者中,H.pylori阳性23例,阴性17例.p53阳性表达率在H.pylori阳性及阴性胃癌组织中无显著差异(P＞0.05).H.pylori阳性组慢性胃炎或肠化组织中p16的阳性表达率及表达强度均显著低于H.pylori阴性组(表达率:P＜0.05;表达强度:P＜0.001和P＜0.01).而H.pylori阳性组肠化组织中bcl-2的阳性表达率及表达强度均显著高于H.pylori阴性组(P＜0.05).结论:在胃癌发生的早期即存在较明显的p16基因表达低下与bcl-2基因过度表达,并与H.pylori感染有一定关系.p53基因过度表达是胃癌发展过程中较晚期的事件,与H.pylori感染无明显相关性.
-
p53基因质粒联合反义 c-myc 基因质粒治疗人膀胱癌作用机理的研究
目的：探索 p53基因质粒联合反义 c-myc 基因质粒治疗人膀胱癌的作用机理。方法将可在真核细胞表达 P53蛋白的质粒 pCEP4p53和表达反义 c-myc 基因的质粒 pCEP4ASCMH，以转染剂 FuGENE6为介导，同时转染到人膀胱癌 T24细胞中，经 DNA 测序、PCR-异双聚体 PAGE 电泳、Southern 印迹杂交、蛋白质印迹法、ELISA、Caspase-3活性检测等方法分析实验结果。结果DNA 测序结果表明，转染所用的 p53基因和反义 c-myc 基因的序列与文献报道一致，没有突变或失活等异常；PCR-异双聚体 PAGE 电泳证明 T24细胞的 p53基因发生了点突变；Southern 印迹杂交实验确证 p53基因和反义 c-myc基因经 FuGENE6介导转入靶细胞；蛋白质印迹法方法检测野生型 p53基因在靶细胞内表达 P53蛋白；ELISA 方法检测瘤细胞内 c-myc 基因表达产物的含量水平下降；Caspase-3活性检测结果表明其活性增加，表现为典型的凋亡特征。结论p53基因质粒联合反义 c-myc 基因质粒转染人 T24膀胱癌细胞能诱导典型的凋亡，为膀胱癌的基因治疗提供了新途径。
-
乳腺癌相关基因蛋白的表达及意义
目的探讨Cyclin D1、p16和p53在乳腺癌中的表达及意义.方法采用免疫组化SP法对23例乳腺增生症、11例乳腺不典型增生、58例乳腺癌中Cyclin D1、p16、p53、ER、PCNA进行检测.结果Cyclin D1、p16、p53的表达在乳腺增生症与不典型增生、乳腺癌间差异均有统计学意义.Cyclin D1的表达与乳腺癌淋巴结和(或)器官转移状态、3年生存情况、ER的表达、PI分级相关,与组织学分级、TNM分期无关;p16和p53的表达与各临床病理特征均相关.p16与Cyclin D1,p13的表达呈相关关系(P＜0.01),Cyclin D1与p53的表达亦呈相关关系(P＜0.01).乳腺癌,不典型增生多基因异常表达显著高于乳腺增生症(P＜0.01,P＜0.05),多基因异常表达与乳腺癌各临床病理特征均相关(P＜0.01).结论Cyclin Dl、p53的过表达与p16的失表达在乳腺癌的发生、发展过程中可能起着重要作用;三者联合检测优于单项检测,可提高乳腺癌早期诊断、恶性程度及预后判断的可靠性,指导临床综合治疗.
-
骨髓间充质干细胞尾静脉注射治疗大鼠肝损伤的效果及机制
目的：观察骨髓间充质干细胞尾静脉注射治疗大鼠肝损伤的效果，并探讨其机制。方法将30只 SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组，每组10只。模型组和治疗组大鼠用连续4个月皮下注射 D-半乳糖的方法成功制备大鼠肝损伤模型。治疗组大鼠造模成功后尾静脉注射3×106个用绿色荧光蛋白标记的间充质干细胞，对照组注射同等剂量的生理盐水。3 d 后检测各组大鼠血清天冬氨酸转氨酶（AST）、谷氨酸转氨酶（ALT）。处死各组大鼠，取肝组织制备冰冻切片，荧光显微镜下观察间充质干细胞分布，行 HE 染色观察肝组织病理结构；取肝组织制成匀浆，用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD），用硫代巴比妥酸法检测丙二醛（MDA），采用实时定量PCR 法检测肝组织中的 p53、p21 mRNA。结果治疗组大鼠注射骨髓间充质干细胞后3 d，荧光显微镜下可见带绿色荧光的骨髓间充质干细胞散在于肝脏内。光镜下观察，对照组大鼠肝细胞形态及结构正常，肝小叶结构正常；模型组大鼠肝组织水肿，细胞边缘不完整，肝索排列紊乱，肝小叶结构不清；与模型组比较，治疗组大鼠肝细胞形态较规则，肝小叶结构清晰，病理损伤减轻。与对照组相比，模型组大鼠肝组织中 SOD 水平降低，MDA 水平升高， p53、p21 mRNA 表达上调，血清 ALT、AST 水平升高（P 均＜0．05）。与模型组相比，治疗组大鼠肝组织中 SOD 水平升高，MDA 水平降低，p53、p21 mRNA 表达下调，血清 ALT、AST 水平降低（P 均＜0．05）。结论骨髓间充质干细胞静注能起到治疗 D-半乳糖诱导的大鼠肝损伤的效果，其机制可能与下调大鼠肝组织中 p53、p21 mRNA 表达及减轻肝组织氧化应激水平有关。
-
PTEN、p53和Survivin表达在胃癌组织中的意义
目的：探讨 PTEN 、p53和 Survivin 表达在胃癌组织中的临床意义。方法选择2010～2013年陕西省中医医院收治的60例胃癌患者的胃癌标本作为 A 组，选择同期于陕西省中医医院手术切除吻合口切缘处的正常胃黏膜60例作为 B 组，另取不典型增生胃黏膜石蜡标本65例作为 C 组，采用免疫组织化学链霉亲和素方法检测Survivin 、PTEN 和 p53基因在3组中的表达情况。结果胃癌组织中的 Survivin 、p53基因阳性率高于其他两组，差异具有统计学意义（P＜0．05）；Survivin 基因的阳性表达和 p53阳性呈正相关（P ＜0．05），和 PTEN 阴性率呈负相关（P＜0．05）；统计结果显示，3种基因在胃癌不同病理指标中的阳性表达差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 Survivin 、PTEN 和 p53基因异常表达和胃癌发生有密切的关系，其中 PTEN 与 p53基因是判断胃癌生物学行为的重要指标，Survivin 、PTEN 、p53基因在胃癌发生及发展中有着相互协同的作用。
关键词： survivin 基因 PTEN 基因 p53 基因 胃癌 -
T细胞淋巴瘤p53突变与其周围微卫星改变的研究
目的 探讨T细胞淋巴瘤p53突变和其周围微卫星DNA的改变及两者的关系,以进一步研究T细胞淋巴瘤的分子遗传学发病机制.方法 采用PCR、PCR-SSCP技术观察38例T细胞淋巴瘤的肿瘤组织及其肿瘤旁淋巴组织或同一病例的反应性增生淋巴结组织进行p53基因外显子5～8的点突变研究和p53周围4个微卫星位点D17S945、D17S938、D17S947、D17S926的微卫星(microsatellite,MS)改变:微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)和杂合性缺失(lossof heterozygosity,LOH)分析.结果 p53基因外显子5～8总突变率为39.47%(15/38).微卫星改变的阳性率为23.68%(9/38),LOH为7.89%(3/38).各位点MSI、LOH频率介于2.86%～18.42%和0～5.26%.微卫星改变阳性肿瘤的p53突变率为55.56%(5/9),阴性者为34.48%(10/29)(P>0.05).D17S926和D17S947位点LOH阳性组与阴性组的p53突变率分别为100%、36.11%(P>0.05).结论 T细胞淋巴瘤中存在微卫星改变和p53基因突变,两者发生无明显关系.但微卫星改变阳性的肿瘤,p53突变倾向于高发.
-
非小细胞肺癌 BALF 中 RAR-β基因甲基化与p53突变检测及相关性研究?
目的：探讨非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中 RAR-β基因甲基化与 p53基因突变检测的临床意义及二者的相关性。方法收集非小细胞肺癌患者(肺癌组)85例及良性疾病患者(良性疾病组)70例的 BALF 标本,采用甲基化特异性 PCR(MSP)方法检测 BALF 中的 RAR-β基因甲基化,PCR 结合 DNA 测序法检测 p53基因突变。结果肺癌组 BALF 中RAR-β基因甲基化率及 p53基因突变率分别为49.4%、36.5%,均显著高于良性疾病组(P <0.01)；(Ⅰ+Ⅱ)期 RAR-β基因甲基化率(32.5%)高于同期 p53基因突变率(12.5%)(P <0.05)；(Ⅲ+Ⅳ)期 RAR-β基因甲基化率及 p53基因突变率均显著高于(Ⅰ+Ⅱ)期(P <0.01)；发生 RAR-β基因甲基化的肺癌患者 p53基因突变率更高(P <0.01)；发生 p53基因突变的肺癌患者RAR-β基因甲基化率更高(P <0.01)。结论检测非小细胞肺癌患者 BALF 中 RAR-β基因甲基化与 p53基因突变有助于肺癌的诊断。
-
p53与bcl-2基因变化在股骨头缺血性坏死发病中的影响实验研究
目的：观察p53和bcl-2基因在股骨头坏死动物模型中的变化，了解其在该疾病发病的作用。方法：32只3个月龄新西兰大白兔随机分为实验组和对照组（均以幼兔的右侧股骨头为实验侧），给予实验组动物经右侧股骨颈注射医用T H胶0．5ml致骺板缺血，建立幼兔Perthes 病模型（A组），以相同方法用给予对照组右侧股骨头注射同等剂量生理盐水（B组），分别于建模后第6、8、10、12周取两组等量动物进行股骨头病理切片，观察两组股骨头p53和bcl-2凋亡基因表达的变化。结果：A组p53基因表达阳性率与股骨头骺板细胞凋亡率呈明显正相关性（ r＝0．7， P＜0．05），bcl-2基因表达阳性率与其之间呈明显负相关性（ r ＝-0．7， P＜0．01）。B组p53与bcl-2基因无明显变化。结论：p53和bcl-2凋亡基因与儿童股骨头坏死有相关性。
