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  • 反义寡核苷酸抑制肝癌血管内皮生长因子表达

    作者:龚邦东;罗文;杜芳腾;叶如美;刘晶美;余春根;邹叶青;张吉翔

    目的探讨不同序列的反义寡核苷酸对肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制效果. 方法 SMMC7721细胞于正常氧和缺氧条件下培养24h,观察缺氧对VEGF mRNA表达的影响;SMMC7721细胞接种于6孔板后,各加入不同的反义寡核苷酸(反帽子结构A06513、反翻译起始部位A06514、反第三外显子A06515、反翻译终止部位A06516和空白组),缺氧培养24h,然后收集细胞提取总RNA并作逆转录聚合酶链反应分析,同时以管家基因GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)表达为内对照. 结果缺氧条件下,SMMC7721细胞VEGF mRNA表达明显增强,而有氧条件下未见表达;反义寡核苷酸具有明显抑制VEGF mRNA表达,和空白对照组相比,A06513、A06514、A06515及A06516的VEGF/GAPDH值分别为0.49±0.08、0.71±0.12、0.72±0.11及0.86±0.12(F=12.21,P<0.05).帽子结构的反义基因表现强的抑制作用(P<0.01). 结论与VEGF帽子结构作用的反义寡核苷酸,有望成为肝癌反义基因治疗的新选择.

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