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反义互补脱氧核苷酸文献资料
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反义细胞周期素D1基因对肝癌细胞株HepG2的作用
目的通过基因反义封闭技术体外抑制细胞周期素D1(cyclin D1)的表达,研究其对肝癌细胞cyclin D1蛋白表达和细胞增殖的影响.方法以肝癌细胞株HepG2为研究对象,通过转染可表达cyclin D1反义互补脱氧核苷酸(AScDNA)的质粒后,观察cyclin D1反义cDNA对HepG2细胞cyclin D1基因表达及体外增殖活性的影响.结果四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖活性显示转染表达反义cyclin D1的质粒后,HepG2细胞的增殖受到抑制,抑制作用在48 h左右强;逆转录聚合酶链反应检测显示cyclin D1 mRNA基因的表达明显被抑制;免疫组织化学检测结果显示cyclin D1蛋白表达明显降低;流式细胞仪检测结果显示G0/G1期的细胞比例增高,G2+M和S期的细胞比例下降,HepG2细胞周期在G1期被阻滞.结论cyclin D1反义cDNA可以特异性的抑制肝癌HepG2细胞株cyclin D1蛋白的表达,从而调控细胞周期,抑制肝癌细胞增殖.利用cyclin D1反义cDN A进行细胞周期调控对于肝细胞癌的生物治疗具有一定的应用前景.
