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链球菌溶血素O抗原文献资料
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链球菌溶血素O抗原的原核表达及条件优化
目的：构建链球菌溶血素O抗原（SLO）的重组表达质粒，并优化其在大肠杆菌中的佳表达条件。方法以 A群链球菌DNA为模板，采用PCR法扩增SLO基因，将扩增的基因连接pET-32a（＋）表达载体构建pET-32a（＋）-SLO重组质粒，重组质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）中，转化后的表达菌经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导和自诱导的方式分别诱导及纯化，终确定佳的表达条件。结果 PCR扩增的基因大小与SLO基因大小一致，测序完全正确。不同浓度的IPTG诱导均为包涵体表达，且表达量均较低；自诱导的方式，不仅表达量明显提高，且实现了部分可溶性表达。结论成功构建了SLO的原核表达质粒，优化筛选出能高效可溶性表达的诱导条件，纯化获得了SLO重组融合蛋白质，为进一步的基础及临床研究应用奠定基础。
