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石菖蒲加冰片对脑皮质神经细胞保护作用及其伍用配比的研究
目的观察石菖蒲加冰片不同配比对新生大鼠脑皮质神经细胞的保护作用,从而筛选出较佳配比.方法培养脑皮质神经细胞,造缺氧模型,观察给药组与对照组的bcl-2、bax、caspase-3、白细胞介素-6(IL-6)等指标及原位细胞凋亡情况.结果药物组能降低促凋亡基因caspase-3、bax的表达;而提高抑制凋亡基因bcl-2的表达,减少脑皮质神经细胞凋亡;减少IL-6的生成.石菖蒲加冰片不同配比明显比单纯石菖蒲挥发油组和单纯冰片组的作用效果好,其中高、中、低配比组之间比较,高配比组作用效果好.结论石菖蒲加冰片能减少脑皮质神经细胞凋亡,对脑皮质神经细胞有保护作用,尤以高配比组(冰片:挥发油=2:1.46)作用更明显,为较佳配伍.
关键词： 石菖蒲/药理学 冰片/药理学 细胞培养 脑皮质神经细胞/药物作用 -
冰片促血脑屏障开放与病理性开放的比较
目的探讨冰片促血脑屏障(Blood-brainbarrier,BBB)开放是否为生理性开放,以及与病理性BBB开放的异同.方法采用链菌素亲生物素-过氧化酶连接法(S-P法)染色和抗诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)抗体的免疫组化方法,观察正常与异常情况下脑微血管内皮细胞(EC)内iNOS表达量的变化,以及灌服冰片后EC中iNOS表达量的变化.结果正常大鼠灌服冰片后,脑微血管EC中iNOS表达量不增加,与正常对照组无差别;脑外伤后,EC中iNOS表达量明显增加,此时灌服冰片可抑制iNOS的表达.结论冰片诱导的BBB开放与病理性BBB开放有着质的区别,冰片可减少EC中iNOS的病理性表达,对病理状态的脑组织有保护作用.
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麝香、冰片对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响
目的探讨芳香开窍药麝香、冰片对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响.方法Pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,采用高效液相色谱法检测脑组织谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸.结果芳香开窍药可降低缺血区脑组织中的Asp,提高GABA、Gly的含量.结论芳香开窍药可降低脑缺血时的兴奋性神经递质Asp和升高抑制性神经递质GABA、Gly,以对抗兴奋性氨基酸的毒性,从而保护脑缺血后继发神经元的损伤,这可能是其芳香开窍机理之一.
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冰片对大鼠脑微血管内皮细胞 ICAM-1 表达量的影响
目的：研究冰片对大鼠脑微血管内皮细胞 ICAM-1 表达量的影 响。方法：采用自由落体撞击硬脑膜致伤方法制成大鼠脑挫 裂伤模型，将大鼠伤侧脑皮质制成石蜡切片，运用免疫组化学染色技术观察空白对照组（C 组：只灌服石蜡油）、冰片组（B 组：灌服等量冰片石蜡油）、脑外伤组（M 组：脑挫裂伤 组）和脑外伤加冰片组（M+B 组：脑挫裂伤大鼠灌服冰片石蜡油）大鼠脑皮质微血管内皮细 胞（EC）膜表面细胞间粘附分子-1（ICAM-1）量的表达，并进行半定量分析。结果 ：C 组 EC 无表达或有少量表达，服用冰片不能使 ICAM－1 表达增强，脑外伤 后 ICAM-1 表达有明显增强（P<0.001），及 脑外伤大鼠服用冰片可使 ICAM-1 表达明显减弱 。结论：证明冰片促血脑屏障 （BBB）开放与 ICAM-1 无关，冰片对脑外伤大鼠脑组织具有一定的保护作用。
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冰片对兔角膜上皮细胞的损伤作用
【目的】观察冰片对兔角膜上皮细胞的损伤作用。【方法】以浓度分别为100、200、400μg/mL的冰片作用于兔角膜上皮细胞，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞活性， Annexin V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）双染法流式细胞仪检测细胞凋亡率； Real-time PCR法检测细胞凋亡相关基因Caspase-3 mRNA的表达。【结果】不同浓度的冰片均可抑制兔角膜上皮细胞的活性；与正常对照组比较，冰片组可增加兔角膜上皮细胞的凋亡率，增强Caspase-3 mRNA的表达（P<0.05或P<0.01）。【结论】冰片能抑制兔角膜上皮细胞的生长，诱导细胞发生凋亡，其机制与增强凋亡相关基因Caspase-3 mRNA的表达有关。
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石菖蒲冰片对神经细胞缺氧性损伤的保护作用
[目的]探讨石菖蒲、冰片对缺氧损伤神经细胞的保护作用.[方法]在缺氧培养条件下造成大鼠神经细胞损伤,测定空白对照组、模型对照组、石菖蒲挥发油组、冰片组、冰片+石菖蒲挥发油(低、中、高配比)组神经元细胞数、神经细胞支配面积.[结果]石菖蒲挥发油、冰片、冰片+挥发油(低、中、高配比)给药组神经细胞支配面积和神经元细胞数高于空白对照组和模型对照组.[结论]石菖蒲、冰片对缺氧诱导的大鼠神经细胞损伤具有保护作用.
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醒脑静对大鼠皮层神经细胞的保护作用
[目的]研究麝香、冰片等组成的醒脑静对神经细胞的保护作用.[方法] 利用原代培养的大鼠大脑皮层神经细胞,观察醒脑静对抗谷氨酸(10 μmol*L-1,3 h)对脑细胞的兴奋毒性作用.[结果]醒脑静能减少谷氨酸所造成的细胞内乳酸脱氢酶漏出量,减轻细胞的形态学改变.[结论]醒脑静能够对抗谷氨酸介导的兴奋性毒性,对培养的大鼠大脑皮层细胞具有保护作用.
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冰片与川芎配伍抗脑缺血再灌注损伤作用机理的研究
[目的]探讨冰片与川芎配伍抗脑缺血再灌注损伤的作用机理.[方法]用结扎双侧颈总动脉法,造成大鼠脑缺血再灌注模型,观察冰片与川芎配伍对急性脑缺血再灌注脑组织中一氧化氮(NO)及自由基含量的影响.[结果]冰片与川芎配伍使缺血再灌注脑组织过氧化脂质(LPO)生成明显减少(P＜0.01),并升高超氧化物歧化酶(SOD)活性(P＜0.01),对NO含量也有明显降低的作用(P＜0.01),作用明显优于单用川芎或冰片.[结论]提示冰片与川芎配伍可能是通过减少缺血脑组织中NO的生成,减轻NO介导的神经毒性作用,提高自由基清除酶的活性,抑制脂质过氧化反应,而对缺血性脑组织损伤起保护作用,伍用冰片后可增强川芎对脑缺血再灌注损伤的保护作用.
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麝香配伍冰片对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑含水量及血脑屏障通透性的影响
[目的]观察麝香配伍冰片对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑含水量及血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的影响.[方法]将SD大鼠30只随机分为6组:假手术组、模型组、麝香组(剂量为1 mg·kg-1·d-1)、冰片组(剂量为3 mg·kg-1·d-1)、麝香配伍冰片组、尼莫地平组(剂量为12 mg·kg-1·d-1);采用颈内动脉线栓法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,干湿质量法观察脑含水量的变化,通过收集透出脑血管外的伊文思蓝(Evans blue,EB)来示踪BBB的变化.[结果]脑缺血2 h再灌注24 h,模型组较假手术组脑含水量及脑皮质EB含量显著性增加(P＜0.01),血脑屏障遭到破坏;麝香配伍冰片组脑含水量较模型组显著性降低(P＜0.05),而且麝香配伍冰片组及冰片组脑皮质EB含量较模型组显著性降低(P＜0.01).[结论]麝香配伍冰片可有效降低脑缺血再灌注后脑含水量及血脑屏障的通透性,对血脑屏障结构具有一定的保护作用.
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冰片与川芎配伍对脑缺血再灌注损伤的保护作用
用结扎双侧颈总动脉法,造成大鼠脑缺血再灌注模型,观察冰片与川芎配伍对急性脑缺血再灌注脑组织含水量、形态学及超微结构的影响.结果显示,冰片与川芎配伍可明显减轻缺血再灌注脑组织含水量;明显减轻细胞间质水肿和神经细胞的损伤;对脑缺血再灌注所致脑组织超微结构的破坏也有明显的保护作用.提示冰片与川芎配伍可通过保护血管内皮细胞功能、基膜的完整性,改善微循环,减轻脑水肿程度,从而对脑缺血再灌注损伤起保护作用.冰片与川芎配伍后,作用明显优于单用川芎或冰片.
