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老化红细胞变形能力与膜钙依赖中性蛋白酶活性的关系
研究表明,老化红细胞变形能力明显降低,且其降低与血红蛋白浓度增高及膜弹性降低有关,而与红细胞膜钙依赖中性蛋白酶(Calpain)活性的关系尚不清楚.为此,我们检测42例健康人老化红细胞及年轻红细胞变形能力、Calpain和Ca2+-ATP酶活性及膜收缩蛋白(spectrin,SP)相对含量的变化,以探讨老化细胞变形能力降低与Calpain活性的关系.
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NLRP3炎性小体在单核细胞清除老化红细胞过程中的活化
目的 分析单核细胞在体外清除老化红细胞时,NLRP3炎性小体是否活化.方法 THP-1细胞经PMA诱导,使其具有吞噬能力,和42℃水浴老化红细胞,及IgG抗D致敏红细胞分别共培养.镜检观察THP-1对这两种红细胞的吞噬率.使用ELISA及QRT-PCR检测培养上清及THP-1细胞中IL-1β表达量.使用免疫印迹技术检测NL-RP3炎性小体的表达量.尼日利亚菌素刺激的THP-1细胞作为NLRP3炎性小体活化的阳性对照组.结果 THP-1细胞对IgG抗D致敏红细胞、42℃水浴老化红细胞、新鲜红细胞的吞噬率分别是(46.00±3.46)％、(35.32±5.71)％、及(13.72±2.29)％.这3组培养上清中的IL-1β含量分别是(19.85±0.32)pg/mL,(16.91±2.64) pg/mL,及(14.76±0.69) pg/mL.QRT-PCR对IL-1β的检测结果,及免疫印迹对NLRP3炎性小体的检测结果均符合该趋势.差异明显(P＜0.05).结论 THP-1细胞对42℃水浴老化红细胞及IgG抗D致敏红细胞的清除,分别在体外模拟了涉及CD47-SIRPα通路的非调理性清除模式,及涉及IgG-FcγR通路的调理性清除模式.这两种老化红细胞的清除机制,均可使单核细胞的NLRP3炎性小体活化,上调促炎细胞因子IL-1β分泌量.
