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X连锁凋亡抑制蛋白反义寡核苷酸诱导膀胱移行细胞癌细胞凋亡的研究
目的 观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)反义寡核苷酸促进膀胱移行癌细胞凋亡的作用及可能机制.方法 将XIAP全硫代反义寡核苷酸,通过脂质体途径转染膀胱移行细胞癌细胞.使用RT-PCR和Western blotting检测XIAP的mRNA和蛋白表达,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光分光法检测Cas-pase-3活性.结果 XIAP反义寡核苷酸能够使癌细胞内XIAP的mRNA和蛋白表达均明显下调,诱导T24细胞凋亡,实验组与对照组相比较,差异具有统计学意义(P＜0.05),反义寡核苷酸同时使癌细胞中Caspase-3的活性明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜(0.05).结论 下调XIAP的表达可以诱导膀胱癌细胞的凋亡,其机制与提高Caspase-3的活性有关.
关键词： X连锁调亡抑制蛋白基因 反义寡核苷酸 移行细胞癌 细胞凋亡 -
转染反义寡核苷酸对人胆管癌QBC939细胞XIAP基因表达及细胞周期作用的实验研究
目的 研究转染反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人胆管癌细胞株QBC939细胞凋亡抑制蛋白基因(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)表达的抑制作用及对细胞周期凋亡的影响.方法 脂质体介导ASODN瞬时转染QBC939细胞,荧光显微镜观察ASODN转染人细胞的情况,并计算转染率;RT-PCR检测转染前后XIAP mRNA表达的变化;流式细胞仪检测转染后细胞周期的变化和凋亡率.结果 转染后24 h可达到佳的转染效果;ASODN组的XIAP基因水平明显低于对照组(P<0.05),流式结果显示转染后QBC939 G0/G1期细胞高于阴性对照组,凋亡率高于对照组(P<0.05).结论 脂质体介导转染ASODN能特异性地抑制QBC939细胞中的XIAP基因表达,使其发生G0/G1期阻滞,并诱导胆管癌细胞凋亡,有望成为胆管癌基因治疗新的靶点.
关键词： X连锁调亡抑制蛋白基因 寡脱氧核苷酸 反义 胆管癌 细胞周期
