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咖啡酸苯乙酯对 HT-29细胞 FAK、ERK 及Caspase-3表达的影响
目的：探讨咖啡酸苯乙酯（CAPE）对人结肠癌 HT-29细胞 FAK、ERK 及 Caspase-3表达的影响。方法采用不同浓度（2.5、5.0、7.5、10μg·ml-1）的 CAPE 处理体外培养的结肠癌 HT-29细胞后，应用 RT-PCR法检测 FAK、ERK 和 Caspase-3 mRNA 表达水平，采用免疫组织化学方法检测 FAK 和 ERK 的蛋白表达变化。结果不同浓度的 CAPE 作用于 HT-29细胞24 h 后，其 FAK 和 ERK 的 mRNA 表达随 CAPE 浓度增加而下降，Caspase-3的 mRNA 表达随 CAPE 浓度增加而上升。人结肠癌 HT-29细胞中 FAK 和 ERK 蛋白阳性表达定位于细胞浆，经10μg·mL-1的 CAPE 作用24 h 后，FAK 和 ERK 的蛋白表达减少。结论CAPE 可下调HT-29细胞 FAK、ERK 的 mRNA 和蛋白表达，上调 Caspase-3的 mRNA 表达。
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胡椒碱对脂多糖和金黄色葡萄球菌抑制人结肠腺癌细胞系表达防御素的拮抗作用
目的：研究胡椒碱（piperine，PIP）对脂多糖（LPS）和灭活金黄色葡萄球菌（SAC）菌体抑制人结肠腺癌HT-29和 Caco-2细胞表达防御素（Defensin）的影响．方法：WST-1法检测 PIP 对 HT-29和 Caco-2细胞增殖的作用；定量 PCR（qRT-PCR）检测人α防御素 DEFA5（HD5）和 DEFA6（HD6），人β防御素 HBD-1以及胰岛再生源蛋白（Reg）Reg IIIγ等 mRNA 的表达水平．结果：PIP 处理可剂量依赖性地抑制 HT-29和 Caco-2细胞的增殖，半数抑制浓度 IC50分别为328.5μmol／L 和155.1μmol／L，表明 PIP 对细胞的毒性较小；定量 PCR 检测显示，PIP 处理对 LPS或 SAC 下调 HT-29和 Caco-2细胞 DEFA5和 DEFA6 mRNA 表达水平具有显著的拮抗作用，对 DEFB1和 Reg IIIγmRNA 的表达没有明显影响．结论：胡椒碱可能通过拮抗病原体诱导细胞表达防御素的抑制作用，进而发挥其抗肠炎作用．
