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钙调素依赖蛋白激酶家族Ⅱ文献资料
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钙调素依赖蛋白激酶家族Ⅱ表达调控对大鼠肝细胞BRL-3A凋亡的影响
目的 探讨钙调素依赖蛋白激酶家族Ⅱ(Calmodulin-dependent kinases casades,CaMK Ⅱ)表达调控对大鼠肝细胞BRL-3A凋亡的影响.方法 通过培养稳定传代的大鼠肝细胞BRL-3A细胞,并建立构建CaMK Ⅱγ蛋白(LV-CaMK Ⅱγ组)和CaMK ⅡγshRNA(shRNA组)的慢病毒表达体系,同时予以灌注相应的空白载体(LV-NC组、shRNA-NC组)及空白对照(CON组)形成对照,通过Western blot法检测各组CaMK Ⅱ、细胞色素C(Cytochrome C,Cyt C)、凋亡诱导因子(Apoptosis inducing factor,AIF)蛋白的表达,并通过Tunel法检测大鼠肝细胞BRL-3A凋亡率.结果 LV-CaMK Ⅱγ组的CaMK Ⅱ、Cyt C、AIF的蛋白表达量较CON组显著增多(均P＜0.05);shRNA组的CaMK Ⅱ、Cyt C、AIF的蛋白表达量较CON组显著降低(均P＜0.05);而CON组、LV-NC组、shR-NA-NC组组间比较无显著差异(P＞0.05).同一时点LV-CaMKⅡγ组肝细胞凋亡比CON组多,差异有统计学意义(P＜0.05);同一时点shRNA组肝细胞凋亡比CON组少、差异有统计学意义(P＜0.05);shRNA-NC组、LV-NC组和CON组有差异但无统计学意义(P＞0.05).结论 特异性阻断CaMK Ⅱ信号通路可抑制肝细胞BRL-3A凋亡;而增强的CaMKⅡ信号通路则促进肝细胞BRL-3A凋亡.
关键词： 钙调素依赖蛋白激酶家族Ⅱ 大鼠肝细胞 BRL-3A 慢病毒 细胞凋亡
