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吉西他滨对胰腺癌细胞株PANC-1中TMS1/ASC基因表达及启动子甲基化的影响
目的:观察吉西他滨(GEM)对胰腺癌细胞株PANC-1中甲基化诱导静止基因(TMS1/ASC)的表达及其启动子区甲基化的影响,并讨论其疗效机制.方法:将对数生长期PANC-1分为两组,以加入4.27μg/ml 的GEM作用于PANC-1细胞者为实验组(GEM组),以不加GEM者为对照组,分别继续培养24h,采用DNA原位末端标记(TUNEL)法结合激光共聚焦显微镜观察两组PANC-1细胞凋亡和细胞核形态变化;采用RT-PCR检测两组PANC-1细胞中TMS1/ASC mRNA的表达情况;采用重亚硫酸盐限制内切酶法(COBRA)检测两组PANC-1细胞中TMS1/ASC的甲基化状态.结果:(1)GEM组中PANC-1凋亡明显(FITC和PI双染阳性),对照组未见PANC-1凋亡;(2)GEM组PANC-1的TMS1/ASC mRNA表达显著高于对照组(P<0.01);(3)GEM组PANC-1中TMS1/ASC启动子区甲基化率显著低于对照组(P<0.01).结论:GEM可能通过促进 PANC-1细胞凋亡,上调 TMS1/ASC mRNA表达以及抑制TMS1/ASC启动子区的甲基化而起到治疗胰腺癌的作用.
关键词: 吉西他滨 胰腺癌细胞株PANC-1 甲基化诱导静止基因