首页 > 文献资料
-
结直肠癌组织及细胞中人叉头框蛋白C2的水平变化及意义
目的 探讨人叉头框蛋白C2(FOXC2)在结直肠癌组织及细胞中的表达变化及意义.方法 收集结直肠癌组织及癌旁组织标本40例份,使用RT-PCR技术检测癌组织和癌旁组织FOXC2 mRNA表达水平.采用Western blotting法检测结直肠癌细胞系HT29、SW620、SW480、LOVO、HCT116、LS174T、HCT8中FOXC2蛋白的表达.针对FOXC2基因设计4组shRNA干扰目的序列及无任何靶向位点的随机序列,将序列剪切至慢病毒载体上,利用二代慢病毒包装系统包装成慢病毒悬液.将HT29接种至6孔板中,分别标记对照组、shFOXC2 1#组、shFOXC2 2#组、shFOXC2 3#组、shFOXC2 4#组,对照组加入插入随机序列载体的慢病毒悬液,shFOXC2 1#组、shFOXC2 2#组、shFOXC2 3#组、shFOXC2 4#组分别加入插入4组shRNA干扰目的序列的慢病毒悬液,构建稳定knock-down FOXC2的细胞系.检测各组FOXC2蛋白mRNA的表达.收集shFOXC2 1#组、shFOXC2 4#组及对照组(GV248细胞)的细胞,通过MTS比色法检测细胞增殖能力,划痕修复试验检测细胞侵袭能力,同时Western blotting法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白1(Zo-1)、波形蛋白(Vimentin)的表达.结果 癌旁组织FOXC2 mRNA的表达量低于癌组织(P<0.05). HT29细胞系FOXC2蛋白表达量高于其他细胞系(P均<0.05).与对照组比较,shFOXC2 1#组、shFOXC2 2#组、shFOXC2 4#组FOXC2蛋白表达量低,shFOXC2 1#组、shFOXC2 3#组、shFOXC2 4#组FOXC2 mRNA表达量低(P均<0.05).与对照组比较,shFOXC2 1#组、shFOXC2 4#组48、72 h细胞增殖活力、侵袭能力降低(P均<0.05);E-cadherin、Zo-1蛋白表达量升高,Vimentin蛋白表达量降低(P均<0.05).结论 FOXC2在人结直肠癌组织中水平升高,其可促进细胞增殖、侵袭和上皮间充质转化过程的发生.
-
乳腺癌组织中人叉头框蛋白C2表达的临床意义及其与细胞增殖能力的关系
目的 观察人叉头框蛋白C2(Forkhead box protein C2,FOXC2)在乳腺癌组织中的表达水平,并探究其临床意义和与细胞增殖能力的关系.方法 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测36例临床收集的乳腺癌组织及癌旁组织中FOXC2的表达情况,免疫组化检测肿瘤组织中ER、PR、Her-2的表达.对患者FOXC2的表达与患者一般情况及乳腺癌TNM分期、分子分型行Spearman相关性分析.体外转染干扰质粒干扰乳腺癌细胞MCF-7的FOXC2表达并经RT-PCR验证,MTr检测细胞增殖能力的变化.kaplan-meier生存分析检测患者的预后与FOXC2表达的关系.结果 乳腺癌组织FOXC2表达显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05),其表达与乳腺癌TNM分期及分子分型存在显著的相关性(r =0.343、r =0.528,P＜0.05),与患者年龄及体质量无显著相关(r=0.179、r=-0.138,P＞0.05).siRNA干扰MCF-7的FOXC2表达后,细胞增殖能力在48h及72h时降低,差异有统计学意义(P＜0.05).Kaplan-meier生存分析曲线示高表达FOXC2的患者预后不良.结论 FOXC2在乳腺癌组织中高表达,与乳腺癌进展、恶性程度及患者预后存在显著相关性,并能促进细胞的增殖,可能在乳腺癌的发生发展中起着重要的促进作用.
