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mM-CSF文献资料
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mM-CSF 及其剪切体重组逆转录病毒表达载体的构建
目的：构建膜结合型M-CSF（ mM-CSF）及其胞内区截短30个氨基酸的剪切体（ mM-CSF-Δ）重组逆转录病毒表达载体。方法用DNA重组技术构建并鉴定mM-CSF和mM-CSF-Δ的重组逆转录病毒表达载体MSCV-PGK-GFP-mM-CSF、MSCV-PGK-GFP-mM-CSF-Δ，与空载体对照MSCV-PGK-GFP分别转染Phoenix细胞包装病毒，并感染HEK293细胞，通过流式分选术获得3种阳性细胞。结果经Phoenix包装的重组及对照逆转录病毒成功感染HEK293细胞，获得了稳定表达细胞株HEK293-M、HEK293-M-Δ和对照细胞株HEK293-V。 RT-PCR以及West-ern blotting法检测发现HEK293细胞中有mM-CSF和mM-CSF-Δ的表达，HEK293-M细胞和HEK293-M-Δ细胞经流式抗体标记后均能检测到膜蛋白的表达。结论成功构建了mM-CSF及其剪切体的重组逆转录病毒表达载体。
