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4-OH雌二醇文献资料
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LC-MS/MS同时测定MCF-7细胞中雌二醇及其羟基代谢物
目的:建立快速、灵敏、简便的超高效液相色谱—串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定乳腺癌细胞中雌二醇及其代谢产物2-OH雌二醇和4-OH雌二醇的含量的方法.方法:以炔雌醇为内标,细胞样品经甲基叔丁基醚(MTBE)萃取后、氮气吹干,用吡啶-3-磺酰氯衍生化、再次用MTBE萃取、氮气吹干、用80％甲醇复溶,通过ACQUITY UPLC CSHTM C18柱梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI),阳离子扫描模式,以多反应监测方式(MRM)进行含量测定.结果:雌二醇在0.4～20 ng/mL,2-OH雌二醇、4-OH雌二醇在0.2～10 ng/mL浓度内具有良好的线性关系,雌二醇、2-OH雌二醇、4-OH雌二醇的定量下限分别为0.4 ng/mL、0.2 ng/mL、0.2 ng/mL;日内和日间精密度分别为5.63％～17.37％和1.19％～18.95％、准确度为85.29％ ～ 113.9％、稳定性和基质效应等均符合生物样品分析的要求.结论:本方法简便、准确、专属性强,适用于雌二醇及其代谢物在乳腺癌细胞中的药代动力学研究.MCF-7细胞主要将雌二醇代谢为2-OH雌二醇.
