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NR8383细胞系文献资料
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实时荧光定量PCR检测脂多糖对NR8383细胞TNF-α mRNA 的影响
目的 实时荧光定量PCR检测脂多糖(LPS)诱导NR8383肺泡巨噬细胞前后TNF-α mRNA的表达情况.方法 体外培养的肺泡巨噬细胞系NR8383分成LPS刺激组和PBS(磷酸盐缓冲液)对照组,LPS终浓度为1 μg·mL-1,共培养2 h后,TRIzol法提取细胞总RNA,SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测细胞TNF-α mRNA的表达,结合管家基因β-Actin进行相对定量分析.结果 荧光定量PCR未发现非特异性扩增.与对照组比较,LPS刺激组细胞TNF-α mRNA上调了124.1倍,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 用于本研究TNF-α mRNA的荧光定量PCR检测体系特异性好,结果可靠,为进一步实验奠定了基础.
