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以Insig-2基因启动子为靶点的药物筛选模型的建立
目的 通过双荧光素酶报告基因检测系统建立以胰岛素诱导基因2(insulin-induced gene 2,Insig-2)启动子为靶点的药物筛选模型.方法 将人Insig-2基因启动子序列克隆入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建重组质粒 pGL3-Insig-2并与内参质粒 pRL-TK 瞬时共转染工具细胞,通过检测荧光素酶报告基因表达水平的变化反映Insig-2基因启动子启动转录的活性,并对共转染质粒比例、工具细胞选择等条件进行探索和优化,相关药物处理进行验证.结果 成功构建了重组质粒pGL3-Insig-2;确认pGL3-Insig-2:pRL-TK共转染比例为4:1,确定3T3-L1细胞为工具细胞;1,25-(OH)2D3、小檗碱和姜黄素均能明显增强Insig-2基因启动子活性.结论 成功建立了以Insig-2基因启动子为靶点的药物筛选模型,为筛选新型调脂药奠定基础.
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三磷酸腺苷生物荧光法监测宫腔吸管清洗质量的研究
目的 探讨三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法在监测宫腔吸管清洗质量中的应用价值.方法 按随机原则选择使用后的宫腔吸管120件,A组60件采用纯水浸泡+高压水枪冲洗+干燥的方法,B组60件 采用碱性清洗液浸泡+超声+高压水枪冲洗+手工擦洗+干燥的方法.用目测法初步检测宫腔吸管清洗后的质量,用ATP生物荧光法和细菌计数法作平行比较,检测宫腔吸管头内部顶端、吸管接头端内口2.5 cm处、吸管外壁前端、吸管腔内壁10 cm处,清洗前后细菌的残留量.结果 两组宫腔吸管完成清洗干燥程序后吸管头内部顶端、吸管接头端内口2.5 cm处、吸管外壁前端、吸管腔内壁10 cm处相对光单位值(RLU)差异均有统计学意义(t =26.81、29.13、7.14、55.74,均P＜0.01),B组清洗效果明显优于A组.细菌计数法检测未检出致病微生物,上述四个部位清洗合格率分别是:A组:70.0％、85.0％、93.3％、93.3％；B组:95.0％、98.3％、100.0％、100.0％；B组合格率均高于A组(x2=12.99、6.98、4.14、4.14,均P＜0.05).结论 碱性清洗液浸泡、超声和手工擦洗是宫腔吸管清洗的重要环节；ATP生物荧光法可动态地快速检测宫腔吸管清洗前后的细菌残留量,能作为有效检测宫腔吸管清洗质量的评价方法.
