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DMOG对间充质干细胞生物学特性影响的研究
[目的]探讨二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的影响.[方法]以DMOG作用于P4代MSCs,分为DMOG 0、20、40和80μmol·L-1组,以CCK-8法、流式细胞术、Transwell迁移法和Real-time qPCR依次检测不同浓度的DMOG对MSCs增殖能力、细胞周期、迁移能力以及成骨、成脂、成软骨和成神经分化能力的影响.[结果]DMOG各浓度组细胞生长曲线均接近S型,与DMOG 0μmol·L-1组比较,20μmol·L-1对MSCs增殖能力具有促进作用,40μmol·L-1促进作用明显,差异具有统计学意义(P<0.05).与DMOG 0μmol·L-1组比较,DMOG处理可提高处于S期+G2/M期的MSCs细胞比例,差异具有统计学意义(P<0.05).与DMOG 0μmol·L-1组比较,DMOG 20μmol·L-1时促迁移作用显著(P<0.05).DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的成骨、成脂、成软骨、成神经分化能力,DMOG 20μmol·L-1可显著促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制MSCs成脂分化能力,差异具有统计学意义(P<0.05),对MSCs成神经分化能力无显著影响(P>0.05).[结论]不同浓度DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的多向分化能力,其中20μmol·L-1 DMOG可促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制其成脂分化能力,对其成神经分化能力无显著影响,同时可显著提高MSCs增殖、迁移能力.
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脯氨酸羟化酶抑制剂对小鼠间充质干细胞的动员作用
[目的]探讨脯氨酸羟化酶抑制剂---二甲基乙二酰基甘氨酸（dimethyloxaloylglycine，DMOG）对小鼠间充质干细胞（mouse mesenchymal stem cel s，mMSCs）的动员作用。[方法]ICR小鼠随机分为对照组及3个DMOG动员剂量组（20、40、80mg·kg-1）。不同剂量的DMOG每天一次在固定的时间段腹腔内注射入ICR小鼠，对照组给予相同体积的生理盐水。采用流式细胞术与成纤维细胞集落形成单位法检测不同浓度DMOG处理后小鼠外周血与骨髓中MSCs数量，Western blotting法检测骨髓细胞中HIF-1α、SDF-1α及VEGF蛋白的表达，ELISA法检测骨髓上清及外周血清中SDF-1α及VEGF蛋白的浓度。[结果]流式细胞术与成纤维细胞集落形成单位法检测发现不同剂量的DMOG处理7d后小鼠外周血与骨髓中MSCs数量较对照组显著增加（P＜0.05），且CD45-CD90+细胞群比例升高（P＜0.05）。同时Western blotting法及ELISA法检测发现小鼠骨髓HIF-1α、SDF-1α表达上调，VEGF浓度升高（P＜0.05）。[结论]DMOG对小鼠间充质干细胞具有动员作用，可能与通过上调HIF-1α，从而调控其下游相关通路有关。
关键词： 间充质干细胞 动员 DMOG 缺氧诱导因子-1α 成纤维细胞集落生成单位 -
DMOG对MSCs成骨分化及缺血损伤影响的研究
[目的]研究二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxalglycine,DMOG)对体外培养的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化和缺血损伤的影响.[方法]利用全骨髓贴壁法获得MSCs,诱导其向成骨细胞分化,同时给予20μM、40μM、80μM的DMOG处理,培养3d、7d、14d时分别进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的定量测定,培养14d时进行硝酸银染色;建立MSCs缺血损伤模型,同时给予不同浓度DMOG处理,Western blot检测MSCs中Bcl-2/Bax蛋白的表达,MTT法检测MSCs增殖能力,台盼蓝染色检测MSCs细胞活力.[结果]DMOG处理可促进MSCs成骨分化中ALP的表达,且DMOG 20μM处理促进作用显著;各组MSCs成骨分化中ALP的表达均呈时间依赖性增加.DMOG 20μM组黑色矿化基质分泌明显多于其余各组.40μM DMOG可以显著提高缺血损伤MSCs中Bcl-2蛋白的表达、抑制Bax蛋白的表达,可显著促进缺血损伤MSCs的增殖能力和存活率,DMOG的20μM、80μM处理无显著促进或抑制作用.[结论]DMOG 20μM可显著促进MSCs成骨分化能力,DMOG 40μM可有效提高缺血损伤MSCs的增殖能力和存活率.
