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混合二元醇改性处理对减轻戊二醛牛心包细胞毒性的作用
目的:研究混合二元醇对减轻戊二醛牛心包细胞毒性的作用.方法:牛心包分两组--A组:用0.625%戊二醛固定2 w后用0.3%戊二醛保存;B组:牛心包用0.625%戊二醛固定2 w后,用混合二元醇后处理并保存.C组:玻片对照组.二组心包均切成2 cm×2 cm,分别种植同样数目的(4×104)人胚肺成纤维细胞,培养7 d后,分别计算每片心包上活细胞数.同时作光镜及扫描电镜观察.结果:①活细胞计数结果:A组、B组与对照组相比差异均有显著性(P＜0.01).B组与A组的活细胞数差异有显著性(P＜0.01).②光镜下:对照组细胞生长良好,A、B组均有死亡细胞,尤以A组为多.③扫描电镜:A组活细胞很少,且多为圆球形细胞;B组有较多的细胞覆盖生长,可见细胞分裂相.结论:混合二元醇改性处理后的戊二醛牛心包细胞毒性明显降低.
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混合醇改性处理对戊二醛牛心包细胞毒性的影响
目的研究混合醇改性对戊二醛牛心包细胞毒性的影响;并验证0.3%戊二醛保存对改性后的戊二醛牛心包细胞毒性有无影响.方法取新鲜牛心包心前区部分,分三组处理:A组:用0.625%戊二醛固定两周后用0.3%戊二醛保存;B组:牛心包用0.625%戊二醛固定二周后,用混合醇后处理并保存;C组:将B组心包在混合醇中处理2个月后,转入0.3%戊二醛中保存.D组:用玻片作为对照组.将三种心包切成同样大小(2×2cm2),用生理盐水分别漂洗10 min 3次.然后分别种植同样数目的(4×104)人胚肺成纤维细胞,培养7 d后,将细胞洗下来,0.4%台盼兰染色,计算每片心包上的活细胞数.同时对心包片细胞作光镜及扫描电镜(SEM)观察.结果4个组活细胞计数结果:三组心包片上的活细胞数分别为:A组(戊二醛牛心包):(5.83±2.04)×103;B组(混合醇改性戊二醛牛心包):(16.67±2.04)×103;C组(0.3%戊二醛保存的混合醇改性牛心包):(18.75±1.12)×103.与对照组[(176.25±18.15)×103]相比,三种心包均对细胞增殖有不同程度的抑制.混合醇改性后(B、C组)与未改性戊二醛牛心包(A组)的活细胞数有显著性差异(P＜0.001),而B组与C组无显著性差异(P＞0.05);光镜细胞形态学观察:对照组细胞生长良好,且形态正常,无死亡细胞.细胞计数时见A、B、C三组均有死亡细胞,尤以A组多;扫描电镜观察:A组细胞较少,且多为圆球形细胞,大部分为裸露的胶原纤维;B、C组均有较多的细胞覆盖生长,细胞展开,可见细胞分裂相.结论经混合醇处理后的戊二醛牛心包细胞毒性明显降低,但仍有细胞毒性;混合醇改性后的戊二醛牛心包保存在0.3%戊二醛溶液中,其细胞毒性无明显改变.
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经混合醇改性后的戊二醛鞣制的牛心包免疫原性测定
目的本实验采用免疫细胞化学方法-Biotin-Streptavidin-P eroxidase(S.P法 ),在体外,对戊二醛鞣制和混合醇改性后的牛心包进行免疫原性检测.方法取新鲜牛心包 制备抗牛心包抗体,采用S.P法在体外进行免疫原性检测.结果新鲜牛心包表现为强抗原性 ,戊二醛组和混合醇改性组的牛心包,抗原性显著降低,与对照组明显差异.结论⑴戊 二醛鞣制的牛心包经混合醇改性处理后,免疫原性显著降低.⑵S.P法做为一种体外免疫检测方法,具有临床实用价值.
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混合醇对戊二醛鞣制的牛心包防钙化改性的实验研究
目的本实验首次应用混合醇(即1、2-丙二醇,1、3-丙二醇,2、3-丁二醇),对戊二醛处理后的牛心包进行化学改性,防止钙化.方法将戊二醛处理后的牛心包用混合醇进行化学改性,植入离乳的SD大鼠背部皮下,60d后直接做组织钙定量检测、光镜检测、超微结构观察、测定热皱缩温度及组织湿度.结果混合醇改性后的牛心包试片平均钙含量为(1.817±0.91)μg/mg干重,与对照组GA试片的平均钙含量(176.32±43.27)μg/mg干重相比,钙化明显减轻(P＜0.01).光镜下显示混合醇改性试片较少炎性细胞浸润,胶原纤维结构保持良好;GA试片,则有大片状钙盐沉积及较多炎性细胞浸润,胶原纤维结构破坏严重.混合醇防钙化改性25℃作用时,抗钙化效果明显好于4℃作用温度(平均钙含量分别为(1.817±0.91)及(108.85±56.99)μg/mg干重,(P＜0.05).三组的热皱缩温度、组织湿度无显著性差异(P＞0.05).结论⑴戊二醛鞣制的牛心包经混合醇改性后,可显著减轻钙化.⑵混合醇抗钙化改性的效果与鞣制温度密切相关,在25℃条件下抗钙化效果优于4℃作用温度.
