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  • 肝脏特异性F抗原的提纯与鉴定

    作者:张琦;李焕斌;王玲;徐云弟;谢克俭

    目的:建立一种新的分离纯化人肝脏特异性F抗原(肝脏F蛋白)的方法,为临床检测肝脏特异性F抗原提供物质基础.方法:在0.25 mol/L蔗糖中,人肝组织匀浆以105000 g离心后,上清液用Sepharose 6-B和DEAE-ED52两步柱层析分离,后经等电聚焦,得到纯化的F抗原.用纯化的F抗原免疫兔子获相应的多克隆抗体.结果:纯化的肝脏F抗原经SDS-PAGE电泳鉴定呈单一区带,分子量约44000 Da,PI在6.5-6.7之间,密度为1.26,是一种蛋白质抗原,不含有可探测到的碳水化合物和脂类.结论:经两步柱层析及等电聚焦可获得纯化的F抗原,并保留了免疫特性,可供进一步研究其临床价值.

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