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靶向MagT1的siRNA对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 研究小干扰RNA(siRNA)沉默镁离子转运蛋白1(MagT1)的表达对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖和凋亡的影响.方法 将MCF-7细胞分为MagT1 siRNA实验组(A组)、siRNA阴性对照组(B组)和空白细胞对照组(C组).采用RT-PCR和Western blot法分别检测MagT1 mRNA和蛋白表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡和半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)表达情况.结果 与B组和C组相比,A组MagT1 mRNA和蛋白表达降低,Caspase-9表达增加,细胞增殖率降低,细胞凋亡率增加(P＜0.05).结论 沉默MagT1表达能抑制乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡;线粒体信号转导途径参与了细胞凋亡过程.
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沉默MagT1影响大鼠心肌细胞内Mg2+水平和细胞凋亡的研究
目的 使用siRNA沉默大鼠心肌细胞的镁离子转运蛋白1(MagT1),检测细胞内Mg2+浓度变化和细胞凋亡情况.方法 设计并合成MagT1 siRNA序列,转入原代培养大鼠心肌细胞沉默MagT1,使用反转录PCR和Western blot检测MagT1mRNA和蛋白表达情况,荧光显微镜检测细胞内Mg2+浓度变化情况,流式细胞法检测细胞凋亡情况.结果 相比阴性siRNA组,MagT1 siRNA转染大鼠心肌细胞48 h,MagT1 mRNA的沉默效率为51.83％ (P＜0.05),MagT1蛋白的沉默效率为56.75％(P＜0.05),胞内Mg2+浓度降低29.13％ (P＜0.05),细胞凋亡率为31.18％ (P＜0.01);转染60 h,MagT1 mRNA的沉默效率为86.91％ (P＜0.01),MagT1蛋白质的沉默效率为83.85％ (P＜0.01),细胞内Mg2+浓度降低41.32％ (P＜0.01),细胞凋亡率为40.61％ (P＜0.01).结论 MagT1被显著沉默后,细胞内Mg2+浓度显著降低,细胞凋亡显著提高,细胞生命活动受到较大影响.
