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  • 人白介素21 Trx融合表达、纯化、复性以及活性检测

    作者:张弢;浦迪;陈卫;王旻

    全合成人IL-21基因,将IL-21编码区使用XhoI和NcoI位点插入pET32a构建原核表达载体,IPTG诱导表达,经DEAE-Sepherose FF柱和HisTrap FF柱纯化,SDS-PAGE和Western印迹检测融合蛋白的表达,MTT法检测Trx-hIL-21对Jurkat细胞的作用.获得了人IL-21的基因序列,SDS-PAGE检测可见33 ku大小的融合蛋白表达,Western印迹表明其可以与抗IL-21单抗反应.Trx-hIL-21以剂量依赖的方式作用于Jurkat细胞的生长,当PHA浓度小于2μg/ml时,IL-21能刺激细胞增殖;当PHA浓度大于2μg/ml时,IL-21能抑制细胞增殖.

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