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SNF1基因文献资料
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敲除SNF1基因提高酿酒酵母乙醇生物合成的研究
SNF1基因编码的Snf1p对起始受葡萄糖阻遏基因的转录是必需的.通过重叠延伸PCR和两步PCR法合成了两端各带有352 bp和345 bp与SNF1序列上下游同源的基因敲除组件.将该敲除组件转化至酿酒酵母YS2,获得被loxP-kan-loxP序列组件替换而产生kanr的阳性克隆子.然后将质粒pSH65转入阳性克隆子并诱导表达Cre酶切除kan基因.进而通过传代丢失质粒pSH65后得到SNF1单倍体缺陷型菌株.重复转化敲除组件实现另一条等位基因的敲除,得到SNF1双倍体缺陷型菌株YS2-△smf1::loxlp-kan-loxp.厌氧发酵试验表明该突变株的乙醇产量较出发菌株YS2提高了8.74%.残糖量试验表明在培养基中葡萄糖消耗殆尽后,突变株相对于出发菌株而言并没有利用乙醇作为碳源,乙醇产量保持稳定未有下降.敲除SNF1基因是提高酿酒酵母生物合成乙醇的一条有效途径.
