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脑血管畸形血管自动调节功能异常的分子机制探讨
目的探讨脑血管畸形(AVMs)血管自动调节功能异常的分子机制.方法14例AVMs及周边脑组织行显微外科手术切除,标本提取总RNA,应用RT-PCR检测脑AVMs中ppET-1和ETA表达变化,并与8例正常脑血管标本进行比较.结果在脑血管畸形血管中,发现ppET-1mRNA和ETA mRNA表达较正常脑血管下降.结论脑AVMs中ppET-1 mRNA表达的下降可能会导致AVMs中ET-1的下降,而脑AVMs中ET-1下降很可能是畸形血管自动调节功能异常的主要原因之一;ETA mRNA表达较正常脑血管下降,可能阻止外源性ET-1,并加强脑AVMs中ET-1的抑制作用,导致脑AVMs血管自动调节功能异常.
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基于PCR技术的绿脓杆菌快速检测方法研究
目的:应用PCR技术来实现绿脓杆菌的快速鉴定.方法:绿脓杆菌特异性的PCR扩增引物是根据已报道的ETA基因序列设计的,同时考察该PCR方法的特异性和敏感性.另外,一种不提取基因组DNA而直接制备简易模板的直接PCR方法在本研究中也被尝试.结果:PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析,仅在包含绿脓杆菌基因组DNA的样品中得到单一条带.直接PCR方法也成功扩增出同样的条带,而整个过程在 4 h 内完成.结论:这种扩增绿脓杆菌ETA基因的直接PCR方法对绿脓杆菌的鉴定来说是一种快速、特异、敏感和相对简单的方法.
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内皮素-1诱导大鼠血管平滑肌细胞产生C-反应蛋白的作用
目的 观察内皮素1(ET-1)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)产生C-反应蛋白(CRP)的作用及其机制.方法 培养大鼠VSMCs,以不同浓度ET-1刺激VSMCs,并用ETA拮抗剂BQ123、抗氧化剂PDTC、p38MAPK抑制剂SB203580及ETB阻断剂BQ788进行干预,免疫细胞化学法及半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别测定不同浓度及不同干预因素下VSMCs中CRP蛋白及mRNA的表达.结果 ET-1能刺激VSMCs CRP蛋白及mRNA的表达增强,其效应呈浓度依赖性;BQ123、PDTC及SB203580能明显减少ET-1诱导的大鼠VSMCs CRP蛋白及mRNA的表达,而BQ788对此作用无明显影响.结论 ET-1通过ETA、活性氧(ROS)、p38MAPK诱导大鼠VSMCs产生CRP.