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KLF4对肿瘤干细胞自我更新和增殖潜能的影响
目的:分析Krüppel样因子4(Krüppel-like factor4,KLF4)对肿瘤干细胞T3A-A3自我更新和增殖能力的影响.方法:构建靶向干扰KLF4的慢病毒载体pLVTHM-shKLF4,利用前期实验分离与鉴定的肿瘤干细胞T3A-A3,应用RT-PCR和Western blotting分别检测pLVTHM-shKLF4感染后T3A-A3细胞中KLF4 mRNA和蛋白的表达.细胞球形成实验检测pLVTHM-shKLF4感染对T3A-A3细胞自我更新的影响,平板集落形成实验检测T3A-A3细胞的克隆形成能力,流式细胞术检测T3A-A3细胞周期变化.裸鼠皮下移植瘤实验观察pLVTHM -shKLF4干扰KLF4表达后对T3A-A3细胞移植瘤生长的影响.结果:与肝癌细胞BEL-7402、HepG2相比,肿瘤干细胞T3A-A3表达更高水平的KLF4；pLVTHM-shKLF4感染能够在mRNA和蛋白水平下调T3A-A3细胞中KLF4的表达.pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞形成细胞球的直径明显小于对照病毒的pLVTHM-shNC感染的T3A-A3细胞[(104.33±16.28) vs (186.67±28.15) μm,P＜0.01],pLVTHM-shKLF4感染细胞形成的细胞克隆数日明显少于对照细胞[(83.5±7.78)vs(125±9.19)个,P＜0.01),pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞G1期比例明显升高[ (39.65±4.03)％ vs (29.35±1.00)％,P＜0.01].pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞的移植瘤生长速度较对照细胞移植瘤明显减慢[细胞接种33 d,(46.14±12.94) vs (228.12±94.86) mm3,P＜0.01].结论:干扰KLF4的表达可抑制肿瘤干细胞T3A-A3的自我更新及其在体内外的增殖潜能.
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Wnt/β-catenin通路与KLF4在胃肠道肿瘤中的作用及其机制
β-catenin作为Wnt通路的核心蛋白,调节Wnt相关基因的表达并参与细胞增殖的调控和转录,介导同型细胞间的黏附从而抑制肿瘤的浸润和转移.β-catenin基因突变或功能异常可导致其功能激活和在核内聚积,调节肿瘤发生发展、弥散甚至转移.转录因子KLF4主要在分化期的胃肠道上皮等细胞内高表达,主要生理功能为调节细胞增殖与分化.KLF4在多种胃肠道肿瘤中表达降低,且敲除胃肠道上皮KLF4后,胃肠道上皮呈增殖及分化改变,这表明KLF4是维持胃肠道上皮稳态的关键因素之一.笔者对β-catemn与KLF4相互作用对胃肠道肿瘤生物行为影响的研究进行综述.
