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腺病毒介导的白介素10基因转导对鼠胰岛β细胞的保护作用
目的 观察腺病毒介导的白介素10(IL-10)基因转导对体外及体内胰岛β细胞的保护作用.方法 用携带有IL-10基因的重组腺病毒载体感染RINm5F细胞、昆明小鼠及链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠,ELISA检测IL-10基因表达、胰岛素水平,病理切片及免疫组化观察胰岛炎积分.结果 RINm5F细胞中检测到IL-10 基因及蛋白的有效表达,含IL-10的重组腺病毒(Ad-IL-10)可抑制STZ致细胞凋亡作用.昆明小鼠腹腔注射Ad-IL-10后,再经STZ诱发为1型糖尿病,Ad IL 10组胰岛炎积分明显降低.经STZ诱导的早期1型糖尿病小鼠,Ad-IL-10组与其他组相比平均血糖水平差别无统计学意义,小鼠胰岛炎症浸润程度与糖尿病对照组差别无统计学意义.结论 腺病毒介导的IL-10可在胰岛RINm5F细胞有效表达,并且具有抗凋亡的能力.IL-10基因能够保护胰岛β细胞功能,促进胰岛素分泌,减少小鼠的胰岛炎和糖尿病的发生.IL-10基因对于已发生1型糖尿病早期的昆明小鼠无显著的治疗作用.
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T细胞对胰岛细胞凋亡及相关基因表达的影响
目的:观察T细胞对大鼠胰岛瘤细胞系RINm5f凋亡及凋亡相关基因表达的影响.方法:应用PI法检测T细胞与RINm5f共培养后RINm5f细胞的凋亡率;应用半定量RT-PCR技术检测培养后bcl-2、bax、p53和fas mRNA的表达.结果:PHA与T细胞均可致胰岛细胞的凋亡,且P、T具有协同效应,P或T或两者联合应用均呈时间依赖性地促进RINm5f细胞的凋亡;胰岛细胞凋亡过程中,P、T可协同致诱导凋亡基因bax、fas mRNA表达水平明显升高,而抗凋亡基因bcl-2及p53mRNA表达水平有下降趋势,但统计学无显著性差异.结论:T细胞可通过诱导胰岛细胞凋亡导致或加重胰岛移植排斥反应,其机制可能与凋亡基因与抗凋亡基因的表达比率变化有关,其中fas、bax诱导凋亡基因可能起主要作用.
