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C57BL/6鼠文献资料
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pBiG-CAR真核表达载体的构建及鉴定
目的 构建及鉴定pBiG-CAR真核表达载体.方法 提取C57BL/6胎鼠总RNA,逆转录合成cDNA,经PCR扩增获得CAR基因,与双酶切的pBlue质粒连接,经转化、蓝白筛选及测序鉴定pBlue-CAR载体构建成功.扩增pBlue-CAR的CAR基因,经双酶切后与pBiG质粒连接,构建pBiG-CAR真核表达载体.结果 经琼脂糖凝胶电泳,获得目的基因CAR条带,pBlue-CAR目标条带及pBiG-CAR目标条带.基因测序证实所检测重组质粒序列与pBiG-CAR序列完全一致.结论 克隆C57BL/6鼠CAR基因、pBlue-CAR重组质粒的构建获得成功,并初步证实pBiG-CAR真核表达载体的构建获得成功,为进一步构建可控心肌特异性CAR过表达转基因鼠提供基础.
关键词： 柯萨奇病毒-腺病毒受体 C57BL/6鼠 pBiG质粒 载体构建 -
钙结合蛋白在C57BL/6小鼠内耳细胞发育过程中的表达特点
目的 探讨在小鼠内耳发育过程中,钙结合蛋白(CB)在内耳耳蜗内的表达是否存在时限性.方法 获取C57BL/6小鼠E8开始至出生后一直到成年的内耳标本:E8,E9,E10,E12,E14,E15-E21,D1-D21,成年,进行冷冻切片,进行CB的荧光免疫组织化学染色并观察其在内耳表达的变化情况.结果 在C57BL/6小鼠,除了在E16可辨认出螺旋神经元有CB部分表达外,以后直到成年都没有CB的染色表达,而在Scarpa神经元则从E8开始就有表达,其从 E19开始先在内毛细胞开始有表达,逐渐在内外毛细胞都有表达,直到成年时表达消失.结论 CB在C57BL/6小鼠内耳耳蜗的表达具有时限性,因而可推测出对CB行免疫组织化学染色观察能有效鉴别C57BL/6小鼠及其他动物的再生毛细胞和原有毛细胞,但目前尚无法解释CB一些表达特点的相应机制.
