首页 > 文献资料
-
内质网应激促进肺动脉平滑肌细胞的表型转化
目的:探讨内质网应激(ERS)对肺动脉平滑肌细胞表型转化的影响.方法:采用胶原酶Ⅰ消化法培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),用衣霉素(TM)或4-苯基丁酸(4-PBA)诱导或抑制内ERS,MTS法评价细胞增殖情况,western blot和定量RT-PCR检测蛋白和mRNA表达情况.结果:TM呈浓度依赖性诱导内质网应激标志物GRP78和XBP1 mRNA表达;较低浓度的TM促进PASMCs增殖,高浓度(5μg/mol)使细胞凋亡;TM使PASMCs表达SM22 alpha减少,分泌Ⅰ型胶原增加;4-PBA预处理可逆转TM诱导PASMCs的SM22 alpha减少和Ⅰ型胶原分泌增加.结论:内质网应激促进肺动脉平滑肌细胞表型转化,可能是内质网应激参与肺动脉高压的机制之一.
-
同型半胱氨酸对大鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转化的影响
目的:验证同型半胱氨酸(Hey)是否具有促进大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)去分化的作用.方法:SD大鼠主动脉VSMCs原代细胞培养鉴定,取4～7代细胞用于实验.VSMCs分为对照组、100 μmol/L Hcy干预组、500 μmol/L Hcy干预组、1 000μmol/L Hcy干预组共4组.MTT法测各组VSMCs的增殖情况;划痕法和Transwell法检测各组VSMCs的迁移情况;ICC法检测各组VSMCs的细胞形态;Western blot法检测各组VSMCs中SM-actin、SM-MHC、Calponin、骨桥蛋白(OPN)的表达情况.结果:相比于对照组,Hcy组VSMCs增殖迁移增加;细胞形态变圆;SM-MCH和Calponin表达减少(P＜ 0.01>;OPN表达增加(P＜0.01),Hcy的这一作用与浓度呈正相关.结论:Hcy可以促进VSMCs去分化,这可能是其促进VSMCs增殖和迁移的机制之一.
-
内质网应激与自噬的交互作用对血管钙化的影响
目的 证实内质网应激(ERS)和自噬的交互作用对血管钙化(VC)的影响.方法 维生素D3肌注和尼古丁灌胃制备大鼠在体血管钙化模型,取主动脉行茜素红染色和钙含量检测,Western blot检测相关蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,钙化组大鼠主动脉管壁钙沉积显著增加,血管平滑肌细胞(VSMC)收缩表型标志蛋白SM-22α和Calponin表达显著降低,而成骨细胞样表型标志蛋白骨形态发生蛋白2(BMP-2)和Runt相关转录因子2(RUNX2)表达显著升高,ERS标志蛋白葡萄糖调节蛋白(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)以及自噬标志蛋白轻链3(LC3Ⅱ)和Beclin-1表达显著升高.钙化大鼠应用ERS激动剂衣霉素[10 μg/(kg·d)]可进一步增加血管壁钙沉积及BMP-2和RUNX2表达水平,而SM-22α和Calponin表达进一步减少,GRP78和CHOP以及LC3Ⅱ和Beclin-1表达水平进一步增加.钙化大鼠应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤[10 mg/(kg·d)]可降低LC3Ⅱ和Beclin-1水平,同时GRP78和CHOP表达升高,增加血管壁钙沉积及BMP-2和RUNX2表达水平,降低SM-22α和Calponin表达.结论 内质网应激与自噬的交互作用影响血管钙化的发展.
