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三-(2,3-二溴丙基)异氰脲酸酯诱导肝细胞HepG2凋亡初步研究
目的 研究全氟辛酸的替代产物环境外源性污染物三-(2,3-二溴丙基)异氰脲酸酯(TBC)对人肝细胞株HepG2的细胞毒性和诱导凋亡作用.方法 采用MTT法、形态学观察、流式细胞仪检测其对HepG2的细胞毒性作用和凋亡情况.结果 TBC可溶解的范围内无IC50值,大抑制率可达19.93％;倒置显微镜形态学显示,TBC导致HepG2细胞体收缩,细胞变圆变小;Hoechst 33258荧光染色形态学显示,TBC导致HepG2细胞核出现染色质凝集同时生产凋亡小体;流式细胞仪PI单染检测结果显示,TBC可诱导肝细胞HepG2凋亡.结论 首次采用体外实验的方法对环境外源性污染物TBC的肝细胞毒性进行研究,通过观察其剂量效应及时间效应关系,确定TBC的染毒剂量及染毒时间,确定了TBC诱导肝细胞凋亡,为进一步探讨其诱导肝细胞凋亡的信号途径提供理论基础.
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高效液相色谱-电化学发光检测法测定磷酸丙吡胺片中丙吡胺的含量
目的:建立一种使用三-(2,2'-联吡啶)钌(Ⅱ)化学发光试剂,高效液相色谱-电化学发光检测(ECLD)测定磷酸丙吡胺片中丙吡胺含量的方法.方法:以Chemoo Pak(R)-Spherisorb ODS-5为固定相(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温:室温,流动相为100 mmol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 6.0)-乙腈(50:50),流速:1.0 mL·min-1,电化学发光检测器(ECLD)的电压为600mV,电解电流为80μA,Ru(bpy)3Cl2的浓度为0.3 mmoL·L-1,流速:0.3 mL·min-1.结果:丙吡胺的浓度在0.198～4.96μg·mL-1范围内与其峰面积呈良好的线性关系,回归方程:Y=4.143×105X-1.673×104,r=0.9997.平均回收率(n=9)为99.63%,低检出浓度为10 ng·mL-1(S/N=3).结论:本方法简便、快速,灵敏度高,能满足片剂测定要求.
