首页 > 文献资料
-
WAVE生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗
目的 采用WAVE生物反应器培养Vero细胞制备乙型脑炎病毒灭活疫苗.方法 利用2 L WAVE生物反应器和微载体经半连续方式培养Vero细胞,每24 h取样,观察细胞生长情况,实时监测葡萄糖浓度.待细胞长至单层时,以0.03～0.5 MOI接种乙型脑炎病毒.待细胞病变率达25％时,开始收获病毒液,病毒收获液经纯化后,制备乙型脑炎灭活疫苗,按《中国药典》三部(2010版)要求检测各项指标.结果 Vero细胞培养至6d在微载体上长成致密单层,接种病毒后2d,细胞病变率达25％,开始收获病毒液,收获量为1 L/d,可连续收获5～7d,总计5～7L病毒原液；病毒培养至第4天滴度达峰值,为8.54 LgLD50/ml；制备的乙型脑炎灭活疫苗各项指标均达到《中国药典》三部(2010版)要求.结论 初步建立了WAVE生物反应器培养Vero细胞制备乙型脑炎灭活疫苗的方法.
-
WAVE生物反应器应用于CIK细胞培养
目的:探讨利用波浪(WAVE)生物反应器培养扩增肿瘤患者CIK细胞的效能及其对肿瘤细胞的杀伤活性.方法:分离8例肿瘤患者外周血单个核细胞,分别采用CIK细胞传统扩增技术(CIK组)和WAVE反应器培养方案(WAVE组),应用锥虫蓝染色并进行细胞计数,利用流式细胞术比较两组CIK细胞的扩增效率、活化情况及其亚群的组成变化,并以K562细胞为靶细胞检测扩增后CIK细胞的杀伤活性.结果:WAVE组细胞增殖数较CIK组明显提高(P＜0.05或P＜0.01);在第14天,WAVE组CD3+ CD8+、CD3+ CD56+细胞亚群比例明显高于CIK组[(78.56±2.99)％vs(74.54±3.02)％,(48.33±7.01)％ vs(40.69±6.43)％,均P＜0.05],而Treg细胞比例显著降低(P＜0.05);当效靶比为10∶1、20∶1时WAVE组扩增的CIK细胞对K562的杀伤率明显高于CIK组(P＜0.05或P＜0.01),CIK细胞中CD3+ CD8+ CD107a+的比例明显升高[(29.43±4.97)％ vs(25.19±4.91)％,P＜0.05].结论:WAVE生物反应器扩增培养体系获得的CIK细胞数量多、纯度高,其中CD3+ CD8+和CD3+ CD56+ NKT细胞比例较高,其对K562肿瘤细胞的杀伤效果明显高于传统培养技术获得的CIK细胞.
关键词： WAVE生物反应器 细胞因子诱导的杀伤细胞 细胞培养 体外扩增
