首页 > 文献资料
-
杨树菇中一种脱氧核糖核酸酶的纯化及其性质
目的 分离纯化杨树菇子实体中脱氧核糖核酸酶,并对其性质进行分析.方法 通过80%饱和(NH4)2SO4沉淀、Blue Sepharose 6 Fast Flow、DEAE-Sepharose Fast Flow和SP-Sepharose Fast Flow层析方法 ,从杨树菇子实体中分离纯化一种脱氧核糖核酸酶.SDS-PAGE和活性SDS-PAGE测定相对分子质量,采用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法分析其酶学性质,并检测pH、温度、Mg2+和EDTA浓度对酶活性的影响.结果 经纯化得到了一种脱氧核糖核酸酶,其相对分子质量为31 000.该酶对超螺旋质粒DNA、λDNA、ssDNA和dsDNA均具有降解活性,对dsDNA的降解活性略高于ssDNA,且酶活性依赖于二价金属阳离子.该酶的适pH值范围为7.5~9.6,50℃时相对酶活性高.结论从杨树菇子实体中纯化的脱氧核糖核酸酶属于一种非限制性脱氧核糖核酸内切酶.
-
药用真菌杨树菇肽脯氨酰顺反异构酶基因及抗肿瘤活性初步鉴定
目的:鉴定克隆杨树菇抗肿瘤相关蛋白基因活性.方法:构建cDNA文库,随机测序得到脯氨酰顺反异构酶(Peptidyl -prolyl cis/trans isomerase,PPIase)基因,并对其进行生物信息学分析,通过检测其在HeLa细胞中表达引起的细胞凋亡及衰老的变化,初步鉴定其抗肿瘤活性.结果:得到杨树菇PPIase cDNA序列,其氨基酸序列在真菌中十分保守.PPIase基因在真核细胞中表达没有引起肿瘤细胞的凋亡和衰老.结论:杨树菇PPIase序列具有PPIase保守序列模式,是PPIase家族的成员.