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巢式PCR结合微孔板杂交技术鉴定脆弱拟杆菌
为快速、准确的鉴定脆弱拟杆茵,我们建立巢式PCR结合微孔板杂交技术的方法,鉴定此菌仅用2~3d,为病人的及时治疗争取了时间.
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乙型肝炎病毒基因检测必须重视的几个问题
根据我们的研究积累和临床实践,对乙型肝炎病毒基因检测技术方面存在的几个问题提出一些个人看法,希望引起重视。一、要合理选择基因检测方法 常用的基因检测方法是杂交法和多聚酶链反应(PCR)法,两种方法各有优势,但各又有不尽人意之处。比较肯定的是:杂交法的特异性优于PCR法,PCR法的敏感度胜过杂交法。 膜斑点杂交技术正逐步被微孔板杂交技术取代。微孔板杂交技术(如bDNA)不仅操作简便,而且由于采用了信号放大探针,提高了灵敏度;更由于检测系统中的夹心探针系化学合成的寡核苷酸,特异性进一步提高。由于成本过高,目前国内主要将bDNA技术用于HBV、HCV基因的定量分析。PCR技术不仅是一种研究手段,更是一类多功能的检验技术。在用于临床实验室诊断方面,PCR有其独特的优势。相对而言,近几年来基因定量PCR发展速度更快,其中竞争PCR和荧光PCR似成为当前的焦点话题。
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聚合酶链反应-微孔板杂交技术用于乙型肝炎病毒DNA的检测
在国内外,聚合酶链反应(PCR)技术已被公认为检测各种病原体的佳手段[1].斑点杂交,South em杂交法可以提高PCR的灵敏度和特异性,但是,这些方法复杂,不适合用于大量标本的检测和临床应用.因此,我们采用PCR-微孔板杂交法检测乙型肝炎病毒DNA,取得了满意效果,现报道如下.