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miR-212抑制骨肉瘤细胞恶性生物学行为的实验研究
目的 探讨miR-212对骨肉瘤细胞增殖和迁移的抑制机制.方法 MIRDB预测miR-212与锌指蛋白133(ZNF133)的结合位点后,利用荧光素酶报告基因实验检测miR-212对ZNF133的靶向作用.通过MTT实验和Transwell实验检测miR-212过表达或受到抑制后对MG63细胞增殖和迁移的影响.通过Western blotting实验检测miR-212对ZNF133及CDK4/6和MMP2的作用.结果 MIRDB预测发现miR-212与ZNF133的3'UTR区域具有结合位点,荧光素酶报告基因实验证明了miR-212可以直接作用于ZNF133.MTT实验表明转染miR-212后显著抑制MG63细胞增殖;miR-212受到抑制后促进MG63细胞增殖.Transwell实验发现miR-212可以抑制骨肉瘤细胞系MG63迁移.Western blotting实验证明miR-212对MG63细胞增殖迁移能力的抑制在一定程度上是通过miR-212对ZNF133及CDK4/6和MMP2的抑制实现的.结论 miR-212可以通过抑制ZNF133及相关蛋白抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移.
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SLE患者外周血单个核细胞中miR-132和miR-212的表达及临床意义
目的 分析SLE患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA (miR)-132和miR-212的表达水平及临床意义.方法 提取PBMC中的总RNA,运用茎环逆转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测24例健康人及48例SLE患者PBMC中miR-132和miR-212的相对表达水平,分析其与临床检验指标的相关性.结果 SLE患者中miR-132相对表达量为1.72±0.071,与健康人对照组0.99±0.037比较,差异有统计学意义(t=-6.881,P=0.000).健康人和SLE患者miR-212相对表达水平分别是0.99±0.020和1.03 (0.982,1.048),差异未见统计学意义(Z=1.302,P=0.197).相关性分析结果显示,SLE患者中miR-132的表达量与抗双链DNA(dsDNA)抗体以及SLE患者疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关(r分别为0.740和0.526,P均＜0.05);而miR-212的表达量与抗dsDNA抗体(r=0.106,P=0.474)和SLEDAI(r=0.005,P=0.973)等临床指标无相关性.结论 miR-132在SLE患者PBMC中的表达水平升高,可能参与SLE的致病过程.
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microRNA-212在胃癌中的表达及临床意义
[目的]比较microRNA-212(miR-212)在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达情况,并探讨其与临床病理特征之间的关系.[方法]应用茎环RT-qPCR方法检测22例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织标本中miR-212的表达.[结果] miR-212在胃癌及正常胃黏膜组织中的相对表达量分别为1.439和1.000,两者差异有统计学意义(P＜0.05).而且,胃癌组织中miR-212的表达与肿块位置、分化程度、淋巴结转移以及TNM分期有关(P＜0.05).[结论]miR-212的表达可能在胃癌发生发展过程中发挥重要作用.
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血清miR-132和miR-212表达在肝硬化检测中的意义
目的：研究血清miR-132和miR-212表达在肝硬化检测中的意义。方法随机选择63例不同阶段的肝硬化患者，参照63例健康人血样，同步使用PCR检测法进行肝功能检测和miR-132和miR-212表达检测，对比相应结果。结果肝硬化患者的肝功能检测结果与健康人士有明显差别，肝硬化患者的miR-132和miR-212表达显著降低，与内参照U6比值分别达到了0.43±0.22和0.73±0.48。结论肝硬化患者的miR-132和miR-212表达会出现显著降低。
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鞘内注射miR-212反义锁核酸对骨癌小鼠痛行为的影响
目的 研究骨癌痛发展和维持过程中小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律及连续鞘内注射miR-212反义锁核酸LNA-anti-miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响.方法 本实验分为两个部分:(一)骨癌痛小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律:C3H/HeJ雄性小鼠36只,随机分为假手术组(sham组,n=18)和肿瘤组(T组,n=18).sham组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的α-MEM,T组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射纤维肉瘤细胞NCTC 2472,建立骨癌痛模型.在术前1d,术后4d、7d、10 d、14 d、21 d,sham组和T组各随机取三只小鼠处死,取脊髓腰膨大标本,用Real-time PCR的方法检测脊髓水平miR-212的表达情况.(二)连续鞘内注射LNA-anti-miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响:C3H/HeJ雄性小鼠24只,随机分为四组:L组(鞘内注射LNA-anti-miR-212,n=6)、L’组(鞘内注射LNA'-negative control,n=6)、C组(鞘内注射溶媒无核酸酶水,n=6)和S组(假手术处理,n=6).L组、L’组和C组小鼠在右侧股骨远端注射纤维肉瘤细胞NCTC 2472,S组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的α-MEM.所有小鼠于术前1d、术后4d、7d、10 d、14 d测小鼠痛行为指标,包括自发抬足次数和机械缩足阈值(PWMT),术后14 d,L组、L’组、C组小鼠分别鞘内注射LNA-anti-miR-212 12 pmol/5μl、LNA '-negative control 12 pmol/5μl和无核酸酶水5μl,连续鞘内注射7d,1次/d,每天测小鼠痛行为指标,至术后第21天.结果 miR-212的表达变化表现为:与基础值相比,sham组和T组小鼠在术后第4天,脊髓水平miR-212明显升高(P＜0.05)；与基础值和sham组相比,T组小鼠脊髓水平miR-212在术后7d、10 d、14 d、21 d均明显升高(P＜0.05).连续鞘内注射LNA-anti-miR-212改善骨癌痛小鼠痛行为:术后19 d至21 d,与L’组和C组相比,L组小鼠PWMT[19 d(1.07 ±0.16)g,20 d(1.13±0.21)g,21 d(1.27±0.21)g)]明显升高(P＜0.05),自发抬足次数明显降低[19 d(6.67±1.04),20 d(6.62±1.39),21 d(6.47±1.17)](P＜0.05).与14 d给药前相比,L组小鼠术后19 d至21 d的PWMT明显升高(P＜0.05),自发抬足次数明显降低(P＜0.05).结论 骨癌痛发展过程中,脊髓水平miR-212表达量升高.连续鞘内注射LNA-anti-miR-212可以缓解骨癌小鼠痛行为.
关键词： 骨癌痛 脊髓 miR-212 LNA-anti-miR-212 -
miR －212在上皮性卵巢癌中表达的临床意义
目的：本研究探讨上皮性卵巢癌中 miR －212的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应 Real －time RT －PCR 检测我院46例上皮性卵巢癌组织及癌旁良性组织中miR －212表达，并对临床病理数据进行分析。Transwell 检测转染 miR －212 mimic 对 SKOV3细胞运动、侵袭的影响，Western Blot 检测 E －cadherin 和 Vimentin 蛋白表达。结果：46例上皮性卵巢癌 miR －212相对表达量（0．842±0．223）显著低于癌旁卵巢组织（1．212±0．438）。miR －212在Ⅲ／Ⅳ期中相对表达量为（0．8653±0．4693），明显低于 I ／Ⅱ期（1．0952±0．4152）（P ＜0．05）。在低分化癌组织中相对表达量为（0．8560±0．4376），明显低于中高分化癌组织（1．1319±0．4712）（P ＜0．05）。而且 miR －212在有淋巴结转移组相对表达量为（0．8794±0．4622），明显低于无淋巴结转移组（1．1637±0．4127）（P ＜0．01）。但与患者年龄（P ＝0．430），肿瘤组织学类型（P ＝0．546）无关。miR －212转染组 SKOV3细胞运动、侵袭均低于未转染组，miR －212转染组抑制 SKOV3细胞 Vimentin 表达，但促进 E －cadherin 表达。结论：卵巢癌中 miR －212低表达，miR －212表达缺失可能与卵巢癌的肿瘤生长和侵袭发展相关，在卵巢癌预后判断中可能有一定价值。
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血清miR-132和miR-212检测在肝硬化诊断中的应用价值
目的：探讨血清miR-132和miR-212检测在肝硬化诊断中的应用价值。方法选择2014年5月～2015年5月我院收治的肝硬化患者43例作为观察组，选取同期来本院进行健康体检的健康人43名作为对照组，采用PCR检测法检测两组的肝功能及血清miR-132和miR-212指标，比较结果。结果观察组患者的肝功能检测结果与对照组有明显差异，且其血清miR-132和miR-212表达也明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论血清miR-132和miR-212检测可作为临床诊断肝硬化的有效指标。
