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  • 透明颤菌血红蛋白基因在生黑葡萄糖酸杆菌中的克隆与表达

    作者:陈羽;徐威;刘华松;位星;张世野

    目的 在生黑葡萄糖酸杆菌中克隆并表达透明颤菌血红蛋白基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb).方法 构建重组质粒pUC19-vgb并电转化生黑葡萄糖酸杆菌.采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfonate,SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳和一氧化碳(carbon monoxide,CO)-示差光谱进行血红蛋白表达和生物活性测定.结果 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示有大量与目的蛋白大小相当(约15 ku)的蛋白表达.CO-示差光谱在420 nm处有一吸收峰,显示重组质粒pUC19-vgb成功转化人生黑葡萄糖酸杆菌,并表达具有生物活性的透明颤菌血红蛋白(VitreosciHa Hemoglobin,VHb).结论 成功构建vgb重组质粒,并实现在生黑葡萄糖酸杆菌中表达VHb.

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