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移植修复脑功能损害种子细胞源研究:τ蛋白mRNA在脐血单个核细胞中的表达
背景:脐血单个核细胞可作为种子细胞源以移植修复不同原因所致脑功能损害,但能否表达神经元另一重要特有分子τ蛋白?目的:探讨脐血单个核细胞在培养前后及细胞因子诱导作用下,τ蛋白mRNA的表达.设计:随机对照研究.地点和对象:实验地点:华中科技大学同济医学院.采集健康新生儿脐血8份,每份80mL.干预:在细胞培养过程中,使用细胞因子:表皮生长因子(epidermal growthfactor,EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF).主要观察指标:①细胞形态.②τ蛋白mRNA在脐血单个核细胞中的表达.结果:培养前,脐血单个核细胞胞体小呈圆形,培养后EGF+bFGF组细胞胞体较大,有粗长突起形成,未加细胞因子所培养细胞胞体较小,突?换起较短、较细,形似星形细胞.反转录聚合酶链式反应(reverse-transcriptpolymerase chain reaction,RT-PCR)检测未培养的脐血单个核细胞τ蛋白mRNA呈阴性而MAP2mRNA表达阳性,培养后二者均表达阳性,在EGF+bFGF作用下,阳性表达更明显.结论:脐血单个核细胞表达MAP2 mRNA,经培养后同时表达T蛋白mRNA,细胞因子能增强这种作用.
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阿尔茨海默病的体液生物标志物
目前阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是痴呆的常见原因,全球AD患者大约有340万.估计40年后AD患病率会增加3倍.然而,AD的诊断长期以来都是依靠临床表现,而且作出诊断的前提是患者必须符合痴呆的标准[1].这在很大程度上限制了AD的早期诊断.事实上,AD患者的认知功能经历了从正常(临床前期)到轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment,MCI),终进展至痴呆的缓慢过程.有研究表明,AD的病理学过程在患者出现症状前数年就已经开始出现.对AD进行干预的好时机可能是疾病早期甚至临床前期.近年来,治疗AD的临床药物试验均以失败告终.失败的原因是多方面的,而将中晚期而非早期AD患者作为研究对象可能是其原因之一.所以,在疾病早期能够用于诊断的生物标志物显得十分重要.除此之外,还希望生物标志物在疾病的预测、监测及治疗反应方面也能提供重要的信息.
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急性吗啡暴露对大鼠前额叶皮质τ蛋白磷酸化及学习记忆的影响
目的 探讨急性吗啡暴露对大鼠前额叶皮质τ蛋白磷酸化及学习记忆的影响.方法 40只雄性SD大鼠随机均分成急性吗啡暴露组(M组)和对照组(C组).M组单次腹腔注射吗啡(30 mg/kg),C组同法注射等量生理盐水.注射后2 h和24 h分别断头处死10只大鼠.免疫印迹技术检测前额叶皮质r蛋白的磷酸化水平.后处死的大鼠于注射后2、4及24 h分别行水迷宫实验.结果 M组注射后2 h时平台寻找时间显著长于C组(P<0.01).M组大鼠前额叶皮质τ蛋白Ser396和Thr231位点的磷酸化水平于注射后2 h时显著高于C组(P<0.05).结论 急性吗啡暴露可致大鼠学习记忆功能可逆性减退,前额叶皮质r蛋白过度磷酸化可能与其有关.
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血清τ蛋白水平与颅脑损伤患者预后的关系
目的 探讨颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)患者血清中τ蛋白的变化及其临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测80名健康人(对照组)和136例TBI患者(观察组)损伤后ld、3d、5d、7d的血清τ蛋白和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平,分析其与格拉斯哥昏迷评分(GCS)及格拉斯哥预后评分(GOS)的关系.结果 观察组各时间点血清τ蛋白和GFAP水平均明显高于对照组,差异具有统计学意义(t=2.65 ～ 5.14,均P＜0.05);观察组内重型亚组各时间点血清τ蛋白水平均明显高于中型亚组和轻型亚组,差异均有统计学意义(t=1.74～4.21,均P＜0.05);中型亚组各时间点血清τ蛋白水平均明显高于轻型亚组,差异均有统计学意义(t=2.46～4.04,均P＜0.05);TBI后1天的血清τ蛋白水平与1天、3天GCS和6个月GOS呈负相关(r=-0.31、-0.88、-0.79,均P＜0.05).结论 血清τ蛋白检测可作为判断TBI早期病情的指标之一.
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体外培养的人脐血单个核细胞MAP2及τ蛋白mRNA的表达
目的:探讨脐血单个核细胞(MNCs)体外培养前后微管相关蛋白2(MAP2)和τ蛋白mRNA的表达.方法:用密度梯度离心法分离脐血MNCs,分组培养.对照组不加任何细胞因子,细胞因子组加入EGF和bFGF,终浓度均为20μg/L,每3 d半量换液1次,共14 d.倒置显微镜下观察培养过程中细胞形态的变化,RT-PCR法检测脐血MNCs培养前后τ蛋白及MAP2 mRNA的表达.结果:培养前,脐血MNCs胞体小呈圆形.培养后细胞因子组细胞胞体较大,有粗长突起形成,类似神经元;对照组细胞胞体较小,突起较短、较细,形似星形细胞.培养前脐血MNCsτ蛋白mRNA阴性表达,而MAP2 mRNA表达阳性;培养后2者均表达阳性,且细胞因子组2者阳性表达强于对照组(P＜0.05).结论:脐血MNCs表达MAP2 mRNA,经培养后同时表达τ蛋白mRNA,细胞因子能增强2者的表达.
