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猫爪草皂苷对结肠癌LoVo细胞凋亡和线粒体电位的影响
目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus temate saponins,RRTS)对人结肠癌LoVo细胞的增殖和凋亡作用及作用机制.方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500μg·mL-14个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显微镜现察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖的抑制情况;流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和凋亡率.结果:与对照组比较,猫爪草皂苷处理组可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,猫爪草皂苷处理组随着浓度的增加和作用时间延长,对LoVo细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.001);随着浓度的增加凋亡率增加,药物组与对照组比较差异有显著性(P<0.001);流式细胞仪细胞周期分析图可看出细胞阻滞在C1期,随着给药浓度的增加,细胞凋亡峰(AP峰)越来越明显(图1);激光共聚焦扫描技术观察显示,细胞经皂苷作用4h、8h、12h后,线粒体膜电位下降(P<0.05).结论:猫爪草皂苷可导致人结肠癌LoVo细胞线粒体膜电位下降,具有明显抑制增殖和诱导凋亡作用.
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猫爪草皂苷对结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡影响的研究
目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus ternate saponins,RRTS)对人结肠癌kIVo细胞增殖和凋亡的作用及其机制.方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500μg/mL4个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖的抑制情况;荧光染色观察细胞凋亡;流式细胞仪(FCM)进行细胞周期分析;采用细胞免疫化学检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的变化.结果:与对照组比较,猫爪草皂苷可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,猫爪草皂苷处理组随着浓度的增加和作用时间延长,Lovo细胞增殖的抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.001);荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,对照组和4个猫爪草皂苷不同浓度处理组凋亡率分别为(3.57±1.56)%、(8.14±1.02)%、(11.11±2.30)%、(17.59±0.95)%和(25.10±1.23)%;流式细胞术显示.G1期细胞增加,而停滞在s、G2期细胞减少;细胞免疫化学检测发现,经猫爪草皂苷作用24h后,LoVo细胞Bax蛋白水平明显增高,而Bcl-2出现抑制,Bcl一2/Bax比例下降,Caspase-3蛋白水平明显升高,且呈明显的浓度依赖性.结论:猫爪草皂苷具有明显抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡作用,下调Bcl-2、Bcl-2/Bax,增加Bax、Caspase-3蛋白的表达可能是其作用机制之一.
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猫爪草皂苷对结肠癌LoVo细胞凋亡和细胞内Ca2+浓度的影响
目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus tenate saponins,RRTS)对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的调控作用及其机制.方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500 μg·ml-14个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖的抑制情况;流式细胞仪(FCM)进行细胞周期分析并计算凋亡率;激光共聚焦(LCSM)测定皂苷对LoVo胞内Ca2+浓度的影响.结果:与对照组比较,猫爪草皂苷处理组可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;对LoVo细胞的增殖抑制作用增强,随着浓度的增加凋亡率增加,可看出细胞阻滞在G1期,随着给药浓度的增加,细胞凋亡峰(AP峰)越来越明显.作用于LoVo细胞4 h后,胞内Ca2+明显上升,4 h.8 h时略有下降,但仍维持在较高水平(P<0.001).结论:猫爪草皂苷具有明显抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡作用,引起凋亡的途径可能与Ca2+的增加有关.
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mfn2基因在猫爪草皂苷、红三叶异黄酮治疗乳腺癌中的作用机制研究
目的:研究mfn2基因在猫爪草皂苷、红三叶异黄酮抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖及诱导其凋亡中的作用.方法:采用不同浓度的猫爪草皂苷和红三叶异黄酮分别处理MCF-7细胞24,48及72 h,进行体外细胞培养,用实时荧光定量PCR法检测mfn2基因的相对表达情况.结果:高浓度的猫爪草皂苷(100 mg·L-1)作用MCF-7细胞48 h后,明显促进mfn2基因的表达,并且随时间延长更加明显；红三叶异黄酮在作用MCF-7细胞48,72 h后,显著抑制mfn2基因的表达.结论:高浓度的猫爪草皂苷可能是通过促进mfn2基因的表达,来抑制MCF-7细胞增殖及诱导其凋亡,红三叶异黄酮的作用机制有待于进一步研究.
