首页 > 文献资料
-
神经突起因子酵母双杂交诱饵质粒构建和转化
目的构建和转化神经突起因子(Neuritin)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究Neuritin的功能及作用机制奠定基础.方法用PCR扩增neuritin全长cDNA中编码开放读框的基因片段;将该基因片段与pLex-A载体定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;将核苷酸序列正确的重组质粒转化入EGY48[p8op-LacZ]酵母菌株.结果成功构建pLexA-neuritin重组质粒.转化有重组质粒和pLexA空载体的2种EGY48[p8op-LacZ]酵母都能在SD/Gal/Raf/-His/-Ura培养基中长成白色菌落,同时,转化pLexA-pos阳性对照质粒的酵母菌在相同条件下长成蓝色菌落,但都不能在SD/-His/-Leu/-Ura培养基中生长,在SD/-His/-Ura液中培养16 h后,A600均值均为0.9.表明重质粒表达的融合蛋白没有激活LEU2和lacZ酵母报告基因表达的活性,也没有酵母毒性作用.结论构建的诱饵重组质粒可以用于下一阶段的人胎脑cDNA文库筛选.
-
Neuritin的研究进展
Neuritin是神经营养因子家族中的一个新成员,其基因cpgl5 (candidate plasticity-related gene 15)可由神经活动或神经营养素(neurotrophins,NTs)激活.实验表明neuritin能够促进神经元突起的生长和分支,在神经元可塑性及神经元再生中发挥着重要的作用.近年来的研究证实,neuritin不仅参与神经系统中多项生理功能的调节,还在血管生成以及相关肿瘤的发生中扮演着重要角色.本文将综述neuritin蛋白的翻译表达和调控机理、生物学效用,并围绕neuritin如何发挥其生物活性及目前研究中存在的热点和难点进行讨论.
-
TNF-α和Neuritin在四肢骨折合并脊髓损伤患者血清中的表达变化及临床意义
目的 探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和神经突起因子(Neuritin)水平在四肢骨折伴脊髓损伤中对骨折愈合的作用.方法 选择2016年5月～2017年4月收治的42例单纯骨折患者(单纯骨折组)、26例单纯脊髓损伤患者(单纯脊髓损伤组)、30例四肢骨折合并脊髓损伤患者(四肢骨折合并脊髓损伤组);同期选取48例在体检中心行健康体检的正常人(正常组).采用酶联免疫吸附(ELISA)技术检测血清TNF-α和Neuritin水平在各病例组术后第3、7、14天的变化情况,同时检测其在正常组中的表达水平.结果 术后不同时间段,单纯骨折组、单纯脊髓损伤组、四肢骨折合并脊髓损伤组血清TNF-α、Neuritin含量呈动态表达现象,且均高于正常组,其中以四肢骨折合并脊髓损伤组变化大,其TNF-α、Neuritin变化幅度明显高于其他三组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 四肢骨折合并脊髓损伤患者外周血中TNF-α与Neuritin含量变化情况明显高于其余三组,表明与创伤骨折的修复存在密切关联,这两种因子可能在骨折愈合过程中共同发挥作用,故推断其可能是脊髓损伤后加速骨折愈合的关键因子.
