首页 > 文献资料
-
极化型与去极化型心脏停搏液对离体大鼠心肌细胞胞质游离钙离子含量的影响
目的 观察极化型心脏停搏液(TTX组)与传统的去极化型停搏液(St.Thomas-2号液,STH-2)对急性分离的大鼠心肌细胞胞质静息游离钙离子含量的影响.方法 45只健康Wistar大鼠,随机分为正常对照组、STH-2组和TTX组.采用急性酶学分离的方法获取成熟大鼠心室肌细胞,持续灌流给药,利用离子成像技术,观察不同配方的心脏停搏液对于急性分离的大鼠心肌细胞胞质游离钙离子浓度的影响.结果 ①STH-2组和TTX组细胞质内游离钙离子含量均较灌流前后升高(P＜0.05);②STH-2组恢复正常台式液灌流后15 min与灌流前比较差异有统计学意义,而TTX组灌流前后的细胞内钙离子含量差异无统计学意义.结论 与传统的STH-2号液相比,采用加有钠离子通道选择性的拮抗剂TTX的极化型心脏停搏液可以减少心肌细胞在停搏液灌流过程中的胞内钙离子含量,减轻钙超载,因而具有较好的心肌细胞保护作用.
-
糖皮质激素快速抑制ATP引起的HT-4细胞[Ca2+]i升高
目的:糖皮质激素(GC)是体内一类重要的调节分子,其作用机制复杂而多样,既包括被普遍认同的基因组机制,又有以起效快速(潜伏期从数秒至数分钟)为特点的非基因组作用方式.本室在PC12细胞(大鼠嗜铬细胞瘤)中的研究表明,GC可通过百日咳毒素(PTX)敏感的G蛋白-蛋白激酶C(PKC)途径快速抑制烟碱引起的[Ca2+]i升高.为进一步研究GC的快速作用机制及其普遍性,本研究观察了GC对ATP引起的HT-4细胞(小鼠神经细胞系)[Ca2+]i升高的影响,并研究了其中的信号转导途径.方法:本研究利用荧光指示剂Fura-2进行钙离子成像,激发波长为340和380 nM,发射波长为510 nM.结果:我们首次发现在HT-4细胞上同时存在P2X和P2Y受体,两者共同参与细胞对ATP的反应.P2X受体是一种配基门控阳离子通道,活化后可引起胞外Ca2+内流.本研究首次发现,在HT-4细胞中,PKA和PKC活性的增加可抑制P2X受体介导的胞外Ca2+内流.P2Y受体是G蛋白耦联受体,引起胞内Ca2+释放.本研究发现该信号转导过程受PKC的负性调节,但对PKA活性的变化不敏感.我们还发现,GC(如皮质酮)可快速抑制(潜伏期5 min)ATP引起的胞外Ca2+内流,而对胞内Ca2+释放没有影响,皮质酮的快速抑制作用不依赖于胞内受体,而与HT-4细胞胞膜上的特定结构有关.抑制PKA活性的药物可完全消除皮质酮产生的抑制作用,而PKC抑制剂Ro31-8220对皮质酮的作用没有影响,提示皮质酮调节ATP反应的快速作用可能依赖PKA的激活.结论:GC能够以快速作用方式影响蛋白激酶(PKA、PKC等)的活性,其作用机制具有多样性特征.
