首页 > 文献资料
-
STAT1/SOCS1在高迁移率族蛋白1诱导的大鼠滑膜细胞中的表达
目的 探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1对滑膜细胞增殖的影响及机制.方法 ①常规培养的滑膜细胞,随机分为正常对照组和肿瘤坏死因子(TNF)-α组,培养6、12 h和24 h,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)免疫细胞化学法(ICC)检测HMGBI mRNA及蛋白在滑膜细胞中的表达变化;②常规培养的滑膜细胞,随机分为正常对照组、HMGB1组,分别培养6、12 h和24 h,RT-PCR检测磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT1)mRNA表达;ICC和流式细胞术(FCM)检测p-STAT1、细胞激酶信号抑制剂(SOCSl)蛋白的表达;ICC检测PCNA蛋白的表达.结果 ①TNF-α刺激6、12、24 h显著上调HMGB1mRNA的表达[0.86,0.92,1.06 vs 0.70,P<0.01];其蛋白表达亦增强,HMGB1蛋白不仅表达于细胞核,而且出现于胞质中;② HMGB1作用6、12、24 h显著增强STAT1 mRNA及蛋白的表达量[0.30,0.69,1.05 vs 0.24,P<0.01]及[1.34±0.09,1.55±0.16,1.74±0.13 vs 1.00±0.15,P<0.01];SOCS1蛋白量分别为1.43±0.10、1.58±0.05和1.24±0.15,呈先升高后下降.③ p-STAT1与SOCS1蛋白表达呈负相关(r=-0.484,P=0.04).结论 HMGB1是滑膜细胞增殖过程中的重要细胞因子,其可能通过上调STAT1的表达和活性,促进细胞增殖.
-
三氧化二砷对高迁移率族蛋白诱导的大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用
目的:探讨三氧化二砷(AS2O3)对高迁移率族蛋白1(HMGB1)诱导的大鼠滑膜细胞(RSC-364细胞)增殖的抑制作用及其机制.方法:将常规培养的RSC-364细胞分为正常对照组、HMGB1组及HMGB1加0、5、10、20、40和80 μmol·L-1 AS2O3实验组;MTT法检测不同浓度AS2O3对RSC-364细胞生长的影响,RT-PCR检测STAT1 mRNA的表达变化,免疫细胞化学和流式细胞术检测STAT1、cyclin D1和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化.结果:①MTT结果显示,AS2O3可抑制HMGB1诱导的RSC-364细胞的增殖,80 μmol·L-1 AS2O3作用24 h抑制率可达88.18%,其抑制作用呈时间和浓度依赖性(P＜0.05或P＜0.01);②与对照组比较,HMGB1组STAT1 mRNA及STAT1、PCNA、cyclin D1蛋白表达量增强,AS2O3组STAT1 mRNA及STAT1、PCNA、cyclin D1蛋白降低,并呈剂量依赖性(P＜0.01);③STAT1与cyclin D1蛋白表达呈正相关关系(r=0.842,P=0.001).结论:AS2O3能够抑制HMGB1诱导的滑膜细胞的增殖,其机制可能与抑制STAT1的活性从而下调细胞周期调节蛋白cyclin D1的表达有关.
关键词： 滑膜细胞 砷剂 高迁移率族蛋白类 信号转导和转录激活子1 细胞周期蛋白D1 -
大鼠DAI脑细胞凋亡与Phospho-Ser727 Stat1表达的相关性
目的 探讨Stat1是否参与弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury, DAI)后神经细胞凋亡的病理生理过程.方法 应用自由落体撞击模型复制大鼠DAI模型,分为正常对照组、假手术组和打击后不同时间组(6、12、24、48、72h,5d和10d).采用HE染色和镀银染色观察大鼠脑组织的病理改变,用流式细胞检测脑组织中脑细胞的凋亡率,RT-PCR法测定脑组织中bax和bcl-2的表达变化,免疫组织化学法测定脑组织中不同脑区727位丝氨酸磷酸化的信号转导与转录激活子1 (Phospho-Ser727 Stat1)的表达情况.结果 DAI后HE染色未见脑挫裂伤,镀银染色可见神经轴索扭曲肿胀,个别断端膨大形成轴缩球;损伤组脑细胞的凋亡率和脑组织中bax和bcl-2 cDNA扩增产物的比值24h达到大值,随后下降;不同脑区Phospho-Ser727 Stat1表达升高,24h达峰后下降,至10d较对照组仍有显著差异;阳性细胞主要是神经元,在不同脑区也有一定量的神经胶质细胞阳性表达.脑组织中Phospho-Ser727 Stat1表达变化与bax和bcl-2的cDNA扩增产物比值的变化具有正相关性,相关系数r为0.921.结论 大鼠DAI后Stat1的激活和损伤后脑细胞的凋亡有关,应与损伤后二次打击有关.
关键词： 法医病理学 弥漫性轴索损伤 信号转导和转录激活子1 神经胶质细胞 二次打击
