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流式细胞术检测九节龙皂甙对Hela细胞凋亡的诱导作用

梁克明;王四旺;谢艳华;王晓娟

摘要: 0 引言  细胞凋亡(Apoptosis)是一种生理性细胞程序化死亡,与肿瘤的发生、发展密切相关,已成为当前肿瘤研究的新热点. 九节龙皂甙是从川产九节龙全草中提出的单体[1],我们观察九节龙皂甙诱导Hela细胞凋亡,采用流式细胞术(flow cytometry, FCM)进行分析,结果如下:1 材料和方法1.1 细胞系及细胞培养 人宫颈癌细胞株(Hela)为上皮样癌细胞,本校403研究所 提供. 细胞培养方法见参考文献[2].1.2 细胞凋亡的诱导和分析 实验组分别以1.56~50.0 μg*mL-1 九节龙皂甙(本校药物研究所提供)作用Hela细胞(106*mL-1) 0~72 h,未经过药物处理的细胞为阴性对照 组,加入等量培养液(100 mL*L-1胎牛血清的RPMI 1640培养液)中细胞常规培养,按作 用不同时间,分别收集细胞,经PBS洗涤2次,加入-4℃ 700 mL*L-1乙醇固定过夜, 离心收集细胞,再经PBS洗涤后,依次加入膜穿孔剂,溴化乙锭(PI)和Rnase 4℃染色30 min,350 目筛网过滤,Epics-profileⅡ流式细胞仪(美国Coulter公司)上进行DNA含量及细胞周期分析.

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