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3种流感病毒检测方法的比较
目的 对病毒分离培养法、实时荧光PCR法和鸡胚培养法3种检测流感病毒的方法和结果进行比较研究,筛选快速准确的检测方法,为流感监测与防控工作提供及时可靠的病原学依据.方法 同时采用病毒分离培养法、实时荧光PCR法和鸡胚培养法对2014年10月～ 2015年3月牡丹江市流感监测哨点医院采集的流感样病例咽拭子样本进行检测,比较检测结果.结果 实时荧光PCR法的流感病毒核酸检测阳性率为15.52％,其中169份为季节性H3N2流感病毒,73份为B型Yamagata株;病毒分离培养法的阳性率为6.29％,分离出63株季节性H3N2流感病毒,35株B型Yamagata株;鸡胚分离培养法检出率为0.64％.3种方法中,实时荧光PCR法的阳性率高,病毒分离培养法次之,鸡胚分离培养法阳性率低.结论 实时荧光PCR法比病毒分离培养法和鸡胚培养法灵敏快捷、特异性强、敏感度高,适用于流感病毒的快速检测.
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鸡胚法分离福建省甲型H1N1流感病毒及分离株特征
目的 建立甲型H1N1流感病毒鸡胚分离方法 ,了解病毒分离株特征,为疫苗制备和开展实验室常规监测等奠定基础.方法 呼吸道标本接种鸡胚尿囊腔;血凝(HA)法测定收获的尿囊液中病毒滴度;逆转录PCR法检测病毒亚型特异性.使用甲醛灭活鸡胚分离物,灭活效果采用鸡胚接种法评价.血凝抑制(HI)实验检测急性期和恢复期血清,评价检测病毒感染后的免疫应答情况.结果 从13份患者的呼吸道标本中分离出12株甲型H1N1流感病毒.多数病毒可在第二次传代鸡胚中分离到.病毒分离株的血凝滴度较低,为1∶1～16.阳性分离物再次接种鸡胚无法显著提高其HA效价.同鸡和人"O"型红血球比较,使用豚鼠红细胞可得到更高的血凝滴度.1‰甲醛可在24 h内完全灭活病毒,但同时病毒的HA效价显著降低.病毒感染后,恢复期的HI滴度较急性期有2～16倍升高,HI抗体4倍增长需要约3w时间.结论 鸡胚分离可应用于甲型H1N1流感病毒的分离,病毒的HA滴度较低.尽管甲醛可迅速灭活病毒,但灭活后病毒抗原血凝效价难以维持.病毒感染后,特异性血凝抗体产生较慢,同时滴度较低.基层实验室采用豚鼠血球更适合于病毒的HA滴度测定.
