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  • 一种快速、简便的模板提取方法用于 PCR 检测粪便中的金黄色葡萄球菌的研究

    作者:付素兰;刘景武;孙文泽

    目的:建立一种快速、简便的模板提取方法用于 PCR 检测粪便中的金黄色葡萄球菌。方法利用 FTA滤膜,无需增菌,直接从人工污染金黄色葡萄球菌的粪便中提取 DNA 模板,以金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因(nuc)为靶基因,经过 PCR 扩增得到279 bp 的产物。通过凝胶电泳,和凝胶成像技术观察结果。结果使用 FTA 滤膜可有效的提取 DNA 模板,消除了样本中的 PCR 抑制因子,通过 PCR 方法检测人工污染的粪便中的金黄色葡萄球菌,检出限为102 cfu/ml,可在6 h 内完成检测。结论FTA 滤膜用于 PCR 检测粪便中的金黄色葡萄球菌操作简便、快速。使用 FTA 滤膜法制备模板 DNA,为食源性致病菌快速检测构建了一个技术平台。

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